J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y V e r m i w a s h m i x e d d i e t e f f e c t o n g r o w t h o f O r e o c h r o m i s m o s s a m b i c u s ( T i l a p i a ) K e y w o r d s : O r e o c h r o m i s m o s s a m b i c u s , V e r m i w a s h . A B S T R A C T : O r e o c h r o m i s m o s s a m b i c u s f r i e s w e r e c o l l e c t e d f r o m K u l l u r s a n t h a i r e s e r v o i r n e a r V i r u d h u n a g a r . T h e y w e r e a c c l i m a t i z e d t o t h e l a b c o n d i t i o n s a t 2 9 ± 1 º C f o r o n e w e e k . O . m o s s a m b i c u s r e c e i v i n g C F F ( C o n t r o l F i s h F e e d ) d i e t e x h i b i t e d a g r o w t h o f 1 4 0 ± 1 0 . 5 8 m g i n 2 1 d a y s . M a x i m u m g r o w t h w a s o b s e r v e d i n f i s h r e c e i v i n g F F V ( F i s h F e e d w i t h 1 0 0 % V e r m i w a s h ) 1 0 0 d i e t a n d i t w a s 4 6 0 . 6 7 ± 0 6 . 0 3 m g . T h u s v e r m i w a s h p l a y s a s i g n i f i c a n t r o l e i n e n h a n c i n g t h e g r o w t h . 3 3 5 - 3 4 0 | J R B | 2 0 1 1 | V o l 1 | N o 5 © F i c u s P u b l i s h e r s . T h i s O p e n A c c e s s a r t i c l e i s g o v e r n e d b y t h e C r e a t i v e C o m m o n s A t t r i b u t i o n L i c e n s e ( h t t p : / / c r e a t i v e c o m m o n s . o r g / l i c e n s e s / b y / 2 . 0 ) , w h i c h g i v e s p e r m i s s i o n f o r u n r e s t r i c t e d u s e , n o n - c o m m e r c i a l , d i s t r i b u t i o n , a n d r e p r o d u c t i o n i n a l l m e d i u m , p r o v i d e d t h e o r i g i n a l w o r k i s p r o p e r l y c i t e d . S u b m i t Y o u r M a n u s c r i p t w w w . f i c u s p u b l i s h e r s . c o m w w w . j r e s e a r c h b i o l o g y . c o m J o u r n a l o f R e s e a r c h i n b i o l o g y A n I n t e r n a t i o n a l O p e n A c c e s s O n l i n e R e s e a r c h J o u r n a l A u t h o r s : R a m e s h g u r u G 1 , S e n t h i l k u m a r P 2 a n d G o v i n d a r a j a n B 3 . I n s t i t u t i o n : 1 D e p a r t m e n t o f Z o o l o g y , V H N S N C o l l e g e , V i r u d h u n a g a r - 6 2 6 0 0 1 , T a m i l n a d u , I n d i a . 2 E n t o m o P a t h o l o g y L a b , I n s t i t u t e o f f o r e s t g e n e t i c s a n d t r e e b r e e d i n g , C o i m b a t o r e - 6 4 1 0 0 2 . 3 M a n o n m a n i a m S u n d a r a n a r U n i v e r s i t y , T h i r u n e l v e l i - 6 2 7 0 1 2 , T a m i l N a d u , I n d i a . C o r r e s p o n d i n g a u t h o r : R a m e s h g u r u W e b A d d r e s s : h t t p : / / j r e s e a r c h b i o l o g y . c o m / D o c u m e n t s / R A 0 0 9 9 . p d f . D a t e s : R e c e i v e d : 0 7 S e p 2 0 1 1 / A c c e p t e d : 1 0 S e p 2 0 1 1 / P u b l i s h e d : 1 4 S e p 2 0 1 1 A r t i c l e C i t a t i o n : R a m e s h g u r u G , S e n t h i l k u m a r P a n d G o v i n d a r a j a n B . V e r m i w a s h m i x e d d i e t e f f e c t o n g r o w t h o f O r e o c h r o m i s m o s s a m b i c u s ( T i l a p i a ) J o u r n a l o f r e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 1 ) 5 : 3 3 5 - 3 4 0 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y A n I n t e r n a t i o n a l O n l i n e O p e n A c c e s s P u b l i c a t i o n g r o u p O r i g i n a l R e s e a r c h P a p e r

