J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y S t u d i e s o n t h e s u i t a b i l i t y o f c e r t a i n c u l t u r e m e d i a f o r B e a u v e r i a b a s s i a n a ( B a l s . ) V u i l l . , a n d V e r t i c i l l i u m l e c a n i i ( Z i m m . ) V i e g a s K e y w o r d s : E n t o m o p a t h o g e n i c f u n g i , B e a u v e r i a b a s s i a n a , V e r t i c i l l i u m l e c a n i i , S p o r e s , S y n t h e t i c m e d i a , N a t u r a l s u b s t r a t e s . A B S T R A C T : T h e e n t o m o p a t h o g e n i c f u n g i , B e a u v e r i a b a s s i a n a ( B a l s . ) V u i l l . a n d V e r t i c i l l i u m l e c a n i i ( Z i m m . ) V i e g a s a r e c a p a b l e o f i n f e c t i n g a w i d e r a n g e o f i n s e c t p e s t s a n d s h o w p r o m i s e i n c o m m e r c i a l i z a t i o n . T h i s l a b o r a t o r y s t u d y w a s m a d e a t t h e D e p a r t m e n t o f E n t o m o l o g y , F a c u l t y o f A g r i c u l t u r e , A n n a m a l a i U n i v e r s i t y , T a m i l n a d u , I n d i a d u r i n g 2 0 0 8 - 2 0 0 9 t o e v a l u a t e t h e s u i t a b i l i t y o f c e r t a i n c u l t u r e m e d i a f o r t h e s e f u n g i . T h r e e s y n t h e t i c m e d i a v i z . , P o t a t o D e x t r o s e A g a r ( P D A ) , C z a p e k s D o x A g a r ( C D A ) , R o s e B e n g a l A g a r ( R B A ) a n d t h r e e n a t u r a l s u b s t r a t e s v i z . , w a t e r h y a c i n t h , r i c e b r a n a n d s p e n t m u s h r o o m p a d d y s t r a w w e r e c h o s e n . T h e s u i t a b i l i t y o f t h e m e d i u m w a s a s s e s s e d b a s e d o n t h e s p e c i f i c p a r a m e t e r s n a m e l y c o l o n y g r o w t h i n d i a m e t e r , s p o r e d e n s i t y a n d b i o m a s s p r o d u c t i o n . T h e m a x i m u m c o l o n y g r o w t h a t t a i n e d b y B . b a s s i a n a ( 4 2 . 0 0 m m ) a n d t h e h i g h e s t s p o r e d e n s i t y ( 4 . 5 2 ´ 1 0 7 s p o r e s / m l ) a n d b i o m a s s p r o d u c t i o n ( 4 6 6 . 3 3 m g ) w e r e o b t a i n e d i n t h e s y n t h e t i c m e d i u m , P D A . A m o n g n a t u r a l s u b s t r a t e s , r i c e b r a n a m e n d e d m e d i u m a c h i e v e d t h e h i g h e s t c o l o n y g r o w t h ( 4 6 . 3 3 m m ) a n d y i e l d e d m o r e s p o r e d e n s i t y o f 4 . 8 6 ´ 1 0 7 s p o r e s / m l a n d t h e b i o m a s s o f 4 8 5 . 0 0 m g . T h e y i e l d e d s p o r e s w e r e b i o a s s a y e d a g a i n s t S p o d o p t e r a l i t u r a F a b . w h i c h e x e r t e d 7 3 . 3 3 p e r c e n t m o r t a l i t y . V . l e c a n i i a c h i e v e d t h e m a x i m u m c o l o n y g r o w t h ( 4 7 . 6 7 m m ) a n d s p o r e d e n s i t y o f 4 . 7 3 ´ 1 0 7 s p o r e s / m l a n d b i o m a s s o f 4 8 4 . 6 7 m g o n R B A a n d o n r i c e b r a n , i t i s r e c o r d e d a s 4 8 . 6 7 m m , 5 . 0 6 ´ 1 0 7 s p o r e s / m l a n d 4 9 2 . 5 2 m g , r e s p e c t i v e l y . T h e m o r t a l i t y o f A p h i s g o s s y p i i w a s 9 3 . 3 3 a n d 1 0 0 . 0 0 p e r c e n t w h e n t r e a t e d w i t h V . l e c a n i i g r o w n o n R B A a n d r i c e b r a n r e s p e c t i v e l y . 