J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y R a d i o - p r o t e c t i v e a n d a n t i - c l a s t o g e n i c e f f e c t s o f B a r l e r i a l u p u l i n a L i n d l . e x t r a c t a g a i n s t γ ( g a m m a ) - r a y ( 1 . 2 G y ) i n d u c e d m i t o t i c c h r o m o s o m a l a b e r r a t i o n s o f l a b o r a t o r y m i c e M u s m u s c u l u s a n d i t s e f f e c t o n f i s h t u m o r i n d u c e d a f t e r γ - i r r a d i a t i o n . K e y w o r d s : B a r l e r i a l u p u l i n a L i n d l ; γ ( g a m m a ) - r a y ; c h r o m o s o m a l a b e r r a t i o n s ; m i c e b o n e m a r r o w c e l l s ; r a d i a t i o n p r o t e c t i o n ; a n t i - c l a s t o g e n i c ; a n t i - t u m o r ; a n t i - c a n c e r . A B S T R A C T : C a n c e r a n d t u m o r f o r m a t i o n a r e a c o m m o n p r o b l e m t o m a n k i n d a l l o v e r t h e g l o b e . C a n c e r i s a l i f e t h r e a t e n i n g d i s e a s e . I n t h i s s t u d y , w e h a v e i n v e s t i g a t e d f o r r a d i o - p r o t e c t i o n b y u s i n g B a r l e r i a l u p u l i n a L i n d l . p l a n t e x t r a c t ( B L P E ) o n m i c e , o n e h o u r p r e a n d o n e h o u r p o s t t r e a t e d w i t h γ - r a y ( 1 . 2 G y d o s e ) . A d u l t h e a l t h y m i c e w e r e s u b j e c t e d t o w h o l e b o d y γ - i r r a d i a t i o n ( 1 . 2 G y ) . D i f f e r e n t t y p e s o f m i t o t i c c h r o m o s o m a l a b e r r a t i o n s w e r e s t u d i e d . O u t o f t h e t w o s e t s , m a x i m u m p r o t e c t i o n w a s o b t a i n e d w i t h B L P E p o s t t r e a t e d a n i m a l s ( 7 2 . 2 2 % ) . A n a l y s i s o f t h e d a t a r e v e a l e d t h a t B L P E c a n g i v e s i g n i f i c a n t p r o t e c t i o n t o m i c e a g a i n s t c h r o m o s o m a l d a m a g e i n d u c e d b y γ - r a y . M o r e o v e r , t h i n l a y e r c h r o m a t o g r a p h y a n d p h y t o c h e m i c a l a n a l y s i s r e v e a l e d t h e p r e s e n c e o f s t e r o i d , t e r p e n o i d , g l y c o s i d e s , f l a v o n o i d , t a n n i n s a n d c a r b o h y d r a t e , i n t h e B L P E . B L P E w a s a l s o f o u n d t o r e d u c e γ - r a y i n d u c e d t u m o r i n f i s h ( O r e o c h r o m i s m o s s a m b i c u s ) . T h u s w e r e p o r t f o r t h e f i r s t t i m e p o t e n t a n t i - c l a s t o g e n i c a n d a n t i t u m o r a c t i v i t y o f B L P E i n m i c e a n d f i s h , r e s p e c t i v e l y . 4 3 9 - 4 4 7 | J R B | 2 0 1 2 | V o l 2 | N o 5 T h i s a r t i c l e i s g o v e r n e d b y t h e C r e a t i v e C o m m o n s A t t r i b u t i o n L i c e n s e ( h t t p : / / c r e a t i v e c o m m o n s . o r g / l i c e n s e s / b y / 2 . 0 ) , w h i c h g i v e s p e r m i s s i o n f o r u n r e s t r i c t e d u s e , n o n - c o m m e r c i a l , d i s t r i b u t i o n a n d r e p r o d u c t i o n i n a l l m e d i u m , p r o v i d e d t h e o r i g i n a l w o r k i s p r o p e r l y c i t e d . w w w . j r e s e a r c h b i o l o g y . c o m A u t h o r s : P r a d i p K u m a r S u r 1 , P r a n a b K u m a r D a s 2 . I n s t i t u t i o n : 1 . A s s o c i a t e P r o f e s s o r , C y t o g e n e t i c s L a b o r a t o r y , D e p t . o f Z o o l o g y , K a n c h r a p a r a C o l l e g e , K a n c h r a p a r a - 7 4 3 1 4 5 , D i s t - ( N ) 2 4 P g n s , W e s t B e n g a l , I n d i a . 2 . R e s e a r c h S c h o l a r , C y t o g e n e t i c s L a b o r a t o r y , D e p t . o f Z o o l o g y , K a n c h r a p a r a C o l l e g e , K a n c h r a p a r a - 7 4 3 1 4 5 , D i s t - ( N ) 2 4 P g n s , W e s t B e n g a l , I n d i a . C o r r e s p o n d i n g a u t h o r : P r a d i p K u m a r S u r . E m a i l : d r p k s u r @ r e d i f f m a i l . c o m W e b A d d r e s s : h t t p : / / j r e s e a r c h b i o l o g y . c o m / d o c u m e n t s / R A 0 2 5 7 . p d f . D a t e s : R e c e i v e d : 1 4 J u n 2 0 1 2 A c c e p t e d : 2 7 J u n 2 0 1 2 P u b l i s h e d : 3 0 J u n 2 0 1 2 A r t i c l e C i t a t i o n : P r a d i p K u m a r S u r , P r a n a b K u m a r D a s . R a d i o - p r o t e c t i v e a n d a n t i - c l a s t o g e n i c e f f e c t s o f B a r l e r i a l u p u l i n a L i n d l . e x t r a c t a g a i n s t γ ( g a m m a ) - r a y ( 1 . 2 G y ) i n d u c e d m i t o t i c c h r o m o s o m a l a b e r r a t i o n s o f l a b o r a t o r y m i c e M u s m u s c u l u s a n d i t s e f f e c t o n f i s h t u m o r i n d u c e d a f t e r γ - i r r a d i a t i o n . J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 2 ) 2 ( 5 ) : 4 3 9 - 4 4 7 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y O r i g i n a l R e s e a r c h J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y A n I n t e r n a t i o n a l S c i e n t i f i c R e s e a r c h J o u r n a l A n I n t e r n a t i o n a l S c i e n t i f i c R e s e a r c h J o u r n a l

