J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y T e m p o r a l d i s t r i b u t i o n o f t h e t r a n s f e r r i n a l l e l e s ( T f a a n d T f b ) i n A m a z o n T u r t l e ( P o d o c n e m i s e x p a n s a S c h w e i g g e r , 1 8 1 2 ) K e y w o r d s : P o d o c n e m i s e x p a n s a , A m a z o n B a s i n , t r a n s f e r r i n a l l e l e f r e q u e n c i e s , e l e t r o p h o r e s i s , t e m p o r a l a n a l y s i s . A B S T R A C T : T h i s s t u d y a i m s t o e v a l u a t e t h e t e m p o r a l d i s t r i b u t i o n o f a l l e l e f r e q u e n c i e s a t t h e c o d o m i n a n t t r a n s f e r r i n ( T f ) g e n e l o c u s i n t h r e e p o p u l a t i o n s a m p l e s o f A m a z o n t u r t l e ( P o d o c n e m i s e x p a n s a ) c o l l e c t e d f r o m t h e R i o U a t u m ã , R i o T r o m b e t a s a n d R i o T a p a j ó s i n t h e A m a z o n B a s i n , B r a z i l , o v e r a p e r i o d o f 1 6 t o 2 4 y e a r s a g o . C o n f i r m i n g p r e v i o u s r e s e a r c h , t h e T f l o c u s w h i c h w a s a n a l y z e d b y s t a r c h g e l e l e c t r o p h o r e s i s s h o w e d a d i a l l e l i c p o l y m o r p h i s m w i t h t h e p r e s e n c e o f t h e o r e t i c a l l y e x p e c t e d g e n o t y p e s ( T f a a , T f a b a n d T f b b ) , p r e s u m a b l y e n c o d e d b y t h e c o d o m i n a n t a l l e l e s ( T f a a n d T f b ) . A g o o d g e n e t i c f i t a c c o r d i n g t o H a r d y - W e i n b e r g e x p e c t a t i o n s w i t h i n a n d a m o n g a l l t h e p o p u l a t i o n s a m p l e s w a s a l s o n o t i c e d . C o n t i n g e n c y t e s t s o n t h e o v e r a l l t r a n s f e r r i n a l l e l e d i s t r i b u t i o n s b y c a l c u l a t i n g t h e c h i - s q u a r e ( x 2 ) s h o w e d n o s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t t e m p o r a l v a r i a t i o n ( x 2 = 3 . 0 5 , d . f . = 5 , 0 . 7 0 > P > 0 . 5 0 ) i n t h e p o p u l a t i o n s a m p l e s o f P . e x p a n s a i n t h e s u r v e y e d a r e a s . 3 4 6 - 3 5 1 | J R B | 2 0 1 1 | V o l 1 | N o 5 © F i c u s P u b l i s h e r s . T h i s O p e n A c c e s s a r t i c l e i s g o v e r n e d b y t h e C r e a t i v e C o m m o n s A t t r i b u t i o n L i c e n s e ( h t t p : / / c r e a t i v e c o m m o n s . o r g / l i c e n s e s / b y / 2 . 0 ) , w h i c h g i v e s p e r m i s s i o n f o r u n r e s t r i c t e d u s e , n o n - c o m m e r c i a l , d i s t r i b u t i o n , a n d r e p r o d u c t i o n i n a l l m e d i u m , p r o v i d e d t h e o r i g i n a l w o r k i s p r o p e r l y c i t e d . S u b m i t Y o u r M a n u s c r i p t w w w . f i c u s p u b l i s h e r s . c o m w w w . j r e s e a r c h b i o l o g y . c o m J o u r n a l o f R e s e a r c h i n b i o l o g y A n I n t e r n a t i o n a l O p e n A c c e s s O n l i n e R e s e a r c h J o u r n a l A u t h o r s : M o u r a A S 1 , O l i v e i r a P H G 2 , K l e i n G N 3 , T a n c r e d i N S 4 , S i l v a C A 1 a n d T e i x e i r a A S 1 . I n s t i t u t i o n : 1 . I n s t i t u t o N a c i o n a l d e P e s q u i s a s d a A m a z ô n i a ( I N P A ) , A v e n i d a A n d r é A r a ú j o 2 9 3 6 , 6 9 0 6 0 - 0 0 1 , M a n a u s , A M , B r a s i l . 