5 0 8 - 5 1 2 | J R B | 2 0 1 1 | V o l 1 | N o 7 © F i c u s P u b l i s h e r s . T h i s O p e n A c c e s s a r t i c l e i s g o v e r n e d b y t h e C r e a t i v e C o m m o n s A t t r i b u t i o n L i c e n s e ( h t t p : / / c r e a t i v e c o m m o n s . o r g / l i c e n s e s / b y / 2 . 0 ) , w h i c h g i v e s p e r m i s s i o n f o r u n r e s t r i c t e d u s e , n o n - c o m m e r c i a l , d i s t r i b u t i o n , a n d r e p r o d u c t i o n i n a l l m e d i u m , p r o v i d e d t h e o r i g i n a l w o r k i s p r o p e r l y c i t e d . S u b m i t Y o u r M a n u s c r i p t w w w . f i c u s p u b l i s h e r s . c o m w w w . j r e s e a r c h b i o l o g y . c o m J o u r n a l o f R e s e a r c h i n b i o l o g y A n I n t e r n a t i o n a l O p e n A c c e s s O n l i n e R e s e a r c h J o u r n a l A u t h o r s : K a r t h i k e y a n A a n d S e l v a n a r a y a n a n V . I n s t i t u t i o n : D e p a r t m e n t o f E n t o m o l o g y , F a c u l t y o f A g r i c u l t u r e , A n n a m a l a i U n i v e r s i t y , A n n a m a l a i n a g a r 6 0 8 0 0 2 , T a m i l n a d u , I n d i a . C o r r e s p o n d i n g a u t h o r : K a r t h i k e y a n A . E m a i l : k a r t h i _ e n t o @ y a h o o . c o . i n W e b A d d r e s s : h t t p : / / j r e s e a r c h b i o l o g y . c o m / D o c u m e n t s / R A 0 1 3 2 . p d f . D a t e s : R e c e i v e d : 2 0 O c t 2 0 1 1 / A c c e p t e d : 2 7 O c t 2 0 1 1 / P u b l i s h e d : 0 7 N o v 2 0 1 1 A r t i c l e C i t a t i o n : K a r t h i k e y a n A a n d S e l v a n a r a y a n a n V . S t u d i e s o n t h e s u i t a b i l i t y o f c e r t a i n c u l t u r e m e d i a f o r B e a u v e r i a b a s s i a n a ( B a l s . ) V u i l l . , a n d V e r t i c i l l i u m l e c a n i i ( Z i m m . ) V i e g a s . J o u r n a l o f r e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 1 ) 7 : 5 0 8 - 5 1 2 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y A n I n t e r n a t i o n a l O n l i n e O p e n A c c e s s P u b l i c a t i o n g r o u p O r i g i n a l R e s e a r c h P a p e r

I N T R O D U C T I O N I n d i a i s b e s t o w e d w i t h a r i c h b i o d i v e r s i t y o f e n t o m o p a t h o g e n s , u t i l i z a t i o n o f t h e s e n a t u r a l a n d r e n e w a b l e r e s o u r c e s i s i m p o r t a n t i n a s u c c e s s f u l b i o c o n t r o l s t r a t e g y . A m o n g t h e b i o c o n t r o l a g e n t s , e s p e c i a l l y e n t o m o p a t h o g e n i c f u n g i ( i . e . f u n g a l p a t h o g e n s w h i c h i n f e c t i n s e c t s ) p l a y s a p r e d o m i n a n t r o l e i n p e s t c o n t r o l ( L a t g e a n d P a p i e r o k 1 9 8 8 , H a j e k a n d S t . L e g e r 1 9 9 4 ) . E n t o m o p a t h o g e n i c f u n g i a r e t h e p o t e n t i a l m i c r o b i a l a l t e r n a t i v e s t o c h e m i c a l i n s e c t i c i d e s a n d o f f e r a n u m b e r o f b e n e f i t s s u c h a s g r o w t h f a c i l i t y o n a v a r i e t y o f s u b s t r a t e s , h i g h v i r u l e n c e , t r a n s c u t i c u l a r p e n e t r a t i o n , b r o a d h o s t r a n g e , s a f e t y t o h u m a n b e i n g s , a n i m a l s a n d e n v i r o n m e n t ( M c C o y , 1 9 9 0 ) . B . b a s s i a n a i s a n i m p e r f e c t e n t o m o p a t h o g e n i c f u n g u s t h a t a t t a c k s a w i d e r a n g e o f a g r i c u l t u r a l p e s t s ( F e n g e t a l , 1 9 9 4 ) a n d a l s o