I N T R O D U C T I O N C a n c e r i s a b r o a d t e r m i n m e d i c a l b i o l o g y w h e r e u n c o n t r o l l e d c e l l g r o w t h t a k e s p l a c e l e a d i n g t o t u m o r f o r m a t i o n . M a l i g n a n t t u m o r s a r e c a l l e d c a n c e r ( K u m a r V e t a l . , 2 0 0 6 ) . A b o u t t e n m i l l i o n p e o p l e a r e d i a g n o s e d w i t h c a n c e r a n d s i x m i l l i o n d i e s e v e r y y e a r a l l o v e r t h e w o r l d d u e t o c a n c e r ( P a r k K 2 0 1 1 ) . C h r o m o s o m a l a b e r r a t i o n s l e a d t o t u m o r f o r m a t i o n a n d c a n c e r ( D o n n a G A e t a l . , 2 0 0 3 ) . T h e p i o n e e r i n g d i s c o v e r y b y M u l l e r ( 1 9 2 7 ) o n a r t i f i c i a l m u t a g e n e s i s i n D r o s o p h i l a o p e n e d a n e w h o r i z o n t o t h e c y t o g e n e t i c s t u d y o f c h r o m o s o m a l a b e r r a t i o n s . S u r P K e t a l . , ( 1 9 8 9 , 2 0 0 4 , 2 0 1 0 ) s t u d i e d t h e e f f e c t s o f d i f f e r e n t d o s e s o f X - r a y s o n g r a s s h o p p e r c h r o m o s o m e s . K i m H K e t a l . , ( 2 0 1 2 ) s t a t e d t h a t c y t o t o x i c c h e m o t h e r a p y r e m a i n s t h e p r i m a r y t r e a t m e n t o p t i o n f o r m a n y c a n c e r p a t i e n t s . S e a r c h f o r a r a d i o - p r o t e c t i v e a g e n t h a d b e e n i n t e n s e l y c a r r i e d o u t b y w o r k e r s l i k e P a t t e t a l . , ( 1 9 4 9 ) , M o z d a r a n i a n d N a z a r i ( 2 0 0 9 ) , J a g e t i a e t a l . , ( 2 0 0 3 ) e t c . I n t r a d i t i o n a l m e d i c i n e , B a r l e r i a l u p u l i n a p l a n t i s e x t e r n a l l y u s e d a s a n a n t i - i n f l a m m a t o r y a g e n t ( K a n c h a n a p o o m T e t a l . , 2 0 0 1 ) a n d e v e n a g a i n s t s n a k e b i t e s , d o g b i t e s , s w e l l i n g d u e t o f a l l , i n s e c t b i t e ( D o s s A e t a l . , 2 0 1 1 ) , h e r p e s s i m p l e x a n d h e r p e s z o s t e r ( W a n i k i a t P e t a l . , 2 0 0 8 ) . E v e n , a n t i - d i a b e t i c p o t e n t i a l o f t h i s p l a n t e x t r a c t i n r a t s h a d b e e n r e p o r t e d ( S u b a V e t a l . , 2 0 0 4 ) . B u t a n t i - c l a s t o g e n i c , a n t i t u m o r , a n t i - c a n c e r a n d r a d i a t i o n p r o t e c t i o n a c t i v i t i e s o f t h i s p l a n t e x t r a c t h a d n o t b e e n r e p o r t e d h i t h e r t o . I n t h e p r e s e n t s t u d y , w e h a v e r e p o r t e d f o r t h e f i r s t t i m e , p o t e n t a n t i c l a s t o g e n i c a c t i v i t y o f B a r l e r i a l u p u l i n a L i n d l . P l a n t L e a f e x t r a c t ( B L P E ) i n m i c e , a n d a n t i t u m o r a c t i v i t y i n f i s h , u p t o a s i g n i f i c a n t l e v e l . M A T E R I A L S A N D M E T H O D S P r e p a r a t i o n o f t h e p l a n t e x t r a c t : B a r l e r i a l u p u l i n a o f A c a n t h a c e a e f a m i l y ( c o m m o n n a m e h o p h e a d P h i l i p p i n e v i o l e t ) ( F i g . ( i ) , w a s i d e n t i f i e d f r o m C e n t r a l N a t i o n a l H e r b a r i u m , B o t a n i c a l S u r v e y o f I n d i a , H o w r a h - 7 1 1 1 0 3 , W e s t B e n g a l , I n d i a ( M i n i s t r y o f E n v i r o n m e n t & F o r e s t s , G o v t . o f I n d i a ) . L e a v e s o f t h i s p l a n t w e r e c l e a n e d , w a s h e d a n d d r i e d i n s h a d e . L e a f e x t r a c t w a s o b t a i n e d f r o m t h e d r i e d l e a v e s b y r u n n i n g 2 0 c y c l e s o f S o x h l e t E x t r a c t i o n ( c o n t i n u o u s h o t e x t r a c t i o n ) u s i n g e t h a n o l ( 9 9 . 9 % ) . A p a r t o f t h i s B a r l e r i a l u p u l i n a E t h a n o l E x t r a c t ( B L E E ) w a s u s e d f o r T L C a n d p h y t o c h e m i c a l a n a l y s i s . T h e n t h e B L E E w a s d r i e d t o r e m o v e t h e e t h a n o l , a n d d i s s o l v e d i n d i s t i l l e d w a t e r t o m a k e B a r l e r i a l u p u l i n a P l a n t E x t r a c t ( B L P E ) . 