2 . C e n t r o d e P r e s e r v a ç ã o e P e s q u i s a s d e Q u e l ô n i o s A q u á t i c o s ( C P P Q A ) , B R 1 7 4 , k m 1 0 1 , A M 2 4 0 , k m 7 7 , S / N , 6 9 7 3 6 - 0 0 0 , P r e s i d e n t e F i g u e i r e d o , A M , B r a s i l . 3 . I n s t i t u t o C h i c o M e n d e s d e C o n s e r v a ç ã o d a B i o d i v e r s i d a d e ( I C M B i o ) , R e s e r v a B i o l ó g i c a ( R e b i o ) d o R i o T r o m b e t a s , P r a ç a d a F e i r i n h a , S / N , 6 8 . 2 7 5 - 0 0 0 , P o r t o T r o m b e t a s , P A , B r a s i l . 4 . I n s t i t u t o B r a s i l e i r o d o M e i o A m b i e n t e e d o s R e c u r s o s N a t u r a i s R e n o v á v e i s ( I B A M A ) , A v e n i d a T a p a j ó s , 2 2 6 7 , B a i r r o d o L a g u i n h o , 6 8 0 4 0 - 0 0 0 , S a n t a r é m , P A , B r a s i l . C o r r e s p o n d i n g a u t h o r : T e i x e i r a A S E m a i l : s a t u r n @ i n p a . g o v . b r W e b A d d r e s s : h t t p : / / j r e s e a r c h b i o l o g y . c o m / D o c u m e n t s / R A 0 0 8 2 . p d f . D a t e s : R e c e i v e d : 1 1 A u g 2 0 1 1 / A c c e p t e d : 2 7 A u g 2 0 1 1 / P u b l i s h e d : 1 5 S e p 2 0 1 1 A r t i c l e C i t a t i o n : M o u r a A S , O l i v e i r a P H G , K l e i n G N , T a n c r e d i N S , S i l v a C A a n d T e i x e i r a A S . T e m p o r a l d i s t r i b u t i o n o f t h e t r a n s f e r r i n a l l e l e s ( T f a a n d T f b ) i n A m a z o n t u r t l e ( P o d o c n e m i s e x p a n s a S c h w e i g g e r , 1 8 1 2 ) J o u r n a l o f r e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 1 ) 5 : 3 4 6 - 3 5 1 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y A n I n t e r n a t i o n a l O n l i n e O p e n A c c e s s P u b l i c a t i o n g r o u p O r i g i n a l R e s e a r c h P a p e r

I N T R O D U C T I O N T h e c o m m u n i t y o f A m a z o n a q u a t i c t u r t l e s h a s 1 4 s p e c i e s , o f w h i c h t h e r e p r e s e n t a t i v e s o f t h e g e n u s P o d o c n e m i s a r e e d i b l e , c o m m e r c i a l l y e x p l o i t e d , a n d a c t a s a n i m p o r t a n t s o u r c e o f p r o t e i n f o r l o c a l p e o p l e ( V o g t , 2 0 0 8 ) . T h e P o d o c n e m i s s p e c i e s a r e l i s t e d i n t h e A p p e n d i x I I o f t h e C o n v e n t i o n o n I n t e r n a t i o n a l T r a d e i n E n d a n g e r e d S p e c i e s o f W i l d F a u n a a n d F l o r a ( C I T E S ) , p u b l i s h e d a s A n n e x I I , N o r m a t i v e I n s t r u c t i o n N u m b e r 1 1 / 2 0 0 5 , a v a i l a b l e a t t h e B r a z i l i a n I n s t i t u t e o f t h