J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y B i o m o n i t o r i n g o f a i r p o l l u t i o n a r o u n d u r b a n a n d i n d u s t r i a l s i t e s K e y w o r d s : B i o m o n i t o r i n g , c h l o r o p h y l l , c a r o t e n o i d , p l a n t p r o t e i n , v i s i b l e i n j u r y , a i r p o l l u t i o n , b i o i n d i c a t o r s , f i e l d p l a n t s . A B S T R A C T : P l a n t s a r e t h e o n l y l i v i n g o r g a n i s m s w h i c h h a v e t o s u f f e r a l o t f r o m a u t o m o b i l e s e x h a u s t p o l l u t i o n a n d i n d u s t r i a l p o l l u t i o n b e c a u s e t h e y r e m a i n s t a t i c a t t h e i r h a b i t a t . E x p e r i m e n t s o n a i r a n d b i o m o n i t o r i n g w e r e c o n d u c t e d t o e v a l u a t e p o l l u t i o n i m p a c t o n t h e v e g e t a t i o n a l o n g t h e r o a d i n D i n d i g u l t o w n T a m i l N a d u . T h e p l a n t a t i o n a l o n g t h e r o a d s m a i n l y i n c l u d e A z a d i r a c t a i n d i c a , D e l o n i x e l a t a , M o r i n d a t i n c t o r i a , C a l o t r o p h i s , T h y m e r o s e m a r y a n d C y a n d a n d a c t y l o n . F o r b i o m o n i t o r i n g , t o t a l c h l o r o p h y l l , c a r o t e n o i d , a s c o r b i c a c i d , p r o t e i n a n d t o t a l s u g a r w e r e a n a l y z e d t o s t u d y t h e i m p a c t o f a i r p o l l u t a n t s . I t w a s o b s e r v e d t h a t v e g e t a t i o n a t t h e r o a d s i d e w i t h h e a v y t r a f f i c a n d i n d u s t r i e s w a s m u c h a f f e c t e d b y a i r p o l l u t a n t s . S i g n i f i c a n t r e d u c t i o n o f t o t a l c h l o r o p h y l l , c a r o t e n o i d , p r o t e i n a n d t o t a l s u g a r w a s o b s e r v e d . T h e s e v a r i a t i o n s c a n b e u s e d a s a n i n d i c a t o r o f a i r p o l l u t i o n f o r e a r l y d i a g n o s i s o f s t r e s s o r a s a m a r k e r f o r p h y s i o l o g i c a l d a m a g e t o t r e e s p r i o r t o t h e o n s e t o f v i s i b l e i n j u r y s y m p t o m s . I t i s c o n c l u d e d t h a t p l a n t s c a n b e u s e d a s i n d i c a t o r s f o r u r b a n a i r p o l l u t i o n , a n d i t i s n e e d t o p r o t e c t t h e r o a d s i d e p l a n t s f r o m a i r p o l l u t i o n . 0 0 7 - 0 1 4 | J R B | 2 0 1 2 | V o l 2 | N o 1 © F i c u s P u b l i s h e r s . T h i s O p e n A c c e s s a r t i c l e i s g o v e r n e d b y t h e C r e a t i v e C o m m o n s A t t r i b u t i o n L i c e n s e ( h t t p : / / c r e a t i v e c o m m o n s . o r g / l i c e n s e s / b y / 2 . 0 ) , w h i c h g i v e s p e r m i s s i o n f o r u n r e s t r i c t e d u s e , n o n - c o m m e r c i a l , d i s t r i b u t i o n , a n d r e p r o d u c t i o n i n a l l m e d i u m , p r o v i d e d t h e o r i g i n a l w o r k i s p r o p e r l y c i t e d . S u b m i t Y o u r M a n u s c r i p t w w w . f i c u s p u b l i s h e r s . c o m w w w . j r e s e a r c h b i o l o g y . c o m J o u r n a l o f R e s e a r c h i n b i o l o g y A n I n t e r n a t i o n a l O p e n A c c e s s O n l i n e R e s e a r c h J o u r n a l A u t h o r s : S a r a l a T h a m b a v a n i D 1 a n d P r a t h i p a V 2 . I n s t i t u t i o n : 1 . S r i M e e n a k s h i G o v e r n m e n t A r t s C o l l e g e f o r w o m e n ( A u t o n o m o u s ) , M a d u r a i , T a m i l n a d u . 2 . P S N A C o l l e g e o f E n g i n e e r i n g a n d t e c h n o l o g y , D i n d i g u l , T a m i l n a d u . C o r r e s p o n d i n g a u t h o r : S a r a l a T h a m b a v a n i D P h o n e N o : 9 4 8 7 1 3 6 9 9 7 8 0 5 6 9 7 3 6 6 6 W e b A d d r e s s : h t t p : / / j r e s e a r c h b i o l o g y . c o m / D o c u m e n t s / R A 0 1 7 0 . p d f . D a t e s : R e c e i v e d : 1 9 D e c 2 0 1 1 / A c c e p t e d : 2 9 D e c 2 0 1 1 / P u b l i s h e d : 0 7 J a n 2 0 1 2 A r t i c l e C i t a t i o n : S a r a l a T h a m b a v a n i D a n d P r a t h i p a V . B i o m o n i t o r i n g o f a i r p o l l u t i o n a r o u n d u r b a n a n d i n d u s t r i a l s i t e s J o u r n a l o f r e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 2 ) 1 : 0 0 7 - 0 1 4 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y A n I n t e r n a t i o n a l O n l i n e O p e n A c c e s s P u b l i c a t i o n g r o u p O r i g i n a l R e s e a r c h

I N T R O D U C T I O N D u e t o s h a r p i n c r e a s e i n t h e r o a d w a y d i e s e l i n t h e l a s t f e w d e c a d e s t h e e m i s s i o n o f g a s e s n o w c o n s t i t u t e s a n i m p o r t a n t s o u r c e o f e n v i r o n m e n t a l p o l l u t i o n a l l o v e r t h e w o r l d . I n d e v e l o p i n g c o u n t r i e s l i k e I n d i a , t h e p r o b l e m i s m u c h m o r e a g g r a v a t e d d u e t o f a c t o r s s u c h a s n a r r o w a n d c o n g e s t e d r o a d a n d o l d a n d p o o r l y m a i n t a i n e d e n g i n e s . E x h a u s t e d e m i s s i o n s f r o m t h e d i e s e l p o w e r e d v e h i c l e s h a v e l o w c a r b o n m o n o x i d e ( C O ) a n d u n b u r n t h y d r o c a r b o n s , w h i l e n i t r o g e n o x i d e ( N O ) i s p r e s e n t i n h i g h c o n c e n t r a t i o n t h a n p e t r o l p o w e r e d v e h i c l e s . B e s i d e , t h e s e e m i s s i o n s c o n t a i n s m o k e p a r t i c l e s , S u l f u r d i o x i d e ( S O ) , a l d e h y d e s a n d o d o u r p r o d u c i n g c o m p o u n d s ( A g a r w a l , 1 9 9 1 ) . A i r p o l l u t i o n i s i n f l u e n c e d b y f o u r m a j o r f a c t o r s , n a m e l y i n d u s t r i a l i z e d e x p a n s i o n o f t h e c i t i e s , i n c r e a s e i n t r a f f i c , r a p i d e c o n o m i c d e v e l o p m e n t , a n d h i g h e r l e v e l o f e n e r g y c o n s u m p t i o n . T h e g r o w t h o f b o t h a n i n d u s t r i a l a n d r e s i d e n t i a l a r e a i s u n p l a n n e d i n m a n y d e v e l