1 % o f t h i s s t o c k s o l u t i o n w a s u s e d f o r i n j e c t i o n i n t o m i c e a n d f i s h . E x p e r i m e n t a l P r o t o c o l w i t h a n i m a l s : T h e a n i m a l s w e r e d i v i d e d i n t o f o l l o w i n g s e t s : M i t o t i c c h r o m o s o m e s f r o m f e m u r b o n e m a r r o w c e l l s o f m i c e ( S E T I , S E T I I , S E T I I I ) w e r e s t u d i e d f o r e a c h s e t o f a n i m a l s a f t e r 1 h r , 1 6 h r , 4 8 h r , 1 w e e k , 2 w e e k s a n d 4 w e e k s ( 1 m o n t h ) o f t r e a t m e n t . T h e s t u d y i s c l e a r e d b y A n i m a l E t h i c a l C o m m i t t e e , D e p t o f Z o o l o g y , K a l y a n i U n i v e r s i t y , W e s t B e n g a l , I n d i a . P r e p a r a t i o n o f m e t a p h a s e p l a t e s a n d d a t a s c o r i n g : T h e m i c e w e r e i n j e c t e d i n t r a p e r i t o n i a l l y w i t h 0 . 0 3 % c o l c h i c i n e s o l u t i o n a t 1 m l / 1 0 0 g m b o d y w e i g h t S u r a n d D a s , 2 0 1 2 4 4 0 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 2 ) 2 ( 5 ) : 4 3 9 - 4 4 7 S E T I ( B L P E p r e - t r e a t e d S e r i e s ) : M i c e i n j e c t e d w i t h B L P E a t 1 m l p e r 1 0 0 g m b o d y w e i g h t , o n e h o u r b e f o r e w h o l e b o d y γ - i r r a d i a t i o n ( 1 . 2 G y ) f r o m C o b a l t ( C o 6 0 ) S E T I I ( C O N T R O L ) M i c e e x p o s e d t o w h o l e b o d y γ - i r r a d i a t i o n ( 1 . 2 G y ) f r o m C o b a l t ( C o 6 0 ) S E T I I I ( B L P E p o s t - t r e a t e d S e r i e s ) : M i c e i n j e c t e d w i t h B L P E a t 1 m l / 1 0 0 g m b o d y w e i g h t , o n e h o u r a f t e r w h o l e b o d y γ - i r r a d i a t i o n ( 1 . 2 G y ) f r o m C o b a l t ( C o 6 0 ) S E T I V ( F i s h ) : F r e s h w a t e r t i l a p i a f i s h O r e o c h r o m i s m o s s a m b i c u s e x p o s e d t o w h o l e b o d y γ - i r r a d i a t i o n ( 1 . 2 G y ) f r o m C o b a l t ( C o 6 0 )

S u r a n d D a s , 2 0 1 2 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 2 ) 2 ( 5 ) : 4 3 9 - 4 4 7 4 4 1 T a b l e 1 : V a r i o u s c h r o m o s o m a l a b e r r a t i o n s f o r m i c e : S E T I , S E T I I a n d S E T I I I a t d i f f e r e n t t i m e i n t e r v a l s T i m e i n t e r v a l A n i m a l S E T N o . o f c e l l s N o . o f c h r o m o s o m e s T y p e s o f a b e r r a t i o n s T o t a l A b e r r a t i o n s P e r c e n t a g e o f T o t a l A b e r r a t i o n s c h r o m a t i d b r e a k i s o c h r o m a t i d g a p i s o c h r o m a t i d b r e a k s u b c h r o m a t i d g a p c e n t r o m e r i c d i s s o c i a t i o n t r a n s l o c a t i o n r i n g c h r o m o s o m e r a b b i t e a r c h r o m o s o m e r a b b i t e a r c h r o m o s o m e w i t h g a p 1 h o u r S E T I 3 0 0 1 2 0 0 0 3 5 3 0 1 8 1 5 8 2 1 6 1 8 3 6 3 6 2 8 6 2 . 3 8 % S E T I I 3 0 0 1 2 0 0 0 7 3 3 6 2 0 4 0 5 3 8 1 2 7 5 1 4 0 4 2 1 3 . 5 1 % S E T I I I 3 0 0 1 2 0 0 0 3 6 3 5 5 3 3 5 2 7 2 2 3 3 3 8 2 6 1 2 . 1 8 % 1 6 h o u r S E T I 3 0 0 1 2 0 0 0 1 8 2 6 0 6 4 1 2 1 2 6 3 1 5 1 3 1 6 7 1 8 3 1 0 6 8 8 . 9 0 % S E T I I 3 0 0 1 2 0 0 0 2 5 7 1 4 3 1 5 5 1 7 0 1 8 6 2 8 8 0 2 1 4 1 2 8 1 3 6 1 1 1 . 3 4 % S E T I I I 3 0 0 1 2 0 0 0 1 3 3 1 0 0 2 5 1 3 5 2 0 8 2 7 4 2 0 2 6 8 8 3 9 6 . 9 9 % 4 8 h o u r S E T I 3 0 0 1 2 0 0 0 1 5 2 1 0 2 6 2 1 0 1 3 5 1 1 4 4 2 6 1 1 8 9 0 3 7 . 5 3 % S E T I I 3 0 0 1 2 0 0 0 3 2 7 2 2 0 1 6 4 3 2 8 4 9 1 5 5 1 0 9 1 9 1 1 1 1 1 9 9 6 1 6 . 6 3 % S E T I I I 3 0 0 1 2 0 0 0 8 6 4 2 3 0 1 8 0 1 0 2 0 9 4 2 5 5 4 4 . 6 2 % 1 w e e k S E T I 3 0 0 1 2 0 0 0 2 5 2 1 5 1 3 1 0 2 5 2 1 0 5 5 5 2 0 3 1 0 1 8 9 8 7 . 4 8 % S E T I I 3 0 0 1 2 0 0 0 2 7 2 1 9 0 2 8 1 6 3 3 5 5 8 0 2 7 8 1 8 2 1 2 7 8 1 0 . 6 5 % S E T I I I 3 0 0 1 2 0 0 0 8 9 5 1 2 5 1 2 7 2 7 2 3 3 0 7 2 6 0 5 0 4 4 . 2 0 % 2 w e e k s S E T I 3 0 0 1 2 0 0 0 2 5 7 1 2 8 4 2 1 7 1 4 3 4 1 8 6 1 2 6 1 4 9 0 8 7 . 5 7 % S E T I I 3 0 0 1 2 0 0 0 3 3 0 8 0 2 6 2 1 7 2 4 5 1 0 9 2 7 2 8 5 4 1 1 1 6 9 . 3 0 % S E T I I I 3 0 0 1 2 0 0 0 1 4 2 2 1 5 6 2 6 5 2 5 1 7 1 0 0 6 2 4 9 9 4 . 1 6 % 4 w e e k s S E T I 3 0 0 1 2 0 0 0 6 7 3 0 3 3 6 8 6 6 3 4 2 5 1 0 0 8 4 3 1 3 . 5 9 % S E T I I 3 0 0 1 2 0 0 0 1 2 1 5 0 1 5 1 3 5 5 6 4 1 1 5 2 0 1 0 4 6 3 3 . 8 6 % S E T I I I 3 0 0 1 2 0 0 0 3 3 2 5 2 8 1 2 1 8 1 8 3 5 9 2 5 9 2 . 1 6 % T o t a l A b e r r a t i o n s S E T I 1 8 0 0 7 2 0 0 0 9 4 5 3 6 5 2 3 2 5 7 8 8 5 7 2 2 5 2 3 9 6 9 3 3 6 0 4 4 9 4 6 . 2 4 % S E T I I 1 8 0 0 7 2 0 0 0 1 3 8 0 7 1 9 4 0 8 1 0 5 3 1 3 8 6 3 9 4 2 8 5 5 8 5 4 2 5 6 6 3 5 9 . 2 2 % S E T I I I 1 8 0 0 7 2 0 0 0 5 1 9 2 1 3 6 7 6 8 6 3 6 5 1 5 5 1 8 1 4 5 1 2 7 9 2 9 1 6 4 . 0 5 % P e r c e n t a g e o f T o t a l A b e r r a t i o n s S E T I 1 . 3 1 % 0 . 5 1 % 0 . 3 2 % 0 . 8 0 % 1 . 1 9 % 0 . 3 1 % 0 . 3 3 % 0 . 9 6 % 0 . 5 0 % S E T I I 1 . 9 2 % 1 . 0 0 % 0 . 5 7 % 1 . 4 6 % 1 . 9 3 % 0 . 5 5 % 0 . 4 0 % 0 . 8 1 % 0 . 5 9 % S E T I I I 0 . 7 2 % 0 . 3 0 % 0 . 0 9 % 0 . 9 5 % 0 . 5 1 % 0 . 2 2 % 0 . 2 5 % 0 . 6 3 % 0 . 3 9 %