g r o w s o n s o i l a s s a p r o p h y t e ( B i d o c h k a e t a l , 1 9 9 8 ) . V . l e c a n i i h a s b e e n r e c o g n i z e d a s h i g h p o t e n t i a l e n t o m o p a t h o g e n i n b i o l o g i c a l c o n t r o l o f a p h i d s . M a n y i s o l a t e s o f t h i s f u n g u s d e m o n s t r a t e h i g h p a t h o g e n i c i t y t o t h e s e v e r a l s p e c i e s o f a p h i d s ( K i m e t a l , 2 0 0 7 , D e r a k h s h a n e t a l , 2 0 0 8 ) . U s e o f e n t o m o p a t h o g e n i c f u n g i a s b i o c o n t r o l a g e n t s a g a i n s t i n s e c t p e s t s h a s r e c e i v e d g r e a t e r g l o b a l a t t e n t i o n d u r i n g t h e l a s t f e w d e c a d e s . U n l i k e b a c t e r i a l a n d v i r a l i n s e c t p a t h o g e n s , t h e m o d e o f a c t i o n o f t h e s e f u n g i d o e s n o t r e q u i r e i n g e s t i o n b y t h e t a r g e t i n s e c t s . T h e i n f e c t i v e p r o p a g u l e s a r e t h e c o n i d i a t h a t c o n t a c t a n d a d h e r e t o t h e i n s e c t c u t i c l e t h r o u g h h y d r o p h o b i c m e c h a n i s m ( B o u c i a s e t a l , 1 9 9 8 ) . T h e c o n i d i a t h e n g e r m i n a t e a n d t h e h y p h a e p e n e t r a t e t h r o u g h t h e c u t i c l e . T h e s e a d v a n t a g e s s h o w p r o m i s e i n c o m m e r c i a l d e v e l o p m e n t o f m y c o i n s e c t i c i d e s ( M i l n e r , 1 9 9 7 ) . F o r t h e c o m m e r c i a l p r o d u c t i o n o f f u n g a l s p o r e s , i t i s n e c e s s a r y t o o b t a i n a n i d e a l , c h e a p a n d h i g h l y p r o d u c t i v e c u l t u r e m e d i u m . T h e p r e s e n t s t u d y w a s t h e r e f o r e u n d e r t a k e n t o e v a l u a t e t h e s u i t a b i l i t y o f c e r t a i n s y n t h e t i c m e d i a a n d n a t u r a l s u b s t r a t e s a s c u l t u r e m e d i u m . T o e v a l u a t e t h e p a t h o g e n i c i t y o f B . B a s s i a n a s p o r e s o b t a i n e d f r o m e a c h m e d i a w e r e e v a l u a t e d a g a i n s t T o b a c c o c a t e r p i l l a r , S p o d o p t e r a l i t u r a ( F a b . ) ( L e p i d o p t e r a : N o c t u i d a e ) a p o l y p h a g o u s p e s t a f f e c t i n g s e v e r a l c r o p s w o r l d w i d e c a u s i n g e x t e n s i v e l o s s i n a g r i c u l t u r a l p r o d u c t i o n . T h e s p o r e s o f V . l e c a n i i w a s b i o - a s s a y e d a g a i n s t t h e c o s m o p o l i t a n s u c k i n g i n s e c t p e s t A p h i s g o s s y p i i ( G l o v . ) ( H e m i p t e r a : A p h i d i d a e ) . M A T E R I A L S A N D M E T H O D S T h e p r e s e n t i n v e s t i g a t i o n w a s c a r r i e d o u t a t t h e D e p a r t m e n t o f E n t o m o l o g y , F a c u l t y o f A g r i c u l t u r e , A n n a m a l a i U n i v e r s i t y d u r i n g 2 0 0 8 2 0 0 9 . T w o e n t o m o p a t h o g e n i c f u n g i B . b a s s i a n a a n d V . l e c a n i i w e r e o b t a i n e d f r o m R o m V i j a y B i o t e c h P v t . L t d . , P o n d i c h e r r y , I n d i a . E a c h f u n g u s w a s g r o w n o n t h r e e c o m m e r c i a l l y a v a i l a b l e m e d i a n a m e l y P o t a t o D e x t r o s e A g a r ( P D A ) , C z a p e k s D o x A g a r ( C D A ) a n d R o s e B e n g a l A g a r ( R B A ) ( M / S . H i m e d