o p i n g c i t i e s o f I n d i a . T h u s , c o n t r i b u t i n g t o t h e a i r p o l l u t i o n p r o b l e m s . A u t o m o b i l e p r o d u c e s v o l a t i l e o r g a n i c c o m p o u n d s ( V O C ) , S u s p e n d e d p a r t i c u l a t e m a t t e r ( S P M ) o x i d e s o f s u l f u r ( S O x ) , o x i d e s o f n i t r o g e n ( N O x ) a n d c a r b o n m o n o x i d e ( C O ) w h i c h h a v e a d v e r s e e f f e c t s o n s u r r o u n d i n g e c o s y s t e m . R e g i o n a l i m p a c t o f a i r p o l l u t i o n o n d i f f e r e n t l o c a l p l a n t s p e c i e s i s o n e o f t h e m a j o r e c o l o g i c a l i s s u e s . T h e c l i m a t i c c o n d i t i o n s , t h e p h y s i c o - c h e m i c a l p r o p e r t i e s o f a i r p o l l u t a n t s a n d t h e i r r e s i d e n c e t i m e i n t h e a t m o s p h e r e h a v e i m p a c t o n s u r r o u n d i n g p l a n t s a n d a n i m a l s . M o n i t o r i n g o f a i r p o l l u t a n t i s a p r e r e q u i s i t e t o a i r q u a l i t y c o n t r o l . T h e i r i m p a c t o n t h e c h e m i c a l c o m p o s i t i o n o f p l a n t s i s o f t e n u s e d a s a n i n d i c a t o r a n d a t o o l f o r m o n i t o r i n g e n v i r o n m e n t a l p o l l u t i o n . ( R a o , 1 9 7 7 ; P o s t h u m u s , 1 9 8 4 , 1 9 8 5 ; A g r a w a l a n d A g r a w a l , 1 9 8 9 ; K u l u m p e t a l . , 1 9 9 4 ; D m u c h o w s k i a n d b y t n e r o w i c z , 1 9 9 5 , S a r a l a e t a l 2 0 1 0 ) . M o n i t o r i n g w i t h t h e h e l p o f b i o l o g i c a l i n d i c a t o r s i s a s i m p l e , c h e a p a n d c o n v e n i e n t m e t h o d t o e n s u r e t h e s t a t e o f l o c a l e n v i r o n m e n t . T h e e f f e c t o f e n v i r o n m e n t a l f a c t o r s o n p l a n t s i n c r e a s e s w i t h e x p o s u r e t i m e . P l a n t r e s p o n s e t o a i r p o l l u t i o n c a n b e u s e d t o a s s e s s t h e q u a l i t y o f a i r t h a t m a y p r o v i d e e a r l y w a r n i n g s i g n a l s o f a i r p o l l u t i o n t r e n d s . T h e d y i n g r a t e s c h a n g e w i t h r e s p e c t t o a p p a r e n t i n j u r y , c h l o r o p h y l l r e d u c t i o n , c e l l s i z e r e d u c t i o n a n d r e d u c t i o n i n l e a f a r e a a r e u s e d a s p a r a m e t e r s f o r m o n i t o r i n g a i r p o l l u t i o n i m p a c t s o n p l a n t m e t a b o l i s m ( L e b l a n c a n d R a o , 1 9 7 5 ) . I n d u s t r i a l e f f l u e n t s a r e c o n s t a n t l y a d d i n g u p t o x i c s u b s t a n c e s i n t o t h e g r o u n d w a t e r r e s e r v o i r a t a v e r y h i g h r a t e , e s p e c i a l l y i n i n d u s t r i a l z o n e s . M a n y r e g i o n s a l l o v e r t h e g l o b e a r e h e a v i l y d e p e n d i n g o n g r o u n d w a t e r f o r v a r i o u s p u r p o s e s ( B a b i k e r e t a l . , 2 0 0 4 ) . T h e m a i n f o c u s o f t h i s w o r k i s t o p r o v i d e a n a s s e s s m e n t o f t h e u s e o f b i o c h e m i c a l p a r a m e t e r s o f p l a n t s a s i n d i c a t o r o f a i r p o l l u t i o n s o t h a t t h e s e b i o c h e m i c a l i n d i c a t o r s c a n b e u s e d f o r a i r q u a l i t y m o n i t o r i n g i n u r b a n a r e a s o f D i n d i g u l t h e c a p i t a l o f T a m i l N a d u . M A T E R I A L S A N D M E T H O D S S t u d y s i t e T h e s t u d y a r e a i s l o c a t e d i n t h e s o u t h e r n p a r t o f I n d i a , c l o s e t o K o d a g a n a r r i v e r b a s i s , m a i n l y i n h a r d r o c k t e r r a i n . T h e a r e a i s k n o w n f o r i t s l e a t h e r i n d u s t r i e s . I t l i e s b e t w e e n 1 0 ° 1 3 4 4 1 0 ° 2 6 4 7 N l a t i t u d e a n d 7 7 ° 5 5 0 8 7 8 ° 0 1 2 4 E l o n g i t u d e a n d f a l l s i n s u r v e y o f I n d i a T o p s h e e t N o . 5 8 F / 1 5 & J / 3 , i n t h e s t a t e o f T a m i l n a d u , I n d i a . T h e s e l e c t e d a r e a i s l o c a t e d i n t h e c e n t r a l p a r t o f D i n d i g u l t o w n a n d a l o n g M a d u r a i , B a t l a g u n d u a n d P o n m a n d u r a i r o a d s . S i t e s e l e c t i o n / b i o i n d i c a t o r S t a t i o n s e l e c t i o n T o t a l l y t h r e e b i o i n d i c a t o r s t a t i o n s i n c l u d i n g u r b a n a n d s u b u r b a n s i t e s c l o s e t o s t r e e t s w i t h h e a v y a n d l i g h t p o l l u t i o n l o a d w e r e i d e n t i f i e d a n d L a k s h m a n a p u r a m w a s t r e a t e d a s c o n t r o l s i t e . D e t a i l s o f s i t e s a r e B i o i n d i c a t o r S t a t i o n 1 R e s i d e n t i a l a r e a ( L a k s h m a n a p u r a m ) B i o i n d i c a t o r S t a t i o n 2 D i n d i g u l B u s s t a n d ( T r a f f i c a r e a ) B i o i n d i c a t o r S t a t i o n 3 T a n n e r y a r e a ( T h o m a i y a r p u r a m ) A i r Q u a l i t y A n a l y s i s ( S O , N O x a n d S P M ) : D u r i n g t h e e x p o s u r e p e r i o d a m b i e n t a i r q u a l i t y i n t e r m s o f c o m m o n a i r p o l l u t a n t s t h a t i s S O , N O x a n d S P M w e r e a n a l y z e d a t a l l t h r e e b i o i n d i c a t o r s t a t i o n s . S a m p l i n g w a s d o n e f o r 2 4 h r a n d t w i c e i n a w e e k . A v e r a g e w a s t a k e n f o r f i n a l c a l c u l a t i o n . F o r t h e c o l l e c t i o n o f s a m p l e s f o r S P M f r o m a m b i e n t a i r , G F / A f i l t e r p a p e r w a s u s e d i n h i g h v o l u m e s a m p l e r ( H V S ) a t t h e f l o w r a t e o f 0 . 1 t o 1 . 5 m ³ / m i n . S P M w a s c o m p u t e d a s p e r s t a n d a r d m e t h o d . F i l t e r p a p e r w a s w e i g h t e d b e f o r e a n d a f t e r s a m p l i n g . W e s t a n d G a e k e m e t h o d ( 1 9 5 6 ) a n d m o d i f i e d J a c o b a n d H o c h h e i s e r m e t h o d ( 1 9 5 8 ) w e r e u s e d f o r t h e a n a l y s i s o f S O a n d N O x r e s p e c t i v e l y . 0 0 8 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 2 ) 1 : 0 0 7 - 0 1 4 T h a m b a v a n i e t a l . , 2 0 1 2