a f t e r t h e s i x d i f f e r e n t t i m e i n t e r v a l s a s m e n t i o n e d a b o v e . A f t e r 1 h r o f i n j e c t i o n , t h e m i c e w e r e c h l o r o f o r m e d a n d s a c r i f i c e d . T h e f e m u r b o n e w a s d i s s e c t e d o u t a n d b o n e m a r r o w w a s s u s p e n d e d i n 1 % s o d i u m c i t r a t e s o l u t i o n a n d f i x e d i n a c e t o - a l c o h o l ( a c e t i c a c i d : a l c o h o l 1 : 3 v / v ) . S l i d e p r e p a r a t i o n w a s d o n e b y d r o p p i n g f i x e d c e l l s o n c l e a n g r e a s e f r e e c h i l l e d s l i d e s ( w h i c h w e r e m a i n t a i n e d a t - 5 º C ) , s l i d e s w e r e h e a t f i x e d a n d a i r d r i e d . C h r o m o s o m e s w e r e s t a i n e d w i t h G i e m s a s t a i n i n g s o l u t i o n . S c o r i n g o f d a t a w a s d o n e b y u s i n g 3 0 0 w e l l - s p r e a d m e t a p h a s e p l a t e s f o r e a c h S E T a n d e a c h h o u r . N i n e d i f f e r e n t t y p e s o f s t r u c t u r a l c h r o m o s o m a l a b e r r a t i o n s w e r e s t u d i e d . P r e p a r a t i v e T h i n L a y e r C h r o m a t o g r a p h y ( T L C ) : P r e p a r a t i v e T L C w a s p e r f o r m e d t o i d e n t i f y a c t i v e c o m p o n e n t i n B L E E . F o r T L C , c o m m e r c i a l l y a v a i l a b l e 6 0 F 2 5 4 ( p o r e s i z e ; 6 0 Å , u v f l u o r e s c e n c e a t 2 5 4 n m , M e r c k , G e r m a n y ) s i l i c a g e l p l a t e s w e r e u s e d a s t h e s t a t i o n a r y p h a s e w h e r e a s c h l o r o f o r m : e t h y l a c e t a t e : e t h a n o l ( 4 : 3 . 5 : 2 . 5 ) w a s u s e d a s t h e m o b i l e p h a s e . T h e m o b i l e p h a s e w a s c h o s e n b y t r i a l - a n d - e r r o r m e t h o d . A d r o p o f B L E E w a s p u t o n t h e s i l i c a g e l p l a t e a n d T L C w a s r u n u s i n g t h e m o b i l e p h a s e . P h y t o c h e m i c a l a n a l y s i s : P h y t o c h e m i c a l a n a l y s i s w a s c a r r i e d o u t f o r f u r t h e r i d e n t i f i c a t i o n o f a c t i v e c o m p o n e n t i n B L E E . S t a n d a r d p h y t o c h e m i c a l t e s t s t o s t u d y t h e p r e s e n c e o f s t e r o i d , t e r p e n o i d , g l y c o s i d e , f l a v o n o i d , a l k a l o i d , t a n n i n , s a p o n i n , c a r b o h y d r a t e , p r o t e i n , f i x e d o i l a n d p H w e r e c a r r i e d o u t b y m e t h o d s d i s c u s s e d b y T r e a s e G E a n d E v a n s W C ( 1 9 9 7 ) . R E S U L T S C o m p a r i s o n b e t w e e n S E T I , S E T I I a n d S E T I I I m i c e ( T a b l e ( i ) ) : 3 0 0 c e l l s f o r e a c h h o u r f o r e a c h S E T w e r e s t u d i e d i n t h e s e s e r i e s ( t o t a l 1 8 0 0 c e l l s a n d t h e r e f o r e 7 2 0 0 0 c h r o m o s o m e s i n e a c h S E T ) . D i f f e r e n t t y p e s o f s t r u c t u r a l c h r o m o s o m a l a b e r r a t i o n s w e r e s t u d i e d ( T a b l e ( i ) , F i g ( i i ) ) a n d t h e s t u d y w a s d o n e a t v a r i o u s t i m e i n t e r v a l s , v i z : 1 h r , 1 6 h r , 4 8 h r , 1 w e e k , 2 w e e k a n d 4 w e e k s ( T a b l e ( i ) ) . I n c a s e o f S E T I I m i c e , t h e f r e q u e n c y o f c h r o m o s o m a l a b e r r a t i o n s i n c r e a s e d f r o m 1 h o u r t o 4 8 h o u r s , w a s m a x i m u m a t 4 8 t h h o u r ( 1 6 . 6 3 % ) a n d t h e n d e c r e a s e d t h e r e a f t e r . O n t h e o t h e r h a n d , l e s s f r e q u e n c y o f a b e r r a t i o n s w a s o b s e r v e d f o r S E T I a n d S E T I I I m i c e . A t 4 8 t h h o u r , S E T I I I m i c e s h o w e d m u c h l e s s c h r o m o s o m a l a b e r r a t i o n s ( 4 . 6 2 % ) t h a n S E T I m i c e ( 7 . 5 3 % ) ( T a b l e ( i ) , F i g ( i i i ) ) . M o r e o v e r , w h e n c o m p a r e d w i t h t y p e s o f a b e r r a t i o n s , m u c h h i g h e r p e r c e n t a g e o f a b e r r a t i o n s w a s o b s e r v e d w i t h S E T I I m i c e ( a s 1 . 9 3 % w i t h c e n t r o m e r i c d i s s o c i a t i o n , 1 . 9 2 % w i t h c h r o m a t i d b r e a k , e t c ) . B u t m u c h l e s s a b e r r a t i o n s h a d b e e n s c o r e d w i t h S E T I a n i m a l s ( a s 0 . 