I N T R O D U C T I O N F i s h i s t h e m a j o r s o u r c e o f p r o t e i n f o r o v e r o n e b i l l i o n p e o p l e a r o u n d t h e w o r l d ( C a t h a y e t a l . , 2 0 0 4 ) . I n a q u a c u l t u r e f i e l d , t h e e d i b l e f i s h h a s e a r n e d a s i g n i f i c a n t p o s i t i o n i n t h e n u t r i t i o n o f m a n . I t i s r i c h i n p r o t e i n a n d a m i n o a c i d s l i k e l y s i n e , m e t h i o n i n e . I t c o n t a i n s u n i q u e u n s a t u r a t e d f a t t y a c i d l i k e e i c o s a p e n t a e n o i c a c i d w h i c h i s k n o w n t o c o n t r o l c h o l e s t e r o l i n t h e b l o o d . I t i s e a s i l y d i g e s t i b l e a n d c h e a p e r t h a n o t h e r a n i m a l f l e s h ( S a n t h a n a m e t a l . , 1 9 8 7 ) . F o o d i n t a k e i s a v i t a l f a c t o r f o r f i s h g r o w t h a n d i s d e p e n d e n t u p o n t h e q u a l i t y o r c h e m i c a l c o m p o s i t i o n o f f o o d ( E l a n k u m a r a n e t a l . , 1 9 9 2 ) . F i s h r e q u i r e s d i e t s r e l a t i v e l y h i g h e r i n p r o t e i n t h a n t h o s e o f o t h e r c o m m e r c i a l l y c u l t u r e d a n i m a l s ( N R C , 1 9 8 1 ) . W i t h t h e i n c r e a s i n g r e s e a r c h t h r u s t o n t h i s a s p e c t d u r i n g r e c e n t y e a r s t h e r e h a s b e e n m u c h i n t e r e s t o n t h e p o s s i b i l i t y o f u s i n g v a r i o u s n o n - c o n v e n t i o n a l f e e d s o u r c e s . E x p e r i m e n t s w i t h t h e i n c o r p o r a t i o n o f m a t e r i a l s o f a n i m a l o r i g i n l i k e s i l k w o r m p u p a e ( V e n k a d e s h e t a l . , 1 9 8 6 ; N a n d e e s h a e t a l . , 1 9 8 8 ; H o s s a i n e t a l . , 1 9 9 2 ) , a n d v e r m i c o m p o s t ( M a h a l a k s h m i . , 2 0 0 4 ) h o r m o n e s l i k e t h y r o x i n e ( M a h a l a k s h m i , 2 0 0 4 ) a n d d i e t h y l s t i l b e s t r o l ( N a n j u n d a p p a & V a r g h e s e , 1 9 8 9 ) a n d E a r t h w o r m m e a l ( K e s h a v a p p a e t a l . , 1 9 8 9 ; K o s t e c k a & P a c z k a , 2 0 0 6 ) a s s u b s t i t u t e s f o r m e a l h a s a l s o b e e n f o u n d e n c o u r a g i n g . T h e o b j e c t i v e o f t h e p r e s e n t s t u d y w a s t o a s s e s s t h e g r o w t h o f O . m o s s a m b i c u s b y v e r m i w a s h a d d i n g d i e t . M A T E R I A L S A N D M E T H O D S A n i m a l c o l l e c t i o n H e a l t h y O . m o s s a m b i c u s f r i e s w e r e c o l l e c t e d f r o m K u l l u r s a n t h a i r e s e r v o i r n e a r V i r u d h u n a g a r . T h e y w e r e a c c l i m a t i z e d t o t h e l a b c o n d i t i o n s a t 2 9 ± 1 º C f o r o n e w e e k . D u r i n g a c c l i m a t i z a t i o n , t h e f i s h w e r e f e d a d l i b i t u m w i t h f i s h m e a l c o n t a i n e d c o n t r o l d i e t d a i l y o n c e a t 1 0 A M a n d w a t e r a l s o c h a n g e d d a i l y . V e r m i w a s h p r e p a r a t i o n T h e v e r m i w a s h c a n b e c o l l e c t e d f r o m t h e b o d y c a v i t y o f e a r t h w o r m s w i t h o u t c a u s i n g a n y h a r m t o t h e m . I n t h i s m e t h o d o f c o l l e c t i n g t h e f l u i d , t h r e e t o f o u r e a r t h w o r m s w e r e t a k e n i n a n a p p r o x i m a t e l y 1 0 c m d i a m e t e r p e t r i p l a t e . H o l d i n g t h