i a L a b o r a t o r i e s P v t . L t d . , I n d i a ) . T h e d e p t h o f t h e s e a g a r m e d i a w h e n p o u r e d i n t o P e t r i d i s h w a s 3 m m . T h i s w a s a c h i e v e d b y p o u r i n g a p p r o x i m a t e l y 1 5 m l o f m o l t e n a g a r m e d i a i n t o 9 5 m m ´ 1 5 m m P e t r i d i s h e s ( B o r o s i l ® ) . I n a d d i t i o n , c e r t a i n n a t u r a l s u b s t r a t e s v i z . , r i c e b r a n , w a t e r h y a c i n t h l e a f s t a l k s ( E i c h h o r n i a c r a s s i p e s ) a n d s p e n t m u s h r o o m w a s t e w e r e a l s o t e s t e d t o a s s e s s t h e s u i t a b i l i t y o f m e d i u m t o t h e t e s t f u n g i . 4 0 0 g m o f e a c h s u b s t r a t e v i z . , o v e r n i g h t s o a k e d a n d d e c a n t e d r i c e b r a n , f r e s h l y c o l l e c t e d w a t e r h y a c i n t h l e a f s t a l k s a n d s p e n t e d i b l e m u s h r o o m b e d ( p a d d y s t r a w ) w e r e s u r f a c e s t e r i l i z e d w i t h 0 . 1 % s o d i u m h y p o c h l o r i t e a n d f i n e l y g r o u n d w i t h b l e n d e r . T o e a c h g r o u n d s u b s t r a t e , 3 0 0 m l o f d o u b l e d i s t i l l e d w a t e r ( h a l f o f w h i c h w a s u s e d t o g r o u n d t h e s u b s t r a t e ) w a s a d d e d a n d f i l t e r e d w i t h m u s l i n c l o t h a n d c o l l e c t e d i n t o a 5 0 0 m l b e a k e r . 1 5 g m o f a g a r - a g a r w a s a d d e d t o e a c h a n d h e a t e d g e n t l y t o d i s s o l v e t h e i n g r e d i e n t s . T h e m e d i a c o n t e n t s w e r e t r a n s f e r r e d t o v o l u m e t r i c f l a s k ( 1 l i t . ) a n d m a d e u p t o t h e v o l u m e w i t h s t e r i l e d i s t i l l e d w a t e r . T h e p H o f a l l m e d i a w e r e a d j u s t e d t o p H 7 w i t h s t e r i l e 1 N , N a O H b e f o r e a u t o c l a v i n g . T h e m e d i a w e r e p o u r e d t o p e t r i d i s h e s u p t o 3 m m d e p t h . A l l t h e p e t r i p l a t e s w e r e p o i n t i n o c u l a t e d a t t h e c e n t r e o f t h e m e d i u m w i t h a 5 m l c o n i d i a l s u s p e n s i o n ( 1 0 7 c o n d i a m l - 1 ) a n d i n c u b a t e d a t 2 5 ± 2 ° C w i t h 7 0 ± 5 p e r c e n t R H f o r 1 0 d a y s . E a c h m e d i u m w a s r e p l i c a t e d t h r i c e . T h e d i a m e t e r g r o w t h c i r c l e o f t h e f u n g a l c o l o n y w a s m e a s u r e d a s s u g g e s t e d b y D a g g u p a t i K o m a l a ( 1 9 8 8 ) . O n e c m d i a m e t e r p l u g w a s t a k e n e x a c t l y h a l f w a y b e t w e e n t h e c e n t r e a n d e d g e o f t h e c o l o n y f r o m e a c h p a t h o g e n o n e a c h o f t h e s u b s t r a t e s . T h e p l u g s w e r e h o m o g e n i z e d i n 5 m l 0 . 0 1 % T r i t o n X 1 0 0 i n a 5 0 m l p o l y e s t e r e n e t u b e f o r a p p r o x i m a t e l y 1 m i n . a n d t h e c o n i d i a w e r e c o u n t e d u s i n g a n e u b a u e r h e m o c y t o m e t e r . T o a s s e s s t h e b i o m a s s p r o d u c t i o n o f t e s t f u n g u s , f l a m e s t e r i l i z e d c o r k b o r e r o f 1 0 m m d i a m e t e r w a s u s e d t o c o r e o u t d i s c s o f t h e f u n g a l 5 0 9 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 1 ) 7 : 5 0 8 - 5 1 2 K a r t h i k e y a n e t a l . , 2 0 1 1