3 1 % w i t h t r a n s l o c a t i o n , e t c . ) a n d e v e n l e s s e r w e r e s c o r e d w i t h S E T I I I a n i m a l s ( a s 0 . 2 2 % w i t h t r a n s l o c a t i o n , e t c . ) ( T a b l e ( i ) ) . S t a t i s t i c a l A n a l y s i s ( C o m p a r i s o n b e t w e e n S E T I a n d S E T I I I m i c e ( T a b l e ( i i ) ) T o e v a l u a t e t h e e f f e c t i v e n e s s o f p r e - t r e a t m e n t ( S E T I ) a n d p o s t - t r e a t m e n t ( S E T I I I ) o f B L P E o n t h e m i c e , s t a t i s t i c a l a n a l y s i s w a s d o n e a c c o r d i n g t o m e t h o d s m e n t i o n e d b y S n e d e c o r G W ( 1 9 6 7 ) . A n a l y s i s o f t h e d a t a r e v e a l s , t h a t , i n t h e p o o l e d d a t a , t h e S t a n d a r d E r r o r ( S E ) , C r i t i c a l D i f f e r e n c e ( C D ) a t 5 % , C D a t 1 % l e v e l s f o r S E T I a n i m a l s a r e 1 2 7 . 6 0 , 2 5 0 . 1 0 a n d 3 0 8 . 5 7 r e s p e c t i v e l y . A n d t h a t f o r S E T I I I a r e 8 7 . 9 2 , 1 7 1 . 9 6 a n d 2 2 6 . 3 9 r e s p e c t i v e l y . T h e r e f o r e , t h e v a l u e s s h o w n b y S E T I I I a r e a l w a y s l e s s t h a n t h e S E T I . T h e t - V a l u e s , C h i - s q u a r e v a l u e s a n d r - V a l u e s a r e 7 . 5 7 * * , 5 1 . 5 8 * * a n d 0 . 9 0 * * r e s p e c t i v e l y ( s i g n i f i c a n t a t 1 % l e v e l ( h i g h l y s i g n i f i c a n t ) ) . T h e r e f o r e , P o s t T r e a t m e n t o f B L P E ( S E T I I I ) r e f l e c t s s i g n i f i c a n t l y h i g h p r o t e c t i o n t h a n t h e P r e T r e a t e d s e r i e s ( S E T I ) ( T a b l e ( i i ) . W h e r e a s , i n S E T I I a n i m a l s , c h r o m o s o m a l a b e r r a t i o n s w e r e m u c h h i g h e r . T h e r e f o r e i t m a y b e i n f e r r e d t h a t B L P E p r o v i d e d p r o t e c t i o n a g a i n s t γ - r a y ( 1 . 2 G y ) i n d u c e d m i t o t i c c h r o m o s o m a l a b e r r a t i o n s i n m i c e t o a s i g n i f i c a n t l y h i g h l e v e l . S u r a n d D a s , 2 0 1 2 4 4 2 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 2 ) 2 ( 5 ) : 4 3 9 - 4 4 7

S u r a n d D a s , 2 0 1 2 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 2 ) 2 ( 5 ) : 4 3 9 - 4 4 7 4 4 3 T a b l e 2 : S t a t i s t i c a l a n a l y s i s t o c o m p a r e b e t w e e n S E T I a n d S E T I I I m i c e A b e r r a t i o n S t a t i s t i c s N C w i t h a b e r r a t i o n C h r o m a t i d b r e a k I s o c h r o m a t i d g a p I s o c h r o m a t i d b r e a k S u b c h r o m a t i d g a p C e n t r o m e r i c d i s s o c i a t i o n T r a n s l o c a t i o n R i n g C h r o m o s o m e R a b b i t e a r c h r o m o s o m e R a b b i t e a r c h r o m o s o m e w i t h g a p P o o l e d S E T I + / - S . E . 1 1 . 0 6 3 7 . 7 1 1 8 . 4 5 8 . 7 9 2 1 . 3 3 5 3 . 4 1 1 4 . 2 6 1 1 . 2 3 2 5 . 7 9 2 8 . 2 7 1 2 7 . 6 0 S E T I I I + / - S . E . 2 7 . 8 7 1 8 . 8 5 1 4 . 9 7 4 . 4 0 4 1 . 7 3 1 5 . 1 6 1 1 . 6 7 8 . 9 7 2 8 . 5 7 8 . 9 1 8 7 . 9 2 S E T I C . D . a t 5 % 2 1 . 6 8 7 3 . 9 1 3 6 . 1 6 1 7 . 2 2 4 1 . 8 2 1 0 4 . 6 9 2 7 . 9 5 2 2 . 0 1 5 0 . 5 4 5 5 . 4 0 2 5 0 . 1 0 S E T I I I C . D . a t 5 % 5 4 . 5 1 3 6 . 8 7 2 9 . 2 9 8 . 6 1 8 1 . 6 2 2 9 . 6 5 2 2 . 8 3 1 7 . 5 4 5 5 . 8 8 1 7 . 4 3 1 7 1 . 9 6 S E T I C . D . a t 1 % 2 8 . 4 8 9 7 . 1 0 4 7 . 5 0 2 2 . 6 2 5 4 . 9 4 1 3 7 . 5 4 3 6 . 7 2 2 8 . 9 2 6 6 . 4 0 7 2 . 7 9 3 0 8 . 5 7 S E T I I I C . D . a t 1 % 7 1 . 7 6 4 8 . 5 4 3 8 . 5 5 1 1 . 3 3 1 0 7 . 4 5 3 9 . 0 4 3 0 . 0 5 2 3 . 0 9 7 3 . 5 6 2 2 . 9 5 2 2 6 . 3 9 t - V a l u e s 1 2 . 1 2 * * 6 . 2 7 * * 2 . 5 7 5 . 9 8 * * 1 . 1 8 3 . 7 0 * 1 . 6 3 1 . 5 2 4 . 3 1 * * 1 . 5 7 7 . 5 7 * * C h i - S q u a r e ( χ 2 ) V a l u e s 6 8 . 7 2 * * 2 9 . 9 6 * * 1 9 7 . 2 0 * * 5 8 . 6 5 * * 1 6 8 . 5 2 * * 2 5 9 . 3 4 * * 1 1 1 . 2 7 * * 1 0 1 . 5 2 * * 9 2 . 6 6 * * 9 6 . 4 5 * * 5 1 . 5 8 * * r - V a l u e s 0 . 0 8 0 . 8 4 * * - 0 . 2 4 - 0 . 0 7 0 . 2 5 - 0 . 1 0 - 0 . 1 2 - 0 . 4 8 0 . 6 4 * * 0 . 6 4 * * 0 . 9 0 * * * S i g n i f i c a n t a t 5 % l e v e l * * S i g n i f i c a n t a t 1 % l e v e l S t a t i s t i c a l a n a l y s i s o f t h e d a t a w e r e u n d e r t a k e n a s S t a n d a r d E r r o r ( S . E ) ; C r i t i c a l D i f f e r e n c e ( C . D ) a t 1 % a n d 5 % l e v e l ; t - t e s t ; c h i - s q u a r e ( χ ² ) a n a l y s i s a n d c o r r e l a t i o n c o e f f i c i e n t ( r - v a l u e ) o f b o t h t h e s e r i e s . N C = N u m b e r o f c e l l s .