A i r P o l l u t i o n I n d e x ( A P I ) T h e a v e r a g e o f t h e s u m o f t h e r a t i o s o f t h r e e m a j o r p o l l u t a n t c o n c e n t r a t i o n s t o t h e i r r e s p e c t i v e a i r q u a l i t y s t a n d a r d s w e r e o b t a i n e d . T h e a v e r a g e w a s t h e n m u l t i p l i e d b y 1 0 0 t o g e t t h e i n d e x ( R a o a n d R a o , 1 9 8 9 ) . A P I = 1 / 3 [ ( S P M ) / ( S s p m ) + ( S O ) / ( S S o 2 ) + ( N O x ) / ( S N O X ) ] * 1 0 0 W h e r e S s p m , S S o 2 a n d S N O X r e p r e s e n t t h e a m b i e n t a i r q u a l i t y s t a n d a r d s f o r S P M , S O a n d N O x . A i r p o l l u t i o n i n d e x o f b i o i n d i c a t o r s t a t i o n s w e r e d e v e l o p e d o n t h e b a s i s o f a m b i e n t a i r q u a l i t y a n a l y z e d a t s p e c i f i e d b i o i n d i c a t o r s t a t i o n s t h r o u g h i n s t r u m e n t a l m o n i t o r i n g o f S P M , S O a n d N O x a n d c o r r e l a t e d w i t h t h e v a r i a t i o n i n b i o c h e m i c a l i n d i c a t o r . O n t h e b a s i s o f a i r p o l l u t i o n i n d e x , b i o i n d i c a t o r s t a t i o n 1 w a s c a t e g o r i z e d a s l i g h t a i r p o l l u t i o n s i t e ( a i r p o l l u t i o n i n d e x f o r s u m m e r a n d w i n t e r a r e ( 2 8 . 6 6 a n d 4 2 ) , s t a t i o n 2 a s m o d e r a t e a i r p o l l u t i o n s i t e ( a i r p o l l u t i o n i n d e x f o r s u m m e r a n d w i n t e r a r e 6 1 . 6 6 a n d 6 0 ) a n d s t a t i o n 3 a s m o d e r a t e a i r p o l l u t i o n s i t e ( a i r p o l l u t i o n i n d e x f o r s u m m e r a n d w i n t e r a r e 4 7 a n d 5 0 . 5 6 ) ( T a b l e 1 a n d T a b l e 2 ) . B i o c h e m i c a l p a r a m e t e r s A f t e r t h r e e m o n t h s o f t h e e x p o s u r e p l a n t s w e r e b r o u g h t b a c k t o t h e i n s t i t u t e a n d l e a f s a m p l e s w e r e a n a l y z e d f o r d i f f e r e n t b i o c h e m i c a l p a r a m e t e r s . T o t a l c h l o r o p h y l l a n d c a r o t e n o i d w e r e a n a l y z e d f o l l o w i n g t h e m e t h o d o f A r n o n ( 1 9 4 9 ) , a s c o r b i c a c i d b y S a d a s i v a m a n d B a l a S u b r a m a n i a n ( 1 9 8 7 ) , p r o t e i n b y L o w r y e t a l ( 1 9 5 1 ) , t o t a l s o l u b l e s u g a r s b y p h e n o l s u l p h u r i c a c i d m e t h o d o f D u b o i s e t a l . ( 1 9 5 1 ) . E s t i m a t i o n o f C h l o r o p h y l l a n d C a r o t e n o i d 5 0 0 m g o f f r e s h l e a f m a t e r i a l w a s t a k e n a n d g r o u n d w i t h h e l p o f p e s t l e a n d m o r t a r w i t h 1 0 m l o f 8 0 % a c e t o n e . T h e h o m o g e n a t e w a s c e n t r i f u g e d a t 8 0 0 r p m f o r 1 5 m i n u t e s . T h e s u p e r n a t a n t w a s s a v e d . T h e r e s i d u e s w e r e r e - e x t r a c t e d w i t h 8 0 % a c e t o n e . T h e s u p e r n a t a n t w a s s a v e d a n d u t i l i z e d f o r c h l o r o p h y l l e s t i m a t i o n . A b s o r b a n c e w a s r e a d a t 6 4 5 , 6 6 3 a n d 4 8 0 n m i n t h e U V S p e c t r o p h o t o m e t e r . C h l o r o p h y l l a ( m g . g ¹ F W ) = ( 0 . 0 1 2 7 ) * ( 0 D 6 6 3 ) - ( 0 . 0 0 2 6 9 ) * ( 0 D 6 4 5 ) C h l o r o p h y l l b ( m g . g ¹ F W ) = ( 0 . 2 2 9 ) * ( 0 D 6 4 5 ) - ( 0 . 0 0 4 8 8 ) * ( 0 D 6 6 3 ) T o t a l c h l o r o p h y l l ( m g . g ¹ F W ) = ( 0 . 0 2 0 2 ) * ( 0 D 6 4 5 ) + ( 0 . 0 0 8 0 2 ) * ( 0 D 6 6 3 ) C a r o t e n o i d = 8 0 % a c e t o n e ( 1 0 0 0 A 4 7 0 3 . 2 7 [ c h l a ] - 1 . 0 4 [ c h l b ] / 2 2 7 ( X + c = ( 1 0 0 0 A 4 7 0 2 . 2 7 c h l a 8 1 . 4 c h l b ) / 2 3 0 . E s t i m a t i o n o f p r o t e i n P r o t e i n c o n t e n t w a s d e t e r m i n e d b y t h e m e t h o d o f l o w r y e t a l ( 1 9 5 1 ) . 0 . 5 g o f p l a n t s a m p l e ( s h o o t ) w a s h o m o g e n i z e d i n 1 0 m l o f 2 0 % T r i c h l o r o A c e t i c a c i d ( T C A ) . T h e h o m o g e n a t e w a s c e n t r i f u g e d i n 1 0 m i n u t e s . T h e s u p e r n a t a n t w a s d i s c h a r g e d a n d t h e p e l l e t w a s r e e x t r a c t e d w i t h 5 m l o f 0 . 1 N N a O H . O n e m l o f t h e e x t r a c t w a s t a k e n i n a t e s t t u b e a n d 5 m l o f r e a g e n t c ( p r o t e i n r e a g e n t ) w a s a d d e d . T h i s s o l u t i o n w a s m i x e d w e l l a n d k e p t i n d a r k f o r 1 0 m i n u t e s . L a t e r 0 . 5 m l o f f o l i n c i o c a l t e a u r e a g e n t w a s a d d e d a n d t h e m i x t u r e w a s k e p t i n d a r k f o r 3 0 m i n u t e s . T h e s a m p l e w a s r e a d a t 6 6 0 n m i n t h e u v s p e c t r o p h o t o m e t e r . J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 2 ) 1 : 0 0 7 - 0 1 4 0 0 9 T h a m b a v a n i e t a l . , 2 0 1 2 B i o i n d i c a t o r s s t a t i o n s P o l l u t a n t s ( µ g / m ³ ) A i r p o l l u t i o n i n d e x R e m a r k s S P M S O N O x S t a t i o n n o : 1 ( R e s i d e n t i a l ) w i n t e r 1 1 1 . 2 1 1 . 4 3 2 . 0 4 2 l i g h t a i r p o l l u t i o n S u m m e r 9 9 . 4 9 . 5 3 . 3 2 8 . 6 6 l i g h t a i r p o l l u t i o n S t a t i o n n o : 2 ( T r a f f i c ) w i n t e r 1 5 8 . 4 1 5 . 0 2 5 . 6 6 0 M o d e r a t e a i r p o l l u t i o n s u m m e r 1 4 7 . 6 1 8 . 7 2 9 . 7 6 1 . 6 6 M o d e r a t e a i r p o l l u t i o n S t a t i o n n o : 3 ( T a n n e r y ) w i n t e r 9 8 . 0 1 4 . 2 2 0 . 0 5 0 . 5 6 M o d e r a t e a i r p o l l u t i o n s u m m e r 6 5 . 5 9 . 9 1 4 . 7 4 7 M o d e r a t e a i r p o l l u t i o n T a b l e 1 . A m b i e n t a i r q u a l i t y a n d a i r p o l l u t i o n i n d e x f o r d i f f e r e n t b i o i n d i c a t o r s s t a t i o n s A m b i e n t a i r q u a l i t y s t a n d a r d s t a k e n f o r c a l c u l a t i o n o f a i r p o l l u t i o n i n d e x 1 4 0 µ g / m ³ f o r S P M , 6 0 µ g / m ³ f o r S O a n d 6 0 µ g / m ³ f o r N O X .