c u l t u r e s g r o w n o n t h e r e s p e c t i v e m e d i u m i n t h e p e t r i d i s h e s s o a s t o i n o c u l a t e t h e s a m e i n t o 2 5 0 m l E r l e n m e y e r f l a s k s c o n t a i n i n g t h e r e s p e c t i v e t e s t b r o t h s . T h r e e r e p l i c a t e s o f e a c h b r o t h w e r e m a i n t a i n e d . I t w a s i n c u b a t e d f o r 1 4 d a y s a t 2 5 ± 2 ° C t o a t t a i n m a x i m u m g r o w t h a n d s p o r u l a t i o n . T h e m y c e l i a l m a t s w e r e c o l l e c t e d b y s u c t i o n f i l t e r i n g o n p r e w e i g h e d f i l t e r p a p e r s ( W h a t m a n 1 0 0 ) , a n d d r i e d i n h o t a i r o v e n a t 1 0 5 ° C f o r 2 4 h r s a n d w e i g h e d a g a i n . T h e d i f f e r e n c e i n t h e w e i g h t l o s s g a v e t h e b i o m a s s p r o d u c e d ( H a l l a n d B e l l , 1 9 6 1 ) . T o e v a l u a t e t h e p a t h o g e n i c i t y , t h e s p o r e s u s p e n s i o n s p r e p a r e d f r o m t h e c u l t u r e o f B . b a s s i a n a a n d V . l e c a n i i g r o w n o n d i f f e r e n t m e d i a w e r e t e s t e d a g a i n s t S . l i t u r a a n d A . g o s s y p i i r e s p e c t i v e l y a t a s p o r e l o a d o f 1 0 7 s p o r e s m l - 1 . T h r e e r e p l i c a t i o n s w e r e m a i n t a i n e d w i t h a c o n t r o l s p r a y e d w i t h s t e r i l e d i s t i l l e d w a t e r a l o n e . T h e m o r t a l i t y w a s r e c o r d e d f o u r d a y s a f t e r t r e a t m e n t a n d t h e p e r c e n t m o r t a l i t y w a s c a l c u l a t e d . T h e d a t a w e r e a n a l y s e d u s i n g I R R I S T A T a n a l y s i s d e v e l o p e d b y I R R I , P h i l i p p i n e s . R E S U L T S A N D D I S C U S S I O N I n t h i s s t u d y , e x t e n s i v e v a r i a b i l i t y w a s o b s e r v e d i n t h e g r o w t h o f B . b a s s i a n a a n d V . l e c a n i i w h e n g r o w n o n d i f f e r e n t s u b s t r a t e s . A m o n g s y n t h e t i c m e d i a f o r B . b a s s i a n a , P D A s h o w e d t h e m a x i m u m c o l o n y g r o w t h o f 4 2 . 0 0 m m d i a m e t e r w i t h a c o n i d i a l d e n s i t y o f 4 . 5 2 ´ 1 0 7 c o n i d i a m l - 1 a n d t h e b i o m a s s o f 4 6 6 . 3 3 m g . T h e m a x i m u m p a t h o g e n i c i t y a g a i n s t S . l i t u r a w a s 7 3 . 3 3 p e r c e n t . W h e r e a s f o r V . l e c a n i i , R B A a c h i e v e d t h e b e s t c o l o n y g r o w t h o f 4 7 . 6 7 m m d i a . , c o n i d i a l d e n s i t y o f a b o u t 4 . 7 3 ´ 1 0 7 c o n i d i a m l - 1 a n d t h e b i o m a s s p r o d u c t i o n w a s 4 8 4 . 6 7 m g . T h e i n f e c t i v i t y a g a i n s t A . g o s s y p i i w a s 9 3 . 3 3 p e r c e n t . O t h e r m e d i a s h o w e d c o m p a r a t i v e l y l e s s o f t h e s e p a r a m e t e r s . A m o n g t h e n a t u r a l s u b s t r a t e s a m e n d e d m e d i a , r i c e b r a n a m e n d e d m e d i u m a c h i e v e d t h e h i g h e s t c o l o n y g r o w t h o f 4 6 . 3 3 m m d i a . f o r B . b a s s i a n a a n d 4 8 . 6 7 m m d i a . f o r V . l e c a n i i . T h e s p o r e d e n s i t y a t t a i n e d w a s 4 . 8 6 a n d 5 . 0 6 ´ 1 0 7 c o n i d i a m l - 1 ; t h e b i o m a s s p r o d u c t i o n w a s 4 8 4 . 6 7 m g a n d 4 9 2 . 