P r e p a r a t i v e T L C : I n p r e p a r a t i v e T L C , s i x s p o t s ( r e t e n t i o n f a c t o r ( R f ) v a l u e s a s 0 . 0 8 9 , 0 . 1 9 6 , 0 . 3 4 , 0 . 4 6 , 0 . 5 3 , 0 . 8 4 ) w e r e o b t a i n e d ( F i g . ( i v ) ) . N o e x t r a s p o t w a s o b t a i n e d u n d e r u v ( 2 5 4 n m ) f l u o r e s c e n c e . P h y t o c h e m i c a l a n a l y s i s : P h y t o c h e m i c a l a n a l y s i s o f B L E E r e v e a l s t h e p r e s e n c e o f s t e r o i d , t e r p e n o i d , g l y c o s i d e , f l a v o n o i d , t a n n i n a n d c a r b o h y d r a t e . T h i s r e s u l t c o r r e s p o n d s t o t h e a p p e a r a n c e o f s i x s p o t s i n T L C . T h e p H o f B L E E h a d b e e n f o u n d t o b e 5 ( a c i d i c ) . E x p e r i m e n t s w i t h S E T I V f i s h e s ( O r e o c h r o m i s m o s s a m b i c u s ) I n f r e s h w a t e r t i l a p i a f i s h ( O r e o c h r o m i s m o s s a m b i c u s ) , t u m o r ( u l c e r p r o l i f e r a t i v e g r o w t h ) w a s o c c u r r e d n e a r t h e r i g h t n o s t r i l o f t h e f i s h a f t e r 1 3 d a y s o f γ - r a y ( 1 . 2 G y ) t r e a t m e n t . T h e r e a f t e r , a f t e r p o s t t r e a t m e n t w i t h B L P E , t h e t u m o r s u b s i d e d c o m p l e t e l y b y n i n e d a y s ( F i g : ( v ) ) . D I S C U S S I O N I t w a s r e p o r t e d t h a t t h r e e g e n e s - M Y C , E G F R a n d F G F R 2 p r e d i c t s p o o r s u r v i v a l i n f l u o r o u r a c i l - t r e a t e d m e t a s t a t i c g a s t r i c c a n c e r p a t i e n t s ( K i m H K e t a l . , 2 0 1 2 ) . I n p r e v i o u s s t u d i e s , M a n t e n a e t a l . , ( 2 0 0 8 ) r e p o r t e d r a d i a t i o n - i n d u c e d a b e r r a n t m e t a p h a s e s a n d m i c r o n u c l e a t e d e r y t h r o c y t e s a t 2 4 h r p o s t e x p o s u r e t o 4 G y γ r a d i a t i o n s . 4 4 4 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 2 ) 2 ( 5 ) : 4 3 9 - 4 4 7 S u r a n d D a s , 2 0 1 2 F i g 1 : B a r l e r i a l u p u l i n a p l a n t w i t h f l o w e r p o d F i g 2 : P h o t o m i c r o g r a p h s ( P M ) s h o w i n g v a r i o u s t y p e s o f s t r u c t u r a l c h r o m o s o m a l a b e r r a t i o n s i n m i c e P o s t - T r e a t e d w i t h B L P E ( S E T I I I ) P M 1 : r a b b i t - e a r c h r o m o s o m e , r i n g c h r o m o s o m e , r a b b i t - e a r c h r o m o s o m e w i t h g a p . P M 2 : t r a n s l o c a t i o n , c h r o m a t i d b r e a k . P M 3 : i s o c h r o m a t i d g a p , c h r o m a t i d b r e a k P M 4 : c e n t r o m e r i c d i s s o c i a t i o n , s u b c h r o m a t i d g a p , t r a n s l o c a t i o n . F i g 3 : C o m p a r a t i v e a n a l y s i s o f c h r o m o s o m a l d a m a g e f o r S E T I , S E T I I a n d S E T I I I m i c e w i t h r e s p e c t t o s i x d i f f e r e n t t i m e i n t e r v a l s

L e m o n e t a l . , ( 2 0 0 8 ) r e p o r t e d 2 G y γ r a d i a t i o n D N A d a m a g e i n w h o l e b o d y e x p o s e d n o r m a l a n d t r a n s g e n i c m i c e . E v e n J a g e t i a e t a l . , ( 2 0 0 3 ) p r o v e d t h a t n a r i n g i n , a c i t r u s f l a v o n o n e , p r o t e c t s m i c e f r o m γ i r r a d i a t e d c e l l u l a r D N A d a m a g e . D o s s A e t a l . , ( 2 0 1 1 ) s t a t e d t h e a n t i b a c t e r i a l e f f e c t s o f e x t r a c t s f r o m B a r l e r i a l u p u l i n a a n d a l s o e v a l u a t e d i t s p h y t o - c o n s t i t u e n t s . I n t h i s s t u d y , i t h a d b e e n o b s e r v e d t h a t i n o u r m i c e e x p o s e d o n l y t o γ - r a y ( 1 . 2 G y ) ( S E T I I ) , m a x i m u m p e r c e n t a g e o f a b e r r a t i o n w a s o b t a i n e d a t 4 8 t h h r ( 1 6 . 6 3 % ) ( T a b l e ( i ) , F i g ( i i i ) ) . B u t o n P r e - t r e a t i n g w i t h B L P E , t h e p e r c e n t a g e o f a b e r r a t i o n a t 4 8 t h h r i s r e d u c e d t o 7 . 5 3 % ( S E T I ) a n d i n P o s t - t r e a t e d s e r i e s i t w a s 4 . 6 2 % ( S E T I I I ) ( T a b l e ( i ) , ( F i g ( i i i ) . T h e r e f o r e , i t m a y b e c o n c l u d e d t h a t t h e e x t r a c t f r o m l e a v e s o f B a r l e r i a l u p u l i n a ( B L P E ) p r o v i d e d a s a n a m e l i o r a t i n g a g e n t a g a i n s t γ - r a y i n d u c e d s t r u c t u r a l c h r o m o s o m a l d a m a g e , i n m i c e , a n d p o s t t r e a t m e n t o f t h e p l a n t e x t r a c t h a d r e d u c e d c h r o m o s o m a l a b e r r a t i o n s u p t o a s i g n i f i c a n t l e v e l i . e . 