e E n v i r o n m e n t a n d R e n e w a b l e N a t u r a l R e s o u r c e s ( I B A M A ) . T h e P o d o c n e m i s e x p a n s a ( S c h w e i g g e r , 1 8 1 2 ) k n o w n a s t h e A m a z o n t u r t l e a n d t h e l a r g e s t f r e s h w a t e r t u r t l e o f t h e g e n u s P o d o c n e m i s i n S o u t h A m e r i c a ( A l f i n i t o , 1 9 7 5 ; P r i t c h a r d & T r e b b a u , 1 9 8 4 ) i s n o l o n g e r t h r e a t e n e d ; h o w e v e r , a s i t s t i l l s h o w s l o w r i s k o f e x t i n c t i o n , i t i s c o n s i d e r e d a c o n s e r v a t i o n d e p e n d e n t s p e c i e s a c c o r d i n g t o t h e c r i t e r i a o f t h e I n t e r n a t i o n a l U n i o n f o r C o n s e r v a t i o n o f N a t u r e a n d N a t u r a l R e s o u r c e s ( I U C N ) . O f t h e t h r e e l e v e l s o f b i o d i v e r s i t y c o n s e r v a t i o n r e c o g n i z e d b y t h e I U C N ( b i o l o g i c a l d i v e r s i t y , e c o s y s t e m d i v e r s i t y a n d g e n e t i c d i v e r s i t y ) , t h e g e n e t i c d i v e r s i t y i s t h e r e s u l t o f e v o l u t i o n a r y h i s t o r y o f p o p u l a t i o n s , i n w h i c h a l o s s o f g e n e t i c d i v e r s i t y c a n r e d u c e t h e i r a b i l i t y t o a d a p t i n r e s p o n s e t o e n v i r o n m e n t a l c h a n g e s ( e v o l u t i o n a r y p o t e n t i a l ) ( F r a n k h a m e t a l , 2 0 0 2 ) . R e s e a r c h f o c u s i n g o n t h e p o p u l a t i o n s t r u c t u r e o f P o d o c n e m i s e x p a n s a h a s a l r e a d y b e e n c a r r i e d o u t b y t h e p l a s m a i r o n b i n d i n g p r o t e i n , t r a n s f e r r i n ( T e i x e i r a e t a l , 1 9 9 6 ) , a l l o z y m e s ( B o c k e t a l , 2 0 0 1 ) , m i t o c h o n d r i a l D N A a n d m i c r o s a t e l l i t e s ( S i t e s e t a l , 1 9 9 9 ; P e a r s e e t a l , 2 0 0 6 ) . A n a l y s i s i n v o l v i n g t e m p o r a l v a r i a t i o n s i n a l l e l e f r e q u e n c i e s o f m o l e c u l a r g e n e t i c m a r k e r s c a n b e e x t r e m e l y u s e f u l f o r i n v e s t i g a t i n g g e n e t i c v a r i a b i l i t y , e f f e c t i v e p o p u l a t i o n s i z e ( N e ) , f o u n d e r e f f e c t s a n d p r o c e s s e s a s s o c i a t e d w i t h c o l o n i z a t i o n a n d p o p u l a t i o n - g e n e t i c s t r u c t u r e ( W a p l e s , 1 9 8 9 ; K a m b h a m p a t i e t a l , 1 9 9 0 ; S h i k a n o e t a l , 2 0 0 1 ; W i l l i a m s e t a l , 2 0 0 3 ; J a c q u e m y n e t a l , 2 0 0 6 ; C h e v o l o t e t a l , 2 0 0 8 ; L u c e n t i n i e t a l , 2 0 0 9 ) . H o w e v e r , t h i s t y p e o f s t u d y h a s n e v e r b e e n p e r f o r m e d o n P . e x p a n s a . T h e a i m o f t h i s s t u d y w a s t o e v a l u a t e t h e t e m p o r a l d i s t r i b u t i o n o f t r a n s f e r r i n a l l e l e f r e q u e n c i e s f r o m t h r e e p o p u l a t i o n s a m p l e