5 2 m g f o r b o t h B . b a s s i a n a a n d V . l e c a n i i r e s p e c t i v e l y . T h e i n f e c t i v i t y o f B . b a s s i a n a a g a i n s t S . l i t u r a w a s 8 0 . 0 0 p e r c e n t a n d V . l e c a n i i a g a i n s t A . g o s s y p i i w a s 1 0 0 . 0 0 p e r c e n t m o r t a l i t y ( T a b l e 1 ) . K a m p a n d B i d o c h k a ( 2 0 0 2 ) s t u d i e d d i f f e r e n t n u t r i e n t t y p e s i n t h e a g a r m e d i a a n d o b s e r v e d v a r i a b i l i t y i n t h e n u m b e r o f c o n i d i a p r o d u c e d . I n a s t u d y r e l a t e d t o t h i s i n v e s t i g a t i o n , S i w a c h a n d J a i p a l ( 2 0 0 4 ) d o c u m e n t e d t h a t w h e a t b r a n a n d m a i z e b r a n J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 1 ) 7 : 5 0 8 - 5 1 2 5 1 0 K a r t h i k e y a n e t a l . , 2 0 1 1 M e d i a B e a u v e r i a b a s s i a n a V e r t i c i l l i u m l e c a n i i C o l o n y D i a . ( m m ) S p o r e d e n s i t y ( 1 × 1 0 7 c o n i d i a / m l ) B i o m a s s ( m g ) S . l i t u r a M o r t a l - i t y * ( % ) C o l o n y D i a . ( m m ) S p o r e d e n s i t y ( 1 × 1 0 7 c o - n i d i a / m l ) B i o m a s s ( m g ) A . g o s s y p i i M o r t a l i t y * ( % ) S y n t h e t i c M e d i a P D A 4 2 . 0 0 4 . 5 2 4 6 6 . 3 3 7 3 . 3 3 ( 5 9 . 2 1 ) 3 3 . 6 7 4 . 0 1 3 5 5 . 0 0 7 3 . 3 3 ( 5 9 . 2 1 ) C D A 2 9 . 3 3 2 . 9 8 2 7 4 . 3 3 4 6 . 6 7 ( 4 3 . 4 4 ) 3 0 . 3 3 3 . 0 1 2 9 1 . 6 7 5 3 . 3 3 ( 4 6 . 9 2 ) R B A 3 3 . 3 3 3 . 9 3 3 5 2 . 0 0 6 6 . 6 7 ( 5 4 . 9 9 ) 4 7 . 6 7 4 . 7 3 4 8 4 . 6 7 9 3 . 3 3 ( 7 8 . 4 4 ) N a t u r a l S u b - s t r a t e s H y a c i n t h s t a l k 2 9 . 3 3 2 . 2 8 2 4 8 . 8 1 4 6 . 6 7 ( 4 3 . 4 4 ) 3 1 . 6 7 2 . 5 5 2 6 0 . 0 2 6 6 . 6 7 ( 5 4 . 9 9 ) R i c e b r a n 4 6 . 3 3 4 . 8 6 4 8 4 . 6 7 8 0 . 0 0 ( 6 3 . 9 3 ) 4 8 . 6 7 5 . 0 6 4 9 2 . 5 2 1 0 0 . 0 0 ( 8 2 . 9 9 ) P a d d y s t r a w 1 8 . 0 0 0 . 5 5 1 7 3 . 6 4 2 6 . 6 7 ( 3 1 . 0 3 ) 1 9 . 3 3 0 . 7 6 1 7 1 . 3 7 4 6 . 6 7 ( 4 3 . 4 4 ) C o n t r o l 0 . 0 0 ( 4 . 0 5 ) 0 . 0 0 ( 4 . 0 5 ) S . E d . 1 . 2 0 0 . 0 4 2 . 1 5 3 . 0 3 1 . 1 5 0 . 1 0 1 . 3 1 4 . 4 8 C . D . ( P = 0 . 0 5 ) 2 . 4 0 0 . 1 1 5 . 9 7 6 . 7 5 2 . 3 5 0 . 2 8 3 . 6 6 9 . 9 8 T a b l e 1 . S u i t a b i l i t y o f c e r t a i n c u l t u r e m e d i a f o r t h e g r o w t h c h a r a c t e r i s t i c s o f B . b a s s i a n a a n d V . l e c a n i i * V a l u e s m e a n o f t h r e e r e p l i c a t i o n s V a l u e s i n p a r e n t h e s e s a r e a r c s i n e t r a n s f o r m e d

a l l o w e d t h e m a x i m u m f u n g a l s p o r u l a t i o n w i t h c o n i d i a l c o u n t o f 5 . 3 3 a n d 5 . 5 2 ´ 1 0 7 c o n i d i a / m l , r e s p e c t i v e l y f o l l o w e d b y r i c e b r a n ( 5 . 0 7 ´ 1 0 7 c o n i d i a / m l ) . ( M a l a r v a n n a n e t a l , 2 0 1 0 ) I n a p r e l i m i n a r y s t u d y o n p a t h o g e n i c i t y o f B . B a s s i a n a a g a i n s t S . l i t u r a t h e f e c u n d i t y w a s c o m p l e t e l y a r r e s t e d i n t h e s p o r e c o n c e n t r a t i o n o f 2 . 