7 2 . 2 2 % , s h o w i n g a g r e a t r o l e i n r a d i a t i o n - p r o t e c t i o n . M o r e o v e r , B L P E p r o v e d t o r e d u c e γ - r a y i n d u c e d t u m o r s i n f r e s h w a t e r f i s h , O r e o c h r o m i s m o s s a m b i c u s w i t h i n 9 d a y s ( F i g v ) . R e p e a t e d e x p e r i m e n t s o n o t h e r d o s e s o f g a m m a - r a y s ( 0 . 5 G y , 0 . 8 G y , 1 G y , 1 . 5 G y , 2 G y a n d 2 . 4 G y ) + B L P E a l s o s u p p o r t e d t h i s v i e w . W h o l e p l a n t e x t r a c t h a s a l r e a d y b e e n p a t e n t e d i n r e g a r d t o i t s a n t i - c l a s t o g e n i c , a n t i t u m o r , a n t i - c a n c e r a n d r a d i a t i o n p r o t e c t i o n a c t i v i t i e s . A C K N O W L E D G E M E N T S T h e a u t h o r s a r e h i g h l y t h a n k f u l t o U n i v e r s i t y G r a n t C o m m i s s i o n , B a h a d u r S h a h Z a f a r M a r g , N e w D e l h i - 1 1 0 0 0 2 , f o r p r o v i d i n g f i n a n c i a l s u p p o r t i n f o r m o f U G C M a j o r R e s e a r c h P r o j e c t i n Z o o l o g y , 2 0 1 1 e n t i t l e d S u r a n d D a s , 2 0 1 2 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 2 ) 2 ( 5 ) : 4 3 9 - 4 4 7 4 4 5 F i g 4 : P r e p a r a t i v e T L C s h o w i n g s i x d i f f e r e n t s p o t s , w i t h c o r r e s p o n d i n g R f v a l u e s . ( S A M P L E i n d i c a t e s t h e t w o s p o t s w h e r e t h e s a m e B L E E w e r e s p o t t e d F i g 5 : R e d u c t i o n o f t u m o r i n f i s h , O r e o c h r o m i s m o s s a m b i c u s ( i n d u c e d b y 1 . 2 G y g a m m a r a y ) t r e a t e d b y B L P E ( 1 g m % ) , i n 9 d a y s a n d c o m p a r e d w i t h C O N T R O L f i s h .

A s s e s s m e n t o f p r o t e c t i v e r o l e o f s o m e a y u r v e d i c f o r m u l a t i o n s o n a r t i f i c i a l m u t a g e n e s i s i n s o m e m a m m a l i a n m o d e l s m i c e M u s m u s c u l u s a n d s h r e w S u n c u s m u r i n u s ) ( F . N o : 3 9 - 5 7 9 / 2 0 1 0 ( S R ) ) . W e a l s o e x t e n d o u r s i n c e r e t h a n k s t o P r o f . I n d r a n i l M a n n a ( D i r e c t o r ) & D r . D e b a b r a t a B a s u a n d M r . B i s w a n a t h K u n d u , B i o c e r a m i c s & C o a t i n g D i v i s i o n , C e n t r a l G l a s s & C e r a m i c R e s e a r c h I n s t i t u t e , 1 9 6 R a j a S C M u l l i c k R o a d , K o l k a t a - 7 0 0 0 3 2 ( I N D I A ) , f o r p r o v i d i n g t h e n e c e s s a r y r a d i a t i o n f a c i l i t y . M o r e o v e r , t h e a u t h o r s h i g h l y a c k n o w l e d g e P r o f . P a n d e y ( T h e P r i n c i p a l ) a n d M s . M o u l i s h a B i s w a s , B e n g a l I n s t i t u t e o f P h a r m a c e u t i c a l S c i e n c e s , K a l y a n i , N a d i a , W e s t B e n g a l , I n d i a , f o r t h e w o r k o n e x t r a c t i o n o f p l a n t e x t r a c t , T L C a n d P h y t o c h e m i c a l a n a l y s i s . R E F E R E N C E S D o n n a G A , C o l i n C o , F r a n k M c C , J o e W G . 2 0 0 3 . C h r o m o s o m e a b e r r a t i o n s i n s o l i d t u m o r s . N a t G e n e t 3 4 : 3 6 9 - 3 7 6 . D o s s A , P a r i v u g u n a V , V i j a y a s a n t h i M a n d S r u t h i S u r e n d r a n . 2 0 1 1 . A n t i b a c t e r i a l e v a l u a t i o n a n d p h y t o c h e m i c a l a n a l y s i s o f c e r t a i n m e d i c i n a l p l a n t s , W e s t e r n G h a t s , C o i m b a t o r e . J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y . 1 : 2 4 - 2 9 . J a g e t i a G C , V e n k a t e s h a V A , R e d d y T K . 2 0 0 3 . N a r i n g i n , a c i t r u s f l a v o n o n e , p r o t e c t s a g a i n s t r a d i a t i o n - i n d u c e d c h r o m o s o m e d a m a g e i n m o u s e b o n e m a r r o w . M u t a g e n 1 8 ( 4 ) : 3 3 7 - 3 4 3 . K a n c h a n a p o o m T , K a s a i R , Y a m a s a k i K . 2 0 0 1 . I r i d o i d g l u c o s i d e s f r o m B a r l e r i a l u p u l i n a . P h y t o c h e m 5 8 : 3 3 7 - 3 4 1 . K i m H K , C h o i I J , K i m C G , K i m H S , O s h i m a A , Y a m a d a Y . 2 0 1 2 . T h r e e - g e n e p r e d i c t o r o f c l i n i c a l o u t c o m e f o r g a s t r i c c a n c e r p a t i e n t s t r e a t e d w i t h c h e m o t h e r a p y . T h e P h a r m a c o J r n l 1 2 : 1 1 9 - 1 2 7 . K u m a r V , A b b a s A K a n d F a u s t o N . 