s o f P . e x p a n s a c o l l e c t e d f r o m t h e R i o U a t u m ã , R i o T r o m b e t a s a n d R i o T a p a j ó s i n t h e A m a z o n B a s i n , B r a z i l . M A T E R I A L A N D M E T H O D S A f t e r o b t a i n i n g l i c e n s e g i v e n b y t h e B r a z i l i a n I n s t i t u t e o f E n v i r o n m e n t a n d R e n e w a b l e N a t u r a l R e s o u r c e s ( I B A M A ) t h r o u g h t h e B i o d i v e r s i t y A u t h o r i z a t i o n a n d I n f o r m a t i o n S y s t e m ( S I S B I O L i c e n s e N o . 1 3 0 8 1 - 1 o f 1 9 / 1 2 / 2 0 0 7 ) , n i n e t y f i v e s p e c i m e n s o f t h e A m a z o n t u r t l e ( P . e x p a n s a ) w e r e c o l l e c t e d f r o m t h r e e g e o g r a p h i c a l a r e a s i n t h e A m a z o n r e g i o n , t o t a l i z i n g t h r e e p o p u l a t i o n s a m p l e s : M a r a c a r a n a , R i o U a t u m ã - A M ( 3 0 ) ; T r o m b e t a s , R i o T r o m b e t a s - P A ( 3 4 ) a n d M o n t e C r i s t o , R i o T a p a j ó s - P A ( 3 1 ) ( T a b l e 1 , F i g . 1 ) . B l o o d s a m p l e s w e r e t a k e n f r o m t h e f e m o r a l a r t e r y a n d p l a c e d i n 5 m l B D v a c u t a i n e r t u b e s , c o n t a i n i n g 0 . 5 m l o f 3 . 8 % s o d i u m c i t r a t e a s a n t i c o a g u l a n t , a n d b l o o d p l a s m a s p e c i m e n s w e r e s e p a r a t e d b y c e n t r i f u g a t i o n a t 3 , 0 0 0 r p m f o r 2 0 m i n u t e s a n d s t o r e d a t - 2 5 º C , u n t i l e l e c t r o p h o r e s i s r u n ( T e i x e i r a e t a l , 1 9 9 6 ) . A r i v a n o l p r e c i p i t a t i o n m e t h o d w a s u s e d f o r i s o l a t i n g p l a s m a t r a n s f e r r i n m o l e c u l e s p r i o r t o s t a r c h g e l e l e c t r o p h o r e s i s ( J a m i e s o n & T u n e r , 1 9 7 8 ) , w i t h m o d i f i c a t i o n s p e r f o r m e d b y T e i x e i r a e t a l . ( 1 9 9 6 ) , w h e r e t h e b l o o d p l a s m a s p e c i m e n s w e r e t r e a t e d w i t h r i v a n o l s o l u t i o n ( 2 % ) a t a r a t i o o f 1 : 1 . F o r d e t e c t i n g t h e 3 4 7 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 1 ) 4 : 3 4 6 - 3 5 1 M o u r a e t a l . , 2 0 1 1 L o c a l i t y a n d p o s i t i o n o f c a t c h S t a g e o f d e v e l o p m e n t D a t e o f c a t c h N u m b e r o f s p e c i m e n s t e s t e d M a r a c a r a n a , R i o U a t u m ã , A M ( 0 2 º 1 3 ’ S ; 5 8 º 1 5 ’ W ) H a t c h l i n g 1 0 . 0 1 . 2 0 0 8 3 0 T r o m b e t a s , R i o T r o m b e t a s , P A ( 0 4 ° 0 4 ’ S ; 5 5 ° 3 8 ’ W ) H a t c h l i n g 0 4 . 0 2 . 2 0 0 8 3 4 M o n t e C r i s t o , R i o T a p a j ó s , P A ( 0 1 ° 2 0 ’ S ; 5 6 ° 4 5 ’ W ) H a t c h l i n g 3 0 . 0 1 . 2 0 0 8 3 1 T o t a l - - 9 5 T a b l e 1 . T h e s a m p l i n g l o c a l i t i e s f r o m w h e r e p o p u l a t i o n s a m p l e s o f t h e A m a z o n t u r t l e ( P . e x p a n s a ) w e r e c a u g h t i n t h e A m a z o n B a s i n .