4 × 1 0 7 c o n i d i a / m l . ( H a n h V u e t a l , 2 0 0 7 ) r e p o r t e d t h a t , a m o n g v a r i o u s s t r a i n s o f e n t o m o p a t h o g e n i c f u n g i , V . l e c a n i i 4 1 1 8 5 r e c o r d e d 1 0 0 p e r c e n t m o r t a l i t y a g a i n s t A . g o s s y p i i a n d M y z u s p e r s i c a e o n 2 n d a n d 5 t h d a y a f t e r t r e a t m e n t r e s p e c t i v e l y . F r o m t h e g r o w t h p a r a m e t e r s o f f u n g i s t u d i e d , a m o n g t h e s y n t h e t i c m e d i a , P D A p r o v e d i t s s u i t a b i l i t y t o B . b a s s i a n a w h i l e R B A f a v o u r e d V . l e c a n i i . A m o n g t h e n a t u r a l s u b s t r a t e s , r i c e b r a n a m e n d e d m e d i u m w a s f o u n d t o b e t h e b e s t f o r b o t h e n t o m o p a t h o g e n i c f u n g i . A C K N O W L E D G E M E N T T h e a u t h o r s a r e g r a t e f u l t o R o m v i j a y B i o o t e c h P v t . L t d . , P o n d i c h e r r y , I n d i a , f o r p r o v i d i n g e n t o m o p a t h o g e n i c f u n g a l f o r m u l a t i o n s a n d f i n a n c i a l s u p p o r t . T h e y a r e g r a t e f u l t o t h e a u t h o r i t i e s o f A n n a m a l a i U n i v e r s i t y f o r p r o v i d i n g n e c e s s a r y f a c i l i t i e s f o r c a r r y i n g o u t t h i s r e s e a r c h . R E F E R E N C E S B i d o c h k a M J , K a s p e r s k i J E , W i l d G A M . 1 9 9 8 . O c c u r r e n c e o f t h e e n t o m o p a t h o g e n i c f u n g i M e t a r h i z i u m a n i s o p l i a e a n d B e a u v e r i a b a s s i a n a i n s o i l s f r o m t e m p e r a t e a n d n e a r - n o r t h e r n h a b i t a t s . C a n a d i a n J . B o t . , 7 6 : 1 1 9 8 - 1 2 0 4 . B o u c i a s D G , P e n l a n d J C , L a t g e J P . 1 9 8 8 . N o n s p e c i f i c f a c t o r s i n v o l v e d i n a t t a c h m e n t o f e n t o m o p a t h o g e n i c D e u t e r o m y c e t e s t o h o s t i n s e c t c u t i c l e . A p p l . E n v i r o n . M i c r o b i o l o g y 5 4 : 1 7 9 5 - 1 8 0 5 . D a g g u p a t i K o m a l a . 1 9 8 8 . C e r t a i n g r o w t h s t u d i e s o f S a r o c l a d i u m o r y z a e W . G a m s a n d D . H a w k s w . V a r i e t a l s c r e e n i n g a n d t h e e f f e c t o f c e r t a i n p l a n t e x t r a c t s o n t h e c o n i d i a l g e r m i n a t i o n . M . S c . ( A g . ) T h e s i s , A n n a m a l a i U n i v . , A n n a m a l a i n a g a r , I n d i a . 3 4 - 3 5 . D e r a k h s h a n A , R a b i n d r a R J , R a m a n u j a m B , R a h i m i M . 2 0 0 8 . E v a l u a t i o n o f d i f f e r e n t m e d i a a n d m e t h o d s o f c u l t i v a t i o n o n t h e p r o d u c t i o n a n d v i a b i l i t y o f e n t o m o p a t h o g e n i c f u n g i , V e r t i c i l l i u m l e c a n i i ( Z i m m . ) V i e g a s . P a k . J . B i o l . S c i . , 1 1 : 1 5 0 6 - 1 5 0 9 . F e n g M G , P o p r a w s k i T J , K h a c h a t o u r i a n s G G . 1 9 9 4 . P r o d u c t i o n , f o r m u l a t i o n a n d a p p l i c a t i o n o f t h e e n t o m o p a t h o g e n i c f u n g u s B e a u v e r i a b a s s i a n a f o r i n s e c t c o n t r o l : c u r r e n t s t a t u s . B i o c o n t . S c i . T e c h n o l . , 4 : 3 - 3 4 . H a l l I M , B e l l J V . 1 9 6 1 . F u r t h e r s t u d i e s o n t h e e f f e c t o f t e m p e r a t u r e o n t h e g r o w t h o f s o m e e n t o m o p h t h o r a c e o u s f u n g i . J . I n s e c t P a t h o l . , 3 : 2 8 9 - 2 9 6 . H a n h V u V , H o n g S , K i m K . 