0 1 0 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 2 ) 1 : 0 0 7 - 0 1 4 E s t i m a t i o n o f S u g a r s F i v e h u n d r e d m g o f p l a n t m a t e r i a l s w e r e w e i g h e d a n d m a c e r a t e d i n a p e s t l e a n d m o r t a r w i t h 1 0 m l o f 8 0 % e t h a n o l . T h e h o m o g e n a t e w a s c e n t r i f u g e d f o r 1 0 m i n u t e s a t 8 0 0 r p m . T h e S u p e r n a t a n t w a s s a v e d . T h e n t h e e t h a n o l i s e v a p o r a t e d i n w a t e r b o t h a t 5 0 ° c . T h e n e t c o n t e n t w a s m a d e u p t o 2 0 m l w i t h d i s t i l l e d w a t e r a n d t h e e x t r a c t w a s u s e d f o r t h e e s t i m a t i o n o f r e d u c i n g s u g a r . O n e m l o f e x t r a c t w a s t a k e n i n a 2 5 m l m a r k e d t e s t t u b e . O n e m l o f r e a g e n t c w a s a d d e d . T h e n t h e m i x t u r e w a s h e a t e d f o r 2 0 m i n u t e s a t 1 0 0 ° c i n a b o i l i n g w a t e r b a t h , c o o l e d a n d 1 m l o f a r s e n o m o l y b d a t e r e a g e n t w a s a d d e d . T h e s o l u t i o n w a s t h o r o u g h l y m i x e d a n d d i l u t e d t o 2 5 m l w i t h d i s t i l l e d w a t e r . T h e s a m p l e w a s r e a d i n t h e u v s p e c t r o p h o t o m e t e r a t 5 2 0 n m . T h e s u g a r c o n t e n t s w e r e e x p r e s s e d w e r e i n m g / g f r e s h w e i g h t b a s i s . E s t i m a t i o n o f A s c o r b i c a c i d : A s c o r b i c a c i d i s a r e d u c i n g a g e n t i t i s d e t e r m i n e d b y r e a c t i n g w i t h a s e l e c t i v e a g e n t n a m e l y 2 , 6 d i c h l o r o p h e n o l i n d o p h e n o l d y e 1 0 g m o f t h e l e a f s a m p l e s w e r e t r a n s f e r r e d t o a g l a s s p e s t l e m o r t a r a n d m a c e r a t e d w e l l w i t h 4 % o x a l i c a c i d . T h e c o n t e n t s w e r e t r a n s f e r r e d t o a 1 0 0 m l v o l u m e t r i c f l a s k b y f i l t e r i n g t h r o u g h a m u s l i n c l o t h . R e p e a t e d t h e e x t r a c t i o n s w i t h 4 % o x a l i c a c i d 3 4 t i m e s s o t h a t t h e e x t r a c t i o n w a s p e r f e c t l y c o m p l e t e d . T h i s v o l u m e o f s o l u t i o n w a s m a d e u p w i t h 4 % o x a l i c a c i d . T i t r a t e d a g a i n s t 0 . 0 2 % d y e s o l u t i o n t a k e n i n t h e b u r e t t e , a p e r m a n e n t p a l e p i n k c o l o u r i s o b t a i n e d . R E S U L T A N D D I S C U S S I O N L e a f s a m p l e s o f t h e p l a n t s p e c i e s w e r e a n a l y z e d f o r c h l o r o p h y l l , c a r o t e n o i d , a s c o r b i c a c i d , p r o t e i n a n d s o l u b l e s u g a r s . A l l t h e b i o c h e m i c a l i n d i c a t o r s e x h i b i t e d s i g n i f i c a n t v a r i a t i o n s f r o m s p e c i e s t o s p e c i e s a n d s a m p l i n g s i t e t o s i t e . T h e s e w e r e l i s t e d i n t h e T a b l e - 3 . A z a d i r a c t a i n d i c a T h e t o t a l c h l o r o p h y l l c o n t e n t o f A z a d i r a c t a i n d i c a a t t h e c o n t r o l s i t e i s 0 . 8 5 m g / g . I t e x h i b i t e d T h a m b a v a n i e t a l . , 2 0 1 2 I n d e x v a l u e R e m a r k s 0 - 2 5 C l e a r a i r 2 0 - 5 0 l i g h t a i r p o l l u t i o n 5 1 - 7 5 M o d e r a t e a i r p o l l u t i o n 7 6 - 1 0 0 H e a v y a i r p o l l u t i o n > 1 0 0 S e v e r e a i r p o l l u t i o n T a b l e 2 . R a t i n g S c a l e f o r i n d i c e s ( r e f e r e n c e ) [ B o t h w i n t e r a n d s u m m e r ] N a m e o f t h e S p e c i e s S a m p l i n g S t a t i o n S i t e N o T o t a l C h l o r o p h y l l % o f V a r i a t i o n C a r o t e n o i d % o f V a r i a t i o n A s c o r b i c A c i d % o f V a r i a t i o n P r o t e i n % o f V a r i a t i o n T o t a l S u g a r % o f V a r i a t i o n A z a d i r a c t a I n d i c a R e s i d e n t i a l S 1 0 . 8 5 4 . 4 2 . 0 8 5 . 5 2 4 9 . 6 0 T r a f f i c S 2 0 . 4 7 8 4 3 . 7 6 2 . 6 5 3 9 . 7 7 4 . 0 5 - 9 4 . 7 1 1 . 5 8 7 1 . 3 7 2 5 . 3 4 8 . 9 9 T a n n e r y S 3 0 . 6 9 1 8 . 8 2 1 2 . 2 - 1 7 7 . 2 2 . 6 2 - 2 5 . 9 6 3 . 2 8 4 0 . 5 7 5 0 . 9 4 - 2 . 7 0 D e l o n i x e l a t a R e s i d e n t i a l S 1 0 . 5 3 1 6 . 8 2 . 6 5 2 . 5 6 4 0 . 5 8 T r a f f i c S 2 0 . 3 8 4 2 7 . 6 8 5 . 5 1 9 . 1 1 3 . 5 8 - 3 5 . 0 9 1 . 1 5 5 5 . 0 7 8 3 2 . 6 1 9 . 6 6 T a n n e r y S 3 0 . 7 6 - 4 3 . 1 2 0 . 4 7 1 9 3 . 0 7 3 . 1 5 - 1 8 . 8 6 3 . 8 - 4 8 . 4 3 0 . 2 9 1 9 9 . 2 8 M o r i n d a t i n c t o r i a R e s i d e n t i a l S 1 0 . 9 4 8 8 . 5 1 . 6 5 2 5 . 6 4 6 . 3 5 T r a f f i c S 2 0 . 6 3 6 3 2 . 9 1 5 . 5 3 5 . 2 9 3 . 5 5 - 1 1 5 . 1 5 1 5 . 5 3 9 . 4 5 3 6 . 5 2 1 . 2 5 T a n n e r y S 3 0 . 4 8 4 9 . 3 6 1 0 . 6 - 2 4 . 7 0 3 . 6 8 - 1 2 3 . 0 3 1 2 . 3 4 5 1 . 7 9 3 1 . 8 8 3 1 . 2 1 C a l o t r o p h i s R e s i d e n t i a l S 1 0 . 6 7 4 6 . 6 2 . 5 6 6 . 6 8 3 5 . 1 5 T r a f f i c S 2 0 . 4 7 3 0 . 2 6 3 . 5 4 6 . 9 6 3 . 6 5 - 4 2 . 5 7 3 . 5 8 4 6 . 4 0 3 8 . 6 0 - 9 . 8 1 T a n n e r y S 3 0 . 4 3 3 6 . 2 0 7 . 6 - 1 5 . 1 5 1 . 8 9 2 6 . 1 7 2 . 3 8 6 4 . 3 7 4 5 . 4 7 - 2 9 . 3 5 T h y m e R o s e m a r y R e s i d e n t i a l S 1 0 . 8 0 1 0 . 3 1 . 9 6 4 . 2 8 4 8 . 9 6 T r a f f i c S 2 0 . 4 5 8 4 2 . 7 5 8 . 5 1 7 . 4 7 2 . 3 5 - 1 9 . 8 9 3 . 1 2 2 7 . 1 0 2 5 . 3 6 4 8 . 2 0 T a n n e r y S 3 0 . 5 6 3 0 5 . 4 4 7 . 5 7 1 . 0 8 4 4 . 8 9 2 . 7 2 3 6 . 4 4 5 6 . 6 6 - 1 5 . 6 0 C y a n a d o n d a c t y l o n R e s i d e n t i a l S 1 0 . 6 6 3 . 5 8 3 . 8 8 2 . 8 5 3 1 . 8 8 T r a f f i c S 2 0 . 4 2 3 6 . 3 6 2 . 5 8 2 7 . 9 3 4 . 5 6 - 1 7 . 5 3 . 5 6 - 2 4 . 9 1 2 8 . 5 1 0 . 6 0 T a n n e r y S 3 0 . 3 7 4 3 . 9 3 9 . 6 - 1 6 8 . 1 5 2 . 3 4 3 9 . 6 9 5 . 6 8 - 9 9 . 2 9 4 5 . 2 8 - 4 2 . 0 3 T a b l e 3 : B i o c h e m i c a l I n d i c a t o r s o f d i f f e r e n t s p e c i e s a t d i f f e r e n t b i o i n d i c a t o r s t a t i o n s R e s u l t s a r e s i g n i f i c a n t a t 0 . 1 % ( r < 0 . 0 0 1 )