t r a n s f e r r i n m o l e c u l e s , t h e s t a r c h g e l s w e r e s t a i n e d i n 1 % A m i d o B l a c k f o r f i v e m i n u t e s ( J a m i e s o n & T u n e r , 1 9 7 8 ) . T h e A m i d o B l a c k w a s d i l u t e d i n a s o l u t i o n c o m p o s e d o f w a t e r , m e t h a n o l a n d a c e t i c a c i d ( 5 : 5 : 1 ) , r e s p e c t i v e l y . T h e n t h e g e l s w e r e w a s h e d b y s u c c e s s i v e i m m e r s i o n s i n p l a s t i c c o n t a i n e r s c o n t a i n i n g t h e a b o v e - m e n t i o n e d s o l u t i o n ( w a t e r , m e t h a n o l a n d a c e t i c a c i d ) f o r a p p r o x i m a t e l y 1 5 h o u r s , a n d t h e T f a l l e l e s w e r e i d e n t i f i e d a n d c l a s s i f i e d a c c o r d i n g t o T e i x e i r a e t a l . ( 1 9 9 6 ) . A t t h e e n d o f t h e e x p e r i m e n t s a l l t h e a n i m a l s w e r e r e t u r n e d t o t h e i r r e s p e c t i v e c o l l e c t i o n s i t e s . C h i - s q u a r e ( x 2 ) a n d m a x i m u m l o g - l i k e l i h o o d ( G ) t e s t s f o r g e n e t i c b a l a n c e a s s u m i n g H a r d y - W e i n b e r g e q u i l i b r i u m w e r e a p p l i e d t o c o m p a r e t h e o b s e r v e d a n d e x p e c t e d n u m b e r s o f t r a n s f e r r i n g e n o t y p e s w i t h i n a n d a m o n g t h e A m a z o n t u r t l e p o p u l a t i o n s a m p l e s e x a m i n e d . M o r e o v e r , c h i - s q u a r e c o n t i n g e n c y t e s t s w e r e a p p l i e d o n t h e o v e r a l l t r a n s f e r r i n a l l e l e d i s t r i b u t i o n s t o c o m p a r e t h e p o p u l a t i o n s a m p l e s t e s t e d i n t h i s s t u d y w i t h t h o s e t e s t e d p r e v i o u s l y b y T e i x e i r a e t a l . ( 1 9 9 6 ) . R E S U L T S A N D D I S C U S S I O N T h e t r a n s f e r r i n g e n e l o c u s ( T f ) o f P . e x p a n s a p o p u l a t i o n s a m p l e s ( U a t u m ã , T r o m b e t a s a n d T a p a j ó s ) , w h i c h w a s a n a l y z e d b y s t a r c h g e l e l e c t r o p h o r e s i s , s h o w e d a d i a l l e l i c p o l y m o r p h i s m w i t h t h e p r e s e n c e o f t h e g e n o t y p e s ( T f a a , T f a b a n d T f b b ) t h e o r e t i c a l l y e x p e c t e d , p r e s u m a b l y e n c o d e d b y c o d o m i n a n t a l l e l e s ( T f a a n d T f b ) ( F i g . 2 ) . A g o o d g e n e t i c b a l a n c e w i t h i n a n d a m o n g a l l t h e p o p u l a t i o n s a m p l e s w a s n o t i c e d ( T a b l e 2 ) . T h e p r e s e n t f i n d i n g s a r e i n a c c o r d a n c e w i t h t h e p r e v i o u s r e p o r t J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 1 ) 4 : 3 4 6 - 3 5 1 3 4 8 M o u r a e t a l . , 2 0 1 1 F i g . 1 . M a p o f t h e a p p r o x i m a t e l o c a t i o n s f r o m w h i c h t h e p o p u l a t i o n s a m p l e s o f P . e x p a n s a , w e r e c a p t u r e d f r o m t h e A m a z o n r e g i o n : M a r a c a r a n a , R i o U a t u m ã ( 1 ) ; T r o m b e t a s , R i o T r o m b e t a s ( 2 ) a n d M o n t e C r i s t o , R i o T a p a j ó s ( 3 ) . M a p m o d i f i e d f r o m T e i x e i r a e t a l . ( 1 9 9 6 ) .