2 0 0 7 . S e l e c t i o n o f e n t o m o p a t h o g e n i c f u n g i f o r a p h i d C o n t r o l . J . B i o s c i e n c e a n d B i o e n g i n e e r i n g 1 0 4 ( 6 ) : 4 9 8 - 5 0 5 . H a j e k A E , S t L e g e r R J . 1 9 9 4 . I n t e r a c t i o n s b e t w e e n f u n g a l p a t h o g e n s a n d i n s e c t h o s t s . A n n . l R e v . E n t o m o l . , 3 9 : 2 9 3 - 3 2 2 . K a m p A M , B i d o c h k a M J . 2 0 0 2 . C o n i d i u m p r o d u c t i o n b y i n s e c t p a t h o g e n i c f u n g i o n c o m m e r c i a l l y a v a i l a b l e a g a r s . L e t t e r s i n A p p l . M i c r o b i o l o g y 3 5 : 7 4 - 7 7 . K i m J J , G o e t t e l M S , G i l l e s p i e D R . 2 0 0 7 . P o t e n t i a l o f L e c n i c i l l i u m s p e c i e s f o r d u a l m i c r o b i a l c o n t r o l o f a p h i d s a n d c u c u m b e r p o w d e r y m i l d e w f u n g u s , S p h a e r o t h e c a f u l i g i n e a . B i o l . C o n t r o l 4 0 ( 3 ) : 3 2 7 - 3 3 2 . L a t g e J P , P a p i e r o k B . 1 9 8 8 . A p h i d p a t h o g e n s . I n : A p h i d s , T h e i r B i o l o g y , N a t u r a l E n e m i e s a n d C o n t r o l . V o l . 2 b . A . K . M i n k s a n d P . H a r r e w i j n , ( e d s . ) . E l s e v i e r , A m s t e r d a m , N e t h e r l a n d s . 3 2 3 - 3 3 5 . M a l a r v a n n a n S , M u r a l i P D , S h a n t h a k u m a r S P , P r a b a v a t h y V R , S u d h a N a i r . 2 0 1 0 . L a b o r a t o r y e v a l u a t i o n o f t h e e n t o m o p a t h o g e n i c f u n g i , B e a u v e r i a b a s s i a n a a g a i n s t t h e T o b a c c o c a t e r p i l l a r , S p o d o p t e r a l i t u r a F a b r i c i u s ( N o c t u i d a e : L e p i d o p t e r a ) . J o u r n a l o f B i o p e s t i c i d e s 3 ( 1 S p e c i a l I s s u e ) : 1 2 6 - 1 3 1 . M c C o y C W . 1 9 9 0 . E n t o m o g e n o u s f u n g i a s m i c r o b i a l p e s t i c i d e s . I n N e w D i r e c t i o n s i n B i o l o g i c a l C o n t r o l : A l t e r n a t i v e s f o r S u p p r e s s i n g A g r i c u l t u r a l P e s t s a n d D i s e a s e s e d . B a k e r , R . R . a n d D u n n , P . E . p p . 1 3 9 - 1 5 9 . N e w Y o r k : A l a n R . L i s s . 5 1 1 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 1 ) 7 : 5 0 8 - 5 1 2 K a r t h i k e y a n e t a l . , 2 0 1 1

M i l n e r R J . 1 9 9 7 . P r o s p e c t s f o r b i o p e s t i c i d e s f o r a p h i d c o n t r o l . E n t o m o p h a g a 4 2 : 2 2 7 - 2 3 9 . S i w a c h P , J a i p a l S . 2 0 0 4 . E v a l u a t i o n o f i n d u s t r i a l w a s t e s f o r m a s s p r o d u c t i o n o f B e a u v e r i a b a s s i a n a a n d t h e i r e f f e c t s a g a i n s t C h i l o a u r i c i l l u s . A n n . P l . P r o t e c . S c i . , 1 2 : 1 9 3 - 1 9 5 . S u b m i t y o u r a r t i c l e s o n l i n e a t F i c u s p u b l i s h e r s . c o m A d v a n t a g e s E a s y o n l i n e s u b m i s s i o n C o m p l e t e P e e r r e v i e w A f f o r d a b l e C h a r g e s Q u i c k p r o c e s s i n g E x t e n s i v e i n d e x i n g O p e n A c c e s s a n d Q u i c k s p r e a d i n g Y o u r e t a i n s y o u r c o p y r i g h t ( N o c o p y r i g h t a s s i g n m e n t ) s u b m i t @ f i c u s p u b l i s h e r s . c o m w w w . f i c u s p u b l i s h e r s . c o m / s u b m i t . a s p x . J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 1 ) 7 : 5 0 8 - 5 1 2 5 1 2 K a r t h i k e y a n e t a l . , 2 0 1 1