4 3 . 7 6 % r e d u c t i o n a t t h e s a m p l i n g s i t e 2 a n d 1 8 . 8 2 % r e d u c t i o n a t t h e s a m p l i n g s i t e 3 . T h e c a r o t e n o i d c o n t e n t a t t h e c o n t r o l s i t e ( s ) i s 4 . 4 m g / g s i g n i f i c a n t r e d u c t i o n ( 3 9 . 7 7 % ) i n c a r o t e n o i d c o n t e n t w a s a b s o r b e d a t s a m p l i n g s i t e S w h e r e a s a t s a m p l i n g s i t e S a g a i n o f > 1 0 0 % w a s e v i d e n t . T h e a s c o r b i c a c i d a t t h e c o n t r o l s i t e S t r a f f i c a r e a ( s ) a n d a t t h e i n d u s t r i a l s i t e ( s ) w e r e f o u n d t o b e 2 . 0 8 m g / g 4 . 0 5 m g / g a n d 2 . 6 2 m g / g r e s p e c t i v e l y . P r o t e i n c o n t e n t a t t h e c o n t r o l s i t e S w a s f o u n d t o b e 5 . 5 2 m g / g b u t m a x i m u m r e d u c t i o n ( 7 1 . 3 7 % ) a t s i t e S f o l l o w e d b y 4 0 . 5 7 % a t s i t e S w a s f o u n d o u t . T o t a l s u g a r s h o w e d d e c r e a s e d o v e r c o n t r o l s i t e S 1 4 8 . 9 9 % r e d u c t i o n i n t o t a l s u g a r w a s o b s e r v e d a t s a m p l i n g s i t e s f o l l o w e d b y 2 . 7 0 % i n c r e a s e a t s a m p l i n g s i t e S . I t i s e v i d e n t f r o m d a t a t h a t t o t a l c h l o r o p h y l l , c a r o t e n o i d p r o t e i n a n d t o t a l s u g a r s h o w e d s i g n i f i c a n t r e d u c t i o n a t s a m p l i n g s i t e S a n d S . B u t t h e a s c o r b i c a c i d s h o w e d i n c r e a s e a t a l l t h e t w o s a m p l i n g s i t e s ( S o r S ) c o m p a r e d t o c o n t r o l s i t e S . D e l o n i x e l a t a B i o c h e m i c a l i n d i c a t o r s o f D e l o n i x e l a t a a t a l l t h e s a m p l i n g s i t e s a r e v a r i e d s i g n i f i c a n t l y . T h e t o t a l c h l o r o p h y l l c o n t e n t , c a r o t e n o i d , a s c o r b i c a c i d , p r o t i e n a n d t o t a l s u g a r a r e 0 . 5 3 1 m g / g , 6 . 8 m g / g , 2 . 6 5 m g / g , 2 . 5 6 m g / g a n d 4 0 . 5 8 m g / g r e s p e c t i v e l y . M a x i m u m r e d u c t i o n ( 2 7 . 6 8 % ) i n c h l o r o p h y l l c o n t e n t w a s o b s e r v e d a t s a m p l i n g s i t e s a n d g a i n o f ( 4 3 . 1 2 % ) w a s o b s e r v e d a t s a m p l i n g s i t e s . M a x i m u m r e d u c t i o n ( 9 3 . 0 7 % ) o f c a r o t e n o i d w a s e x h i b i t e d a t s a m p l i n g s i t e s f o l l o w e d b y 1 9 . 1 1 % r e d u c t i o n a t s a m p l i n g s i t e s . A s c o r b i c a c i d w a s f o u n d t o b e i n c r e a s e d i n a l l t h e s a m p l i n g s i t e s a s c o m p a r e d t o c o n t r o l . M a x i m u m i n c r e a s i n g o f 3 5 . 0 9 % w a s e v i d e n t a t s a m p l i n g s i t e s f o l l o w e d b y 1 8 . 8 6 % a t s a m p l i n g s i t e s . M a x i m u m r e d u c t i o n ( 5 5 . 0 8 % ) i n p r o t e i n w a s e x h i b i t e d a t s a m p l i n g s i t e s b u t i t s h o w e d a n i n c r e a s i n g t r e n d ( 4 8 . 4 3 % ) a t s a m p l i n g s i t e s . T h e s i g n i f i c a n t r e d u c t i o n ( 9 9 . 2 8 % ) i n t o t a l s u g a r w a s e x h i b i t e d a t s a m p l i n g s i t e s f o l l o w e d b y ( 9 . 6 6 % ) a t s a m p l i n g s i t e s r e s p e c t i v e l y . M o r i n d a t i n c t o r i a T h e t o t a l c h l o r o p h y l l , c a r o t e n o i d , a s c o r b i c a c i d , p r o t e i n a n d t o t a l s u g a r o f M o r i n d a t i n c t o r i a a t t h e c o n t r o l s i t e w a s f o u n d t o b e 0 . 9 4 m g / g , 8 . 5 m g / g , 1 . 6 5 m g / g , 2 5 . 6 m g / g a n d 4 6 . 3 m g / g r e s p e c t i v e l y . C h l o r o p h y l l c o n t e n t a t s a m p l i n g s i t e s s h o w e d 4 9 . 3 6 % r e d u c t i o n f o l l o w e d b y 3 2 . 9 1 % r e d u c t i o n a t s a m p l i n g s i t e s . C a r o t e n i o d w a s f o u n d t o b e s i g n i f i c a n t l y r e d u c e d ( 3 5 . 2 9 % ) a t s a m p l i n g s i t e s b u t a g a i n ( 2 4 . 7 0 % ) w a s o b s e r v e d a t s a m p l i n g s i t e s . A s c o r b i c a c i d w a s f o u n d t o b e m o r e a t a l l t h e s a m p l i n g s i t e s a s c o m p a r e d t o c o n t r o l s i t e . M a x i m u m e n h a n c e m e n t ( > 1 0 0 % ) i n a s c o r b i c a c i d w a s e x h i b i t e d i n s a m p l e s i t e s f o l l o w e d b y s a m p l i n g s i t e s . P r o t e i n c o n t e n t a t s a m p l i n g s i t e s s h o w e d 5 1 . 7 9 % r e d u c t i o n f o l l o w e d b y 3 9 . 5 4 % r e d u c t i o n a t s a m p l i n g s i t e s . S o l u b l e s u g a r w a s s i g n i f i c a n t l y r e d u c e d a n d t h e m a x i m u m r e d u c t i o n ( 3 1 . 2 1 % ) w a s r e v e a l e d a t s a m p l i n g s i t e s f o l l o w e d b y s a m p l i n g s i t e s ( 2 1 . 2 5 % ) . J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 2 ) 1 : 0 0 7 - 0 1 4 0 1 1 T h a m b a v a n i e t a l . , 2 0 1 2 F i g : 3 . F i g : 3 . V a r i a t i o n i n b i o - c h e m i c a l M o r i n d a t i n c t o r i a a t d i f f e r e n t b i o i n d i c a t o r s t a t i o n F i g : 2 . V a r i a t i o n i n b i o - c h e m i c a l o f D e l o n i x e l a t a a t d i f f e r e n t b i o i n d i c a t o r s t a t i o n s F i g : 1 . V a r i a t i o n i n b i o - c h e m i c a l i n d i c a t o r s A z a d i r a c h t a i n d i c a a t d i f f e r e n t b i o i n d i c a t o r s t a t i o n s

C a l o t r o p h i s T h e c h l o r o p h y l l c o n t e n t o f c a l o t r o p h i s a t t h e c o n t r o l s i t e w a s f o u n d t o b e 0 . 6 7 4 m g / g . I t e x h i b i t e d 3 6 . 2 0 % r e d u c t i o n a t t h e s a m p l i n g s i t e s f o l l o w e d b y 3 0 . 2 6 % r e d u c t i o n a t t h e s a m p l i n g s i t e s . T h e c a r o t e n i o d a t t h e c o n t r o l s i t e w a s f o u n d t o b e 6 . 6 m g / g a t w h i c h i t s h o w e d 4 6 . 9 6 % r e d u c t i o n a t t h e s a m p l i n g s i t e s b u t m a x i m u m i n c r e a s e o f 1 5 . 1 5 % w a s f o u n d a t s a m p l i n g s i t e s . c a l o t r o p h i s e x h i b i t e d 2 6 . 1 7 % r e d u c t i o n i n a s c o r b i c a c i d a t s a m p l i n g s i t e s w h i l e i n c r e a s e o f 4 2 . 5 7 % w a s o b s e r v e d a t s a m p l i n g s i t e s . A l l t h e t w o s a m p l i n g s i t e s s h o w e d a d e c r e a s i n g t r e n d o f p r o t e i n o v e r c o n t r o l s i t e s . M a x i m u m r e d u c t i o n ( 6 4 . 