o f T e i x e i r a e t a l . ( 1 9 9 6 ) , w h o s e d a t a w e r e c o n s i s t e n t w i t h a f r e e f l o w o f g e n e s a m o n g t h e p o p u l a t i o n s a m p l e s , s u p p o r t i n g t h e h y p o t h e s i s o f a s i n g l e s t o c k o f P . e x p a n s a i n t h e g e o g r a p h i c a r e a e x a m i n e d . C o n t i n g e n c y t e s t s r e v e a l e d n o t e m p o r a l v a r i a t i o n o n t h e o v e r a l l T f a l l e l e d i s t r i b u t i o n s i n t h e p o p u l a t i o n s s a m p l e s o f P . e x p a n s a i n t h e s u r v e y e d a r e a s , w h e n t h e p r e s e n t d a t a w e r e c o m p a r e d w i t h t h o s e p r e v i o u s l y r e p o r t e d b y T e i x e i r a e t a l . ( 1 9 9 6 ) o v e r a p e r i o d o f 1 6 t o 2 4 y e a r s a g o ( T a b l e 3 ) . A l t h o u g h t h e p o p u l a t i o n s a m p l e s o f P . e x p a n s a d u r i n g t h i s t i m e h a v e b e e n s u f f e r i n g s o m e d e g r e e o f p r e d a t i o n f o r m a i n t e n a n c e a n d / o r c o m m e r c i a l i z a t i o n ( A l h o , 1 9 8 5 ; A l v e s & S a n t a n a , 2 0 0 8 ) , t h e l o c u s T f h a s p r e s e r v e d i t s i n t e g r i t y f o r a b o u t t w o g e n e r a t i o n s , s i n c e , a c c o r d i n g t o V o g t ( 2 0 0 8 ) t h i s s p e c i e s t a k e s e i g h t t o 1 2 y e a r s t o r e a c h i t s r e p r o d u c t i v e m a t u r i t y . T h i s m e a n s t h a t i n t h e o r y , d u r i n g t h i s i n t e r v a l o f t i m e ( t w o g e n e r a t i o n s ) , n e i t h e r t h e a n t h r o p o g e n i c a c t i o n m e n t i o n e d a b o v e , n o r t h e e v o l u t i o n a r y p r o c e s s e s t h a t n o r m a l l y c o n t r i b u t e t o c h a n g e t h e g e n e t i c c o m p o s i t i o n o f p o p u l a t i o n s : m u t a t i o n , m i g r a t i o n , g e n e t i c d r i f t , n a t u r a l s e l e c t i o n , a m o n g o t h e r s ( A y a l a & K i g e r , 1 9 8 0 ; H a r t l , 2 0 0 8 ) w e r e s u f f i c i e n t t o c a u s e s i g n i f i c a n t c h a n g e s a t t h e l o c u s T f i n P . e x p a n s a . A p p a r e n t l y c o n s e r v a t i o n p r o g r a m s o f t h e A m a z o n t u r t l e a r e c o n t r i b u t i n g t o m a i n t a i n i n g t h e g e n e t i c v a r i a b i l i t y o f i t s n a t u r a l p o p u l a t i o n s o v e r t i m e , a t l e a s t f o r t h e T f l o c u s . R o u t i n e a n a l