2 0 0 6 . R o b b i n s a n d C o t r a n P a t h o l o g i c B a s i s o f D i s e a s e , 7 t h E d i t i o n , R e e d E l s e v i e r I n d i a P v t . L t d . , N e w D e l h i , I n d i a . L e m o n J A , R o l l o C D , B o r e h a m D R . 2 0 0 8 . E l e v a t e d D N A d a m a g e i n a m o u s e m o d e l o f o x i d a t i v e s t r e s s : i m p a c t s o f i o n i z i n g r a d i a t i o n a n d a p r o t e c t i v e d i e t a r y s u p p l e m e n t . M u t a g e n 2 3 ( 6 ) : 4 7 3 - 4 8 2 . M a n t e n a S K , U n n i k r i s h n a n M K , U m a D e v i P . 2 0 0 8 . R a d i o p r o t e c t i v e e f f e c t o f s u l f a s a l a z i n e o n m o u s e b o n e m a r r o w c h r o m o s o m e s . M u t a g e n 2 3 ( 4 ) : 2 8 5 - 2 9 . M o z d a r a n i H , N a z a r i E . 2 0 0 9 . C y t o g e n e t i c d a m a g e i n p r e i m p l a n t a t i o n m o u s e e m b r y o s g e n e r a t e d a f t e r p a t e r n a l a n d p a r e n t a l γ - i r r a d i a t i o n a n d t h e i n f l u e n c e o f v i t a m i n C . R e p r o d u c t i o n R e s . , 1 3 7 : 3 5 - 4 3 . M u l l e r H J . 1 9 2 7 . A r t i f i c i a l t r a n s m u t a t i o n o f t h e g e n e . S c i . , 6 6 : 8 4 - 8 7 . P a r k K . 2 0 1 1 . P a r k s t e x t b o o k o f P r e v e n t i v e a n d S o c i a l M e d i c i n e . B h a n o t P u b l i s h e r s , J a b b a l p u r . 2 1 : 3 5 3 P a t t H M , T y r e e E B , S t r a u b e R L , S m i t h D E . 1 9 4 9 . C y s t e i n e p r o t e c t s a g a i n s t X - i r r a d i a t i o n . S c i . , 1 1 0 : 2 1 3 - 2 1 4 . S n e d e c o r G W , C o c h r a n W G . 1 9 6 7 . S t a t i s t i c a l M e t h o d s . I o w a S t U n i v P r e s s , A m e s , I o w a , U S A , S u b a V , M u r u g e s a n T , B h a s k a r a R a o R , G h o s h L , P a l M , M a n d a l S C . 2 0 0 4 . A n t i d i a b e t i c p o t e n t i a l o f B a r l e r i a l u p u l i n a e x t r a c t i n r a t s . F i t o t e r a p i a 7 5 ( 1 ) : 1 - 4 . S u r P K a n d M a n n a G K . 1 9 8 9 . A p r e l i m i n a r y s t u d y o f X - r a y i n d u c e d m a l e m e i o t i c c h r o m o s o m e a b e r r a t i o n o f g r a s s h o p p e r , O x y a v e l o x . P e r s p e c t i v e i n c y t o l o g y a n d g e n e t i c s ( E n d . - G . K . M a n n a a n d U . S i n h a ) . 6 : 8 9 5 - 8 9 9 . S u r P K a n d P a n d e y B N . 2 0 0 4 . A c o m p a r a t i v e s t u d y o f X - r a y a n d c h e m i c a l i n d u c e d m a r k e r c h r o m o s o m e a b e r r a t i o n i n g r a s s h o p p e r s , O x y a v e l o x a n d G e s o n u l a p u n c t i f r o n s a n d t h e i r a l t e r a t i o n s b y c h e m i c a l s . S u r a n d D a s , 2 0 1 2 4 4 6 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 2 ) 2 ( 5 ) : 4 3 9 - 4 4 7

P h . D . T h e s i s , M a g a d h U n i v e r s i t y , B o d h G a y a . S u r P K , D a s P K , T h a k u r A , R o y S . 2 0 1 0 . A c o m p a r a t i v e s t u d y o f X - r a y ( 1 6 0 r ) i n d u c e d m a l e m e i o t i c c h r o m o s o m e a b e r r a t i o n s i n t w o s h o r t - h o r n e d g r a s s h o p p e r s , O x y a v e l o x a n d G e s o n u l a p u n c t i f r o n s . P r o c Z o o l S o c I n d i a 9 ( 1 ) : 7 9 - 8 7 . T r e a s e G E , E v a n s W C . 1 9 9 7 . P h a r m a c o g n o s y . E d . X I V , M a c M i l l i a n P u b l . L t d . , L o n d o n . W a n i k i a t P , P a n t h o n g A , S u j a y a n o n P , Y o o s o o k C , R o s s i A G . 2 0 0 8 . T h e a n t i - i n f l a m m a t o r y e f f e c t s a n d t h e i n h i b i t i o n o f n e u t r o p h i l r e s p o n s i v e n e s s b y B a r l e r i a l u p u l i n a a n d C l i n a c a n t h u s n u t a n s e x t r a c t s . J E t h n o p h a r m a c o l 1 1 6 ( 2 ) : 2 3 4 - 2 4 4 . S u r a n d D a s , 2 0 1 2 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 2 ) 2 ( 5 ) : 4 3 9 - 4 4 7 4 4 7 S u b m i t y o u r a r t i c l e s o n l i n e a t F i c u s p u b l i s h e r s . c o m A d v a n t a g e s E a s y o n l i n e s u b m i s s i o n C o m p l e t e P e e r r e v i e w A f f o r d a b l e C h a r g e s Q u i c k p r o c e s s i n g E x t e n s i v e i n d e x i n g O p e n A c c e s s a n d Q u i c k s p r e a d i n g Y o u r e t a i n s y o u r c o p y r i g h t s u b m i t @ f i c u s p u b l i s h e r s . c o m w w w . f i c u s p u b l i s h e r s . c o m / s u b m i t 1 . p h p .