3 7 % ) a t s a m p l i n g s i t e s f o l l o w e d b y 4 6 . 4 0 % a t s a m p l i n g s i t e s w a s o b s e r v e d . T o t a l s u g a r s h o w e d i n c r e a s e o v e r c o n t r o l a t a l l t h e s a m p l i n g s i t e s . M a x i m u m i n c r e a s e ( 2 9 . 3 5 % ) w a s o b s e r v e d a t s a m p l i n g s i t e s f o l l o w e d b y s a m p l i n g s i t e s ( 9 . 8 1 % ) . T h y m e r o s e m a r y B i o c h e m i c a l i n d i c a t o r s s u c h a s T o t a l c h l o r o p h y l l , C a r o t e n i o d , A s c o r b i c a c i d , P r o t e i n a n d T o t a l s u g a r w e r e 0 . 8 0 m g / g , 1 0 . 3 m g / g , 1 . 9 6 m g / g , 4 . 2 8 m g / g a n d 4 8 . 9 6 m g / g r e s p e c t i v e l y . T h y m e r o s e m a r y s h o w e d m a x i m u m r e d u c t i o n o f t o t a l c h l o r o p h y l l ( 4 2 . 7 5 % ) a t s a m p l i n g s i t e s f o l l o w e d b y 3 0 % a t s a m p l i n g s i t e s . T h e c a r o t e n i o d o f T h y m e r o s e m a r y a t t h e c o n t r o l s i t e w a s o b s e r v e d a s 1 0 . 3 m g / g . I t e x h i b i t e d m a x i m u m r e d u c t i o n ( 4 7 . 5 7 % ) a t s a m p l i n g s i t e s f o l l o w e d b y 1 7 . 4 7 % a t s a m p l i n g s i t e s . A s c o r b i c a c i d s h o w e d t h e r e d u c t i o n ( 4 4 . 8 9 % ) a t s a m p l i n g s i t e s w h i l e a i n c r e a s e o f 1 9 . 8 9 % w a s o b s e r v e d a t s a m p l i n g s i t e s . P r o t e i n s h o w e d t h e s i g n i f i c a n t r e d u c t i o n a t t h e s a m p l i n g s i t e s a n d s r e s p e c t i v e l y . S a m p l i n g s i t e s s h o w e d 3 6 . 4 4 % r e d u c t i o n i n p r o t e i n f o l l o w e d b y s a m p l i n g s i t e s ( 2 7 . 1 0 % ) . T h e t o t a l s u g a r a t t h e c o n t r o l s i t e s a n d o t h e r t h e s a m p l i n g s i t e s s a n d s a r e 4 8 . 9 6 m g / g , 2 5 . 3 6 m g / g a n d 5 6 . 6 0 m g / g r e s p e c t i v e l y . C y a n d a n d a c t y l o n C y a n d a n d a c t y l o n s h o w e d d e c r e a s e i n t r e n d o f t o t a l c h l o r o p h y l l a t s a m p l i n g s i t e s s a n d s c o m p a r e d t o c o n t r o l v a l u e s s i t e s . S a m p l i n g s i t e s e x h i b i t e d m a x i m u m d e c r e a s e ( 4 3 . 9 3 % ) f o l l o w e d b y s a m p l i n g s i t e s ( 3 6 . 3 6 % ) . T h e c a r o t e n o i d a t t h e c o n t r o l s i t e w a s o b s e r v e d a s 3 . 5 8 m g / g i t s h o w e d 2 7 . 9 3 % r e d u c t i o n a t s a m p l i n g s i t e s b u t > 1 0 0 % i n c r e a s e a t s a m p l i n g s i t e s w a s o b s e r v e d . A s c o r b i c a c i d w a s f o u n d t o b e a s i n c r e a s i n g t r e n d ( 1 7 . 5 % ) a t t h e s a m p l i n g s i t e s b u t d e c r e a s i n g t r e n d a t ( 3 9 . 6 9 % ) a t s a m p l i n g s i t e s . P r o t e i n w a s f o u n d t o b e i n c r e a s i n g a t a l l t h e s a m p l i n g s i t e s a s c o m p a r e d t o c o n t r o l . M a x i m u m i n c r e a s e 9 9 . 2 9 % w a s e v i d e n t a t s a m p l i n g s i t e s f o l l o w e d b y 2 4 . 9 1 a t s a m p l i n g s i t e s . T o t a l s u g a r s h o w e d m a x i m u m l o s s ( 1 0 . 6 0 % ) a t s a m p l i n g s i t e s a n d m a x i m u m s t i m u l a t i o n ( 4 2 . 0 3 % ) a t s a m p l i n g s i t e s . A l t h o u g h a l l t h e s p e c i e s s h o w e d s i g n i f i c a n t v a r i a t i o n s i n a l l t h e b i o c h e m i c a l p a r a m e t e r s . T h e e x t e n t u p t o w h i c h p l a n t s p e c i e s w e r e a f f e c t e d v a r i e d f r o m s p e c i e s t o s p e c i e s a n d s t a t i o n t o s t a t i o n . A l m o s t a l l t h e s p e c i e s s h o w e d m a x i m u m v a r i a t i o n i n b i o c h e m i c a l i n d i c a t o r s a t s a m p l i n g s i t e s w h i c h i s f o u n d t o s e v e r e a i r p o l l u t i o n s i t e . A c o n s i d e r a b l e l o s s i n t o t a l c h l o r o p h y l l a n d c a r o t e n o i d i n t h e l e a v e s o f t h e p l a n t s e x p o s e d a t s a m p l i n g s i t e s a n d s ( M o d e r a t e a i r p o l l u t i o n s i t e s ) s u p p o r t s t h e a r g u m e n t t h a t t h e c h l o r o p l a s t i s t h e p r i m a r y s i t e s o f a t t a c k b y a i r p o l l u t a n t s u c h a s S P M , S O a n d N O x . A i r p o l l u t a n t s m a k e t h e i r e n t r a n c e i n t o t h e t i s s u e s t h r o u g h t h e s t o m a t a a n d c a u s e p a r t i a l d e n a t u r a t i o n o f t h e c h l o r o p l a s t a n d d e c r e a s e s p i g m e n t c o n t e n t s i n t h e c e l l s o f p o l l u t e d l e a v e s . R a o a n d L e b l a n c ( 1 9 6 6 ) m e n t i o n e d t h a t h i g h a m o u n t o f g a s e o u s S O c a u s e d e s t r u c t i o n o f c h l o r o p h y l l a n d t h a t m i g h t b e d u e t o 0 1 2 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 2 ) 1 : 0 0 7 - 0 1 4 T h a m b a v a n i e t a l . , 2 0 1 2 F i g : 4 . F i g : 4 . V a r i a t i o n i n b i o - c h e m i c a l i n d i c a t o r s C a l o t r o p h i s a t d i f f e r e n t b i o i n d i c a t o r s t a t i o n s F i g : 5 . V a r i a t i o n i n b i o - c h e m i c a l i n d i c a t o r s T h y m e r o s e m a r y a t d i f f e r e n t b i o i n d i c a t o r s t a t i o n s