y s i s w i t h h i s t o r i c a l s e r i e s o f m o l e c u l a r g e n e t i c m a r k e r s e x a m i n e d s o f a r i n P . e x p a n s a , s u c h a s , t r a n s f e r r i n ( T f ) ( T e i x e i r a e t a l , 1 9 9 6 ) , a l l o z y m e s ( B o c k e t a l , 2 0 0 1 ) , n u c l e a r a n d m i t o c h o n d r i a l D N A ( S i t e s e t a l , 1 9 9 9 ; P e a r s e e t a l , 2 0 0 6 ) w i l l s e r v e a s a n e f f e c t i v e t o o l i n o b t a i n i n g i n f o r m a t i o n a b o u t t h e g e n e t i c c o m p o s i t i o n o f i t s n a t u r a l s t o c k s . T h i s k i n d o f a p p r o a c h i s v e r y 3 4 9 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 1 ) 4 : 3 4 6 - 3 5 1 M o u r a e t a l . , 2 0 1 1 P o p u l a t i o n s a m p l e s t e s t e d R i o U a t u m ã N = 3 0 R i o T r o m b e t a s N = 3 4 R i o T a p a j ó s N = 3 1 T o t a l N = 9 5 T f g e n o t y p e s T f a a 1 6 ( 1 6 . 0 3 3 9 ) 2 2 ( 2 2 . 1 6 4 2 ) 2 0 ( 1 9 . 2 7 8 7 ) 5 8 ( 5 7 . 5 5 5 6 ) T f a b 1 2 ( 1 1 . 9 3 2 2 ) 1 1 ( 1 0 . 6 7 1 6 ) 9 ( 1 0 . 4 4 2 6 ) 3 2 ( 3 2 . 8 8 8 9 ) T f b b 2 ( 2 . 0 3 3 9 ) 1 ( 1 . 1 6 4 2 ) 2 ( 1 . 2 7 8 7 ) 5 ( 4 . 5 5 5 6 ) T f a l l e l e f r e q u e n c i e s T f a 0 . 7 3 3 3 0 . 8 0 8 8 0 . 7 9 0 3 0 . 7 7 8 9 T f b 0 . 2 6 6 7 0 . 1 9 1 2 0 . 2 0 9 7 0 . 2 2 1 1 H a r d y - W e i n b e r g t e s t d . f . 1 1 1 1 x 2 0 . 0 0 1 0 2 2 0 . 0 3 4 5 0 . 6 3 3 2 0 . 0 7 0 8 P 0 . 9 7 4 5 0 . 8 5 2 7 0 . 4 2 6 2 0 . 7 9 0 2 G 0 . 0 0 1 0 2 4 0 . 0 3 5 5 0 . 5 8 2 4 0 . 0 6 9 7 P 0 . 9 7 4 5 0 . 8 5 0 4 0 . 4 4 5 4 0 . 7 9 1 8 T a b l e 2 . T h e g e n o t y p e s a n d t r a n s f e r r i n a l l e l e f r e q u e n c y d i s t r i b u t i o n s i n t h r e e p o p u l a t i o n s a m p l e s o f A m a z o n t u r t l e ( P . e x p a n s a ) . C h i - s q u a r e ( x 2 ) a n d m a x i m u m l o g - l i k e l i h o o d ( G ) s t a t i s t i c a l v a l u e s a s s u m i n g H a r d y - W e i n b e r g e q u i l i b r i u m a r e s h o w n . T h e o b s e r v e d n u m b e r s i n e a c h t r a n s f e r r i n g e n o t y p e s h o w e d g o o d a g r e e m e n t w i t h e x p e c t e d n u m b e r s s h o w n i n b r a c k e t s . T f a T f b F i g . 2 . E l e c t r o p h o r e g r a m o f T f l o c u s i n P . e x p a n s a . T h e g e n o t y p e s a r e : l a n e s 1 a n d 5 ( T f a a ) ; l a n e s 2 , 4 a n d 6 ( T f a b ) a n d l a n e 3 ( T f b b ) . T f a T f b