e p l a t e i n a s l a n t i n g p o s i t i o n a n d k e e p i n g e a r t h w o r m s p o i n t i n g d o w n w a r d s , c o l d s h o c k w a s g i v e n t o e a r t h w o r m s b y g e n t l y m o v i n g a s m a l l b e a k e r c o n t a i n i n g a f e w i c e c u b e s o v e r t h e b o d y o f w o r m s . T h e v e r m i w a s h r e l e a s e d d u e t o c o l d s h o c k d r i p s a n d g e t s c o l l e c t e d a t t h e l o w e r s i d e o f t h e p e t r i p l a t e . T h e f l u i d c a n b e p i p e t t e d o u t u s i n g a t r e a t e d p i p e t t e w i t h f i n e n o z z l e . T h i s i s t h e p u r e v e r m i w a s h ( R a d h a D . K a l e . , 2 0 0 6 ) . P r e p a r a t i o n o f f e e d T h r e e d i f f e r e n t f i s h f e e d s , C F F ( C o n t r o l F i s h F e e d ) , F F V 7 5 ( F i s h F e e d w i t h 7 5 % V e r m i w a s h ) , F F V 1 0 0 ( F i s h F e e d w i t h 1 0 0 % V e r m i w a s h ) , w e r e p r e p a r e d b y u s i n g t h e s a m e q u a n t i t y o f i n g r e d i e n t s ( T a b l e 1 ) . T o t h e i n g r e d i e n t s 1 g o f s o d i u m a l g i n a t e w a s a d d e d . I t a c t s a s a b i n d e r a n d d o e s n o t a l l o w t h e c o m p o u n d e d f e e d t o d i s s o l v e i n w a t e r . T h e o n l y d i f f e r e n c e i n t h e f e e d w a s t h e q u a n t i t y o f v e r m i w a s h m i x e d . I n t h e c o n t r o l d i e t t h e f e e d i n g r e d i e n t s w e r e m i x e d w i t h w a t e r . B u t i n F F V 7 5 , 7 5 % o f v e r m i w a s h a n d F F V 1 0 0 , 1 0 0 % o f v e r m i w a s h w a s u s e d . E x p e r i m e n t a l D e s i g n T h e e x p e r i m e n t w a s c a r r i e d o u t t o f i n d o u t t h e i n f l u e n c e o f d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n o f v e r m i w a s h o n g r o w t h , f o o d c o n s u m p t i o n , a s s i m i l a t i o n , m e t a b o l i s m a n d f e e d i n g r a t e i n f i s h . A l l t h e e x p e r i m e n t s w e r e c a r r i e d o u t i n t h e l a b o r a t o r y a t 2 9 º C ± 1 º C a n d 1 2 : 1 2 p h o t o p e r i o d . F i s h w a s r e a r e d i n r o u n d g l a s s t r o u g h s c o n t a i n i n g 1 l i t e r o f w a t e r . 1 5 f i s h , o f s i m i l a r s i z e w e r e c h o s e n f r o m t h e s t o c k . T h e y w e r e w e i g h e d a n d d i v i d e d i n t o f i v e g r o u p s e a c h c o n t a i n i n g t h r e e f i s h . B e f o r e t h e c o m m e n c e m e n t o f e x p e r i m e n t s , t h e f i s h w e r e s t a r v e d f o r 2 4 h o u r s i n o r d e r t o f a c i l i t a t e t o e v a c u a t e t h e i r a l i m e n t a r y c o n t e n t s . T h e y w e r e w e i g h e d t o f i n d o u t t h e i n i t i a l l i v e w e i g h t . T h e f i s h w e r e s u b j e c t e d t o f i v e t y p e s o f e x p e r i m e n t a l f o o d C F F , F F V 7 5 , F F V 1 0 0 a n d a l l e x p e r i m e n t s w e r e c o n d u c t e d s i m u l t a n e o u s l y . F i s h i n a l l g r o u p s w e r e f e d w i t h 1 0 0 m g o f d r y p e l l e t e d f o o d . T h e f i s h w e r e f e d d a i l y o n c e a t 1 0 A M , t h e f e e d r e m a i n s a n d f a e c e s w e r e c o l l e c t e d s e p a r a t e l y u s i n g p i p e t t e s a n d d r i e d i n a h o t a i r o v e n a n d w e i g h e d i n a m o n o p a n b a l a n c e . W a t e r w