t h e r e p l a c e m e n t o f M g b y t w o h y d r o g e n a n d d e g r a d a t i o n o f c h l o r o p h y l l m o l e c u l e s t o p h a e o p h y t i n . I n A z a d i r a c t a i n d i c a , D e l o n i x e l a t a , M o r i n g a t i n c t o r i a , C a l o t r o p h i s , T h y m e r o s e m a r y a n d C y a n d a n d a c t y l o n , m a x i m u m d e p l e t i o n i n c h l o r o p h y l l c o n t e n t a n d c a r o t e n o i d s a n d s m a y b e d u e t o t h e m a x i m u m p o l l u t i o n l o a d a t s a m p l i n g s i t e s . R e d u c t i o n i n p r o t e i n c o n t e n t i n A z a d i r a c t a i n d i c a , D e l o n i x e l a t a , M o r i n g a t i n c t o r i , c a l o t r o p h i s a n d T h y m e r o s e m a r y a t s a m p l i n g s i t e s s a n d s m i g h t b e d u e t o t h e e n h a n c e d r a t e o f p r o t e i n d e n a t u r a t i o n w h i c h i s a l s o s u p p o r t e d b y t h e f i n d i n g s o f P r a s a d a n d I n a m d a r ( 1 9 9 0 ) . C o n s t a n t i n i d o u a n d K o z l o w s k i ( 1 9 7 9 ) f o u n d e n h a n c e d p r o t e i n d e n a t u r a t i o n a n d b r e a k d o w n o f e x i s t i n g p r o t e i n t o a m i n o a c i d a s t h e m a i n c a u s e s o f r e d u c t i o n i n p r o t e i n c o n t e n t . S o l u b l e s u g a r i s a n i m p o r t a n t c o n s t i t u e n t a n d s o u r c e o f e n e r g y f o r a l l l i v i n g o r g a n i s m s . P l a n t s m a n u f a c t u r e t h i s o r g a n i c s u b s t a n c e d u r i n g p h o t o s y n t h e s i s a n d b r e a k d o w n d u r i n g r e s p i r a t i o n . O u r s t u d y r e v e a l e d s i g n i f i c a n t l o s s o f s o l u b l e s u g a r i n a l l t h e s p e c i e s a t a l l t h e s i t e s . A l l t h e s p e c i e s s h o w e d m a x i m u m l o s s a t s e v e r e a i r p o l l u t i o n s i t e t h a t i s s a n d s . T h e c o n c e n t r a t i o n o f s o l u b l e s u g a r s i s a n i n d i c a t i v e o f t h e p h y s i o l o g i c a l a c t i v i t y o f a p l a n t a n d i t d e t e r m i n e s t h e s e n s i t i v i t y o f p l a n t s t o a i r p o l l u t i o n . R e d u c t i o n i n s o l u b l e s u g a r c o n t e n t i n p o l l u t e d s t a t i o n s c a n b e a t t r i b u t e d t o i n c r e a s e r e s p i r a t i o n a n d d e c r e a s e d C O f i x a t i o n b e c a u s e o f c h l o r o p h y l l d e t e r i o r a t i o n . D a v i s o n a n d B a r n e s ( 1 9 8 6 ) m e n t i o n e d t h a t p o l l u t a n t s l i k e S O , N O a n d H S u n d e r h a r d e n i n g c o n d i t i o n s c a n c a u s e m o r e d e p l e t i o n o f s o l u b l e s u g a r s i n t h e l e a v e s o f p l a n t s g r o w n i n p o l l u t e d a r e a . T h e r e a c t i o n o f s u l f i t e w i t h a l d e h y d e s a n d K e t o n e s o f c a r b o h y d r a t e s c a n a l s o c a u s e r e d u c t i o n i n c a r b o h y d r a t e c o n t e n t P r e s e n t i n v e s t i g a t i o n r e v e a l e d a g r e a t v a r i a t i o n i n t h e l e v e l s o f a s c o r b i c a c i d i n a l l t h e s i t e s . P o l l u t i o n l o a d d e p e n d e n t i n c r e a s e o f a l l t h e s p e c i e s m a y b e d u e t o t h e m o r e r a t e o f p r o d u c t i o n o f r e a c t i v e o x y g e n s p e c i e s ( R O S ) s u c h a s S O , H S O , O H , O e t c . D u r i n g p h o t o o x i d a t i o n o f S O t o S O w h e r e s u l f i t e s a r e g e n e r a t e d f r o m S O o b s e r v e d . T h e f r e e r a d i c a l p r o d u c t i o n u n d e r S O e x p o s u r e w o u l d i n c r e a s e t h e f r e e r a d i c a l s c a v e n g e r s , s u c h a s a s c o r b i c a c i d ( P i e r r e a n d Q u e i r z , 1 9 8 1 ) b a s e d o n d o s a g e a n d p h y s i o l o g i c a l s t a t u s o f p l a n t . I n c r e a s e d l e v e l o f a s c o r b i c a c i d m a y b e d u e t o t h e d e f e n s e m e c h a n i s m o f t h e p l a n t . D a t a o n a m b i e n t p o l l u t a n t c o n c e n t r a t i o n s d o n o t a l l o w d i r e c t c o n c l u s i o n s t o b e d r a w n o n p o t e n t i a l i m p a c t s o n p l a n t s a n d t h e e n v i r o n m e n t . E v i d e n c e o f e f f e c t s c a n o n l y b e p r o v i d e d b y u s i n g p l a n t s i t s e l f a s m o n i t o r s . T h e s e t y p e s o f p l a n t b i o i n d i c a t o r s i n t e g r a t e t h e e f f e c t s o f a l l e n v i r o n m e n t a l f a c t o r s . T h e r e f o r e u s e o f p l a n t s , a s b i o i n d i c a t o r s i s i n e x p e n s i v e a n d e a s y t e c h n i q u e . M e r e l y b y a n a l y z i n g t h e p r e s e n t p a r a m e t e r s , a n e a r l y d i a g n o s i s o f t h e e x t e n t o f p o l l u t i o n c a n b e d o n e i n t h e a b s e n c e o f v i s i b l e i n j u r y . R E F E R E N C E A g a r w a l S K . 1 9 9 1 . P y t o t o x i c e f f e c t s o f a u t o m o b i l e p o l l u t i o n . A s h i s h p u b l i s h i n g h o u s e 1 1 1 - 1 1 8 . A g r a w a l A a n d A g r a w a l S B . 1 9 8 9 . P h y t o m o n i t o r i n g o f a i r p o l l u t i o n a r o u n d a t h e r m a l p o w e r p l a n t , A t m . E n v i r o n . , 2 3 : 7 6 3 - 7 6 9 . A r n o n D I . 1 9 4 9 . C o p p e r e n z y m e i n i s o l a t e d c h l o r o p l a s t . P l a n t P h y s i o l . , 2 4 : 1 - 1 5 B a b i k e r I S , M o h a m e d M A A , T e r a o H , K a t o K . a n d O h t a K . 2 0 0 4 . A s s e s m e n t o f g r o u n d w a t e r c o n t a m i n a t i o n b y n i t r a t e L e a c h i n g f r o m i n t e n s i v e v e g e t a b l e c u l t i v a t i o n u s i n g g e o g r a p h i c a l i n f o r m a t i o n s y s t e m . E n v i r o n . I n t . , 2 9 : 1 0 0 9 - 1 0 1 7 . C o n s t a n t i n i d o u H A , K o z l o w s k i T T . 1 9 7 9 . E f f e c t o f s u l p h u r d i o x i d e a n d o z o n e o n u l m u s a m e r i c a n a s e e d i n g 1 1 ; c a r b o h y d r a t e , p r o t e i n a n d l i p i d s . c a n . J . B o t . , 5 7 : 1 7 6 - 1 8 4 . D m u c h o w s k i W , a n d B y t n e r o w i c z A . 1 9 9 5 . M o n i t o r i n g e n v i r o n m e n t a l p o l l u t i o n i n p o l l a n d b y c h e m i c a l a n a l y s i s o f s c o t s p i n e n e e d l e s E n v i r o n . p o l l u t . , 8 7 : 8 7 - 1 0 4 . D a v i s o n A W a n d B a r n e s J D . 1 9 8 6 . E f f e c t s o f J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 2 ) 1 : 0 0 7 - 0 1 4 0 1 3 T h a m b a v a n i e t a l . , 2 0 1 2 F i g : 6 . V a r i a t i o n i n b i o - c h e m i c a l i n d i c a t o r s C y a n o d o n d a c t y l o n a t d i f f e r e n t b i o i n d i c a t o r s t a t i o n - 2 0 0 - 1 5 0 - 1 0 0 - 5 0 0 5 0 1 0 0 % C h l o r o p h y l l % C a r o t e n o i d % A s c o r b i c a c i d % P r o t e i n % T o t a l S u g a r % V a r i a t i o n B i o c h e m i c a l I n d i c a t o r s V a r i a t i o n i n b i o c h e m i c a l i n d i c a t o r s c y a n a d o n d a c t y l o n a t d i f f e r e n t b i o i n d i c a t o r s t a t i o n s .