a s c h a n g e d d a i l y . T h e r e a r i n g e x p e r i m e n t w a s c a r r i e d o u t f o r a p e r i o d o f 2 1 d a y s . T h e w e i g h t o f t h e f i s h w a s f o u n d o u t o n 0 , 7 t h , 1 4 t h , a n d 2 1 s t d a y t o a s s e s s 3 3 6 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 1 ) 5 : 3 3 5 - 3 4 0 R a m e s h g u r u e t a l . , 2 0 1 1 I n g r e d i e n t s W e i g h t ( g ) D r i e d f i s h p o w d e r 4 2 g G r o u n d n u t o i l c a k e p o w d e r 2 0 g B l o o d m e a l p o w d e r 5 g T a p i o c a p o w d e r 1 5 g W h e a t f l o u r 1 5 g M i n e r a l m i x 2 g V i t a m i n s 1 g S o d i u m a l g i n a t e 1 g T a b l e : 1 F e e d p r e p a r a t i o n c o m p o s i t i o n

t h e g r o w t h . T h e f i s h w e r e n o t s u b j e c t e d t o a n y d i s t u r b a n c e s e x c e p t d u r i n g f e e d i n g a n d w a t e r c h a n g i n g o p e r a t i o n s . R E S U L T S M a s s b u d g e t O . m o s s a m b i c u s w e r e r e a r e d a t 2 9 ± 1 º C f o r 2 1 d a y s . T h e f i s h w e r e d i v i d e d i n t o f i v e g r o u p s , e a c h g r o u p w i t h t h r e e t r i p l i c a t e s . T h e f i r s t g r o u p o f f i s h r e c e i v e d c o n t r o l d i e t ( C F F ) . T h e s e c o n d , t h i r d , f o u r t h a n d f i f t h g r o u p o f f i s h r e c e i v e d F F V 7 5 a n d F F V 1 0 0 d i e t s . M a s s b u d g e t s w e r e p r e p a r e d f o r a l l g r o u p s o f f i s h ( T a b l e 2 , 3 a n d 4 ) . G r o w t h O . m o s s a m b i c u s r e c e i v i n g C F F d i e t e x h i b i t e d a g r o w t h o f 1 4 0 ± 1 0 . 5 8 m g i n 2 1 d a y s . M a x i m u m g r o w t h w a s o b s e r v e d i n f i s h r e c e i v i n g F F V 1 0 0 d i e t a n d i t w a s 4 6 0 . 6 7 ± 0 6 . 0 3 m g . F i s h r e c e i v i n g C F F d i e t c o n s u m e d 6 8 5 . 6 7 ± 0 . 6 . 1 1 m g o f d r y f o o d . T h e f i s h r e c e i v i n g F F V 1 0 0 d i e t c o n s u m e d m a x i m u m f o o d a n d i t w a s 1 0 8 8 . 3 3 ± 0 5 . 8 6 m g a n d s h o w e d a n a s s i m i l a t i o n o f 7 7 4 . 6 7 ± 0 5 . 7 7 m g . F e e d i n g r a t e F e e d i n g r a t e o f f i s h d i f f e r e d i n d i f f e r e n t g r o u p s o f f i s h . F i s h r e c e i v i n g C F F d i e t e x h i b i t e d a f e e d i n g r a t e o f 1 0 5 . 3 3 ± 0 0 . 4 7 m g d r y w t / g l i v e w t / d a y . F i s h r e c e i v i n g F F V 7 5 d i e t e x h i b i t e d a f e e d i n g r a t e o f 1 4 9 . 3 3 ± 0 1 . 1 5 m g d r y w t / g l i v e w t / d a y a n d F F V 1 0 0 d i e t e x h i b i t e d a f e e d i n g r a t e o f 1 5 9 . 3 3 ± 0 1 . 5 3 m g d r y w t / g l i v e w t / d a y . A s s i m i l a t i o n r a t e A s s i m i l a t i o n r a t e o f f i s h d i f f e r e d i n d i f f e r e n t g r o u p s o f f i s h . T h e f i s h r e c e i v i n g C F F d i e t s h o w e d a n a s s i m i l a t i o n r a t e o f 8 1 . 6 7 ± 0 1 . 5 3 m g d r y w t / g l i v e w t / d a y . T h e a s s i m i l a t i o n r a t e s f o r f i s h r e c e i v i n g F F V 7 5 a n d F F V 1 0 0 d i e t s w e r e 1 0 6 . 3 3 ± 0 2 . 0 8 a n d 1 1 3 . 6 7 ± 0 0 . 4 7 m g d r y w t / g l i v e w t / d a y , r e s p e c t i v e l y . A s s i m i l a t i o n e f f i c i e n c y o f f i s h i n d i f f e r e n t g r o u p s d i d n o t d i f f e r m u c h ( T a b l e 2 , 3 , a n d 4 ) . D I S C U S S I O N F i s h g r o w t h i s i n f l u e n c e d b y t h e n u t r i e n t s l e v e l s o f f o o d . T h e o p t i m u m a n d m a x i m u m f e e d i n g l e v e l s a r e i n f l u e n c e d b y t h e n a t u r e o f t h e d i e t . I t i s d e p e n d e n t o n t h e t y p e o f t h e f o o d o f f e r e d . I n c r e a s e i n a v a i l a b i l i t y o f f o o d h a v i n g h i g h e r p r o t e i n t h a t p l a y s a m a j o r r o l e i n g r o w t h . F r o m t h e c u l t u r i s t s p o i n t o f v i e w , a g o o d d i e t w o u l d b e o n e w h i c h i s r e a d i l y a v a i l a b l e , c o s t e f f e c t i v e , s i m p l e a n d v e r s a t i l e i n a p p l i c a t i o n ( V i g n e e s w a r a n 2 0 0 5 ) . S u r e n d r a e t a l 2 0 0 5 r e p o r t e d v e r m i w a s h v e r y m u c h u s e f u l i n g r o w t h o f l e g u m e s p l a n t s . S e v e r a l r e s e a r c h p e o p l e s h a v e s t u d i e d t h e g r o w t h o f f i s h w i t h c o n v e n t i o n a l a n d s u p p l e m e n t a r y d i e t . F o o d s u p p l e m e n t i n c l u d e s J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 1 ) 5 : 3 3 5 - 3 4 0 3 3 7 R a m e s h g u r u e t a l . , 2 0 1 1 P a r a m e t e r s ( m g d r y w e i g h t / i n d i v i d u a l ) C o n t r o l G r o w t h ( P ) 1 4 0 . 0 0 ± 1 0 . 5 8 F o o d c o n s u m p t i o n ( C ) 6 8 5 . 6 7 ± 0 6 . 1 1 F a c e s ( F ) 1 5 5 . 6 7 ± 1 0 . 2 6 F o o d a s s i m i l a t i o n ( A ) 5 3 0 . 0 0 ± 0 7 . 6 5 M e t a b o l i s m ( R ) 3 9 0 . 0 0 ± 0 7 . 2 1 F e e d i n g r a t e ( C r ) ( g l i v e w e i g h t / d a y ) 1 0 5 . 3 3 ± 0 0 . 4 7 A s s i m i l a t i o n r a t e ( A r ) ( g l i v e w e i g h t / d a y ) 8 1 . 6 7 ± 0 1 . 5 3 C o n v e r s i o n r a t e ( P r ) ( g l i v e w e i g h t / d a y ) 2 1 . 6 7 ± 0 1 . 5 3 M e t a b o l i s m r a t e ( M r ) ( g l i v e w e i g h t / d a y ) 6 0 . 0 0 ± 0 1 . 0 0 A s s i m i l a t i o n e f f i c i e n c y ( A e ) ( % ) 7 7 ± 0 1 G r o s s c o n v e r s i o n e f f i c i e n c y ( K 1 ) ( % ) 2 0 ± 0 2 N e t c o n v e r s i o n e f f i c i e n c y ( K 2 ) ( % ) 1 7 ± 0 1 T a b l e : 2 M a s s b u d g e t o f O . m o s s a m b i c u s f e d w i t h c o n t r o l d i e t ( C F F ) a t 2 9 ± 1 º C f o r 2 1 d a y s . N o t e : E a c h v a l u e ( ± S D ) r e p r e s e n t s a n a v e r a g e o f 3 i n d i v i d u a l s . P a r a m e t e r s ( m g d r y w e i g h t / i n d i v i d u a l ) F F V 7 5 G r o w t h ( P ) F o o d c o n s u m p t i o n ( C ) F a c e s ( F ) F o o d a s s i m i l a t i o n ( A ) M e t a b o l i s m ( R ) F e e d i n g r a t e ( C r ) ( g l i v e w e i g h t / d a y ) A s s i m i l a t i o n r a t e ( A r ) ( g l i v e w e i g h t / d a y ) C o n v e r s i o n r a t e ( P r ) ( g l i v e w e i g h t / d a y ) M e t a b o l i s m r a t e ( M r ) ( g l i v e w e i g h t / d a y ) A s s i m i l a t i o n e f f i c i e n c y ( A e ) ( % ) G r o s s c o n v e r s i o n e f f i c i e n c y ( K 1 ) ( % ) N e t c o n v e r s i o n e f f i c i e n c y ( K 2 ) ( % ) T a b l e : 3 M a s s b u d g e t s o f O . m o s s a m b i c u s f e d w i t h d i e t c o n t a i n i n g 7 5 % v e r m i w a s h ( F F V 7 5 ) a t 2 9 ± 1 º C f o r 2 1 d a y s . N o t e : E a c h v a l u e ( ± S D ) r e p r e s e n t s a n a v e r a g e o f 3 i n d i v i d u a l s .