w i n t e r s t r e s s o n p o l l u t a n t r e s p o n s e s . I n : H o w a r e t h e e f f e c t s o f a i r p o l l u t a n t o n a g r i c u l t u r a l c r o p s i n f l u e n c e d b y t h e i n t e r a c t i o n w i t h o t h e r l i m i t i n g f a c t o r s ? C E C B r u s s e l s 1 6 - 3 2 . D u b o i s M K . G i l l e s J K , H a m i l t o n P A R e b e r s a n d S m i t h F . 1 9 5 1 . A c o l o r i m e t r i c m e t h o d f o r t h e d e t e r m i n a t i o n o f s u g a r s . N a t u r e 1 6 8 : 1 6 7 . J a c b o M B a n d H o c h h e i s e r J B . 1 9 5 8 . C o n t i n u o u s s a m p l i n g a n d U l t r a m i c r o d e t e r m i n a t i o n o f n i t r o g e n d i o x i d e i n a i r . J . A n a l y . C h e m . , 3 0 : 4 2 6 - 4 2 8 . K u l u m p A , K l u m p p G a n d D o m i n g o s M . 1 9 9 4 . P l a n t s a s b i o i n d i c a t o r s o f a i r p o l l u t i o n a t t h e s e r r a D o M a r n e a r t h e i n d u s t r i a l c o m p l e x o f c u b a t a o , B r a z i l , E n v i r o n . p o l l u t i o n 8 5 : 1 0 9 - 1 1 6 L e b l a n c F a n d R a o D N . 1 9 7 5 . E f f e c t s o f a i r p o l l u t a n t o n l i c h e n b r y o p h y t e s . I n : R e s p o n s e o f a i r p o l l u t i o n ( E d s : ) . B . M u d d a n d T . T K o z l o w s k i l . A c a d e m i c p r e s s . N e w Y o r k . 2 3 7 - 2 7 2 . L o w r y O H , R o s e b r o u g h N J , F a r r A L a n d R a n d a l l R S . 1 9 5 1 . p r o t e i n m e a s u r e m e n t w i t h f o l i n r e a g e n t . J . B i o l . c h e m . , 1 9 3 : 2 6 5 . P i e r r e M a n d Q u e i r o z Q . 1 9 8 1 . E n z y m i c a n d m e t a b o l i c c h a n g e s i n b e a n l e a v e s d u r i n g c o n t i n u o u s p o l l u t i o n b y n e c r o t i c l e v e l s o f S O . E n v i r o n . p o l l u t . , 2 5 : 4 1 - 5 1 . P o s t h u m u s A C . 1 9 8 4 . M o n i t o r i n g l e v e l s a n d e f f e c t s o f a i r p o l l u t a n t s . I n : A i r p o l l u t i o n a n d p l a n t l i f e ( E d s : M . T r e s h o w ) . J o h n w i l e y a n d s o n s , N e w Y o r k , U . S . A . 7 3 - 9 5 . P o s t h u m u s A C . 1 9 8 5 . P l a n t s a s a b i o i n d i c a t o r f o r a t m o s p h e r i c p o l l u t i o n . I n : P o l l u t a n t s a n d t h e i r e c o t o x i c o l o g i c a l s i g n i f i c a n c e , ( E d : H W . N u r n b e r g ) , J o h n w i l e y a n d s o n s . N e w Y o r k , U . S . A . 5 5 - 5 6 . P r a s a d M S V , I n a m d a r J A . 1 9 9 0 . E f f e c t o f c e m e n t k l i n d u s t p o l l u t i o n o n b l a c k g r a m , ( v i g n a m u n g o ) . P r o c . I n d i a n . A c a d . S c i . ( P l a n t S c i ) , 1 0 0 ( 6 ) : 4 3 5 - 4 4 3 . R a o D N . 1 9 7 7 . U s e o f p l a n t s a s a n i n d i c a t o r s a n d m o n i t o r s o f S O p o l l u t i o n . c h e m . A g e I n d i a . 2 8 : 6 5 5 - 6 7 1 . R a o D N , L e b l a n c F . 1 9 6 6 . E f f e c t o f S O 2 o n t h e l i c h e n a l g a e w i t h s p e c i a l r e f e r e n c e t o c h l o r o p h y l l . B i o l o g i s t 6 9 : 6 9 - 9 5 . R a o M N a n d R a o H V N . 1 9 8 9 . A i r p o l l u t i o n T a t a M C G r a w . H i l l p u b l i s h i n g c o m p a n g l i m i t e d , N e w D e l h i . 2 7 1 - 2 7 2 . S a d a s i v a m S a n d B a l a S u b r a m i n a n T . 1 9 8 7 . I n : P r a c t i c a l m a n u a l i n b i o c h e m i s t r y . T a m i l n a d u A g r i c u l t u r a l U n i v e r s i t y , C o i m b a t o r e . 1 4 . S a r a l a t h a m b a v a n i D a n d P r a t h i p a V . 2 0 1 0 . A c o r r e l a t i o n o f p a r t i c u l a t e m a t t e r w i t h g a s e o u s p o l l u t a n t s i n a m b i e n t a i r o f D i n d i g u l T o w n . A s i a n J . E n v i r o n . S c i . , 5 ( 2 ) : 8 9 - 8 3 . W e s t P W a n d G a e k e G C . 1 9 5 6 . f i x a t i o n o f s u l p h u r d i o x i d e a s s u l f i t o m e r c u r a t e ( I I ) a n d s u b s e q u e n t c o l o r i m e t r i c d e t e r m i n a t i o n . J . A n a l y . C h e m . . , 2 8 : 1 8 1 6 - 1 8 1 9 . 0 1 4 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 2 ) 1 : 0 0 7 - 0 1 4 T h a m b a v a n i e t a l . , 2 0 1 2 S u b m i t y o u r a r t i c l e s o n l i n e a t F i c u s p u b l i s h e r s . c o m A d v a n t a g e s E a s y o n l i n e s u b m i s s i o n C o m p l e t e P e e r r e v i e w A f f o r d a b l e C h a r g e s Q u i c k p r o c e s s i n g E x t e n s i v e i n d e x i n g O p e n A c c e s s a n d Q u i c k s p r e a d i n g Y o u r e t a i n s y o u r c o p y r i g h t s u b m i t @ f i c u s p u b l i s h e r s . c o m w w w . f i c u s p u b l i s h e r s . c o m / s u b m i t 1 . a s p x .