J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y F e a s i b l e u s e o f r o c k o y s t e r ( C r a s s o s t r e a c o m m e r c i a l i s ) a n d s e a w e e d s ( G r a c i l a r i a s a l i c o r n i a a n d C a u l e r p a l e n t i l l i f e ) a s b i o f i l t e r i n a l a b o r a t o r y - s c a l e c l o s e d r e c i r c u l a t i n g s y s t e m f o r j u v e n i l e s s p o t t e d b a b y l o n ( B a b y l o n i a a r e o l a t a ) K e y w o r d s : S e a w e e d , b i o f i l t e r , r e c i r c u l a t i n g c u l t u r e , w a t e r q u a l i t y , G r a c i l a r i a s a l i c o r n i a , C a u l e r p a l e n t i l l i f e r a , B a b y l o n i a a r e o l a t a . A B S T R A C T : T h i s s t u d y w a s c o n d u c t e d t o a s s e s s t h e f e a s i b l e u s e o f r o c k o y s t e r ( C r a s s o s t r e a c o m m e r c i a l i s ) i n b i o f i l t r a t i o n a n d t w o s e a w e e d s ( G r a c i l a r i a s a l i c o r n i a a n d C a u l e r p a l e n t i l l i f e ) a s n u t r i e n t a b s o r b a n t i n a l a b o r a t o r y - s c a l e r e c i r c u l a t i n g s y s t e m f o r g r o w i n g o f j u v e n i l e s s p o t t e d b a b y l o n ( B a b y l o n i a a r e o l a t a ) . T h e e x p e r i m e n t w a s c a r r i e d o u t i n t r i p l i c a t e s o v e r a p e r i o d o f 9 0 d a y s . T h e e x p e r i m e n t w a s a c o m p l e t e r a n d o m i z e d d e s i g n w i t h t h r e e g r o w t h t r i a l s : T r e a t m e n t s 1 : w i t h o u t o y s t e r a n d s e a w e e d b i o f i l t e r u s e d a s a c o n t r o l ; T r e a t m e n t 2 : O y s t e r b i o f i l t r a t i o n ( 1 , 5 0 0 g p e r t a n k ) a n d s e a w e e d ( G . s a l i c o r n i a ) a b s o r p t i o n ( 2 5 0 g p e r t a n k ) ; a n d T r e a t m e n t 3 : O y s t e r b i o f i l t r a t i o n ( 1 , 5 0 0 g p e r t a n k ) a n d s e a w e e d ( C . l e n t i l l i f e ) a b s o r p t i o n ( 2 5 0 g p e r t a n k ) . N o s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s ( P > 0 . 0 5 ) i n f i n a l s h e l l l e n g t h , f i n a l b o d y w e i g h t , b o d y w e i g h t g a i n s , s h e l l l e n g t h i n c r e m e n t a n d g r o w t h r a t e a m o n g a l l t r e a t m e n t s . G r o w t h r a t e i n s h e l l l e n g t h a n d b o d y w e i g h t o f s p o t t e d b a b y l o n r a n g e d f r o m 0 . 3 3 0 . 3 4 c m m o - 1 a n d 0 . 6 2 0 . 6 7 g m o - 1 , r e s p e c t i v e l y . S i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s ( P < 0 . 0 5 ) i n f i n a l s u r v i v a l r a t e o f s p o t t e d b a b y l o n w e r e f o u n d a m o n g t r e a t m e n t s , r a n g i n g f r o m 8 6 . 7 2 t o 8 6 . 9 8 % c o m p a r e d w i t h t h o s e o f t h e c o n t r o l ( 8 4 . 2 7 % ) . T h e r e w e r e n o s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s ( P > 0 . 0 5 ) i n w a t e r t e m p e r a t u r e , s a l i n i t y , p H , d i s s o l v e d o x y g e n , a m m o n i a - n i t r o g e n , n i t r i t e - n i t r o g e n , n i t r a t e - n i t r o g e n a n d p h o s p h a t e - p h o s p h o r u s a m o n g t h e g r o w t h t r i a l s b u t n o t f o r a l k a l i n i t y . T h i s s t u d y c a n c o n c l u d e t h a t G . s a l i c o r n i a n d C . l e n t i l l i f e r a c a n b e u s e d a s n u t r i e n t b i o f i l t e r f o r r e g u l a t i n g o f w a t e r q u a l i t y i n a c l o s e d r e c i r c u l a t i n g s y s t e m f o r g r o w i n g j u v e n i l e s s p o t t e d b a b y l o n b u t n o t s u i t a b l e o n u s i n g o y s t e r . 3 7 0 - 3 7 5 | J R B | 2 0 1 1 | V o l 1 | N o 5 © F i c u s P u b l i s h e r s . T h i s O p e n A c c e s s a r t i c l e i s g o v e r n e d b y t h e C r e a t i v e C o m m o n s A t t r i b u t i o n L i c e n s e ( h t t p : / / c r e a t i v e c o m m o n s . o r g / l i c e n s e s / b y / 2 . 0 ) , w h i c h g i v e s p e r m i s s i o n f o r u n r e s t r i c t e d u s e , n o n - c o m m e r c i a l , d i s t r i b u t i o n , a n d r e p r o d u c t i o n i n a l l m e d i u m , p r o v i d e d t h e o r i g i n a l w o r k i s p r o p e r l y c i t e d . S u b m i t Y o u r M a n u s c r i p t w w w . f i c u s p u b l i s h e r s . c o m w w w . j r e s e a r c h b i o l o g y . c o m J o u r n a l o f R e s e a r c h i n b i o l o g y A n I n t e r n a t i o n a l O p e n A c c e s s O n l i n e R e s e a r c h J o u r n a l A u t h o r s : N i l n a j C h a i t a n a w i s u t i 1 , W a n n a n e e S a n t h a w e e s u k 1 , S i r u s a K r i t s a n a p u n t u 2 I n s t i t u t i o n : 1 . A q u a t i c R e s o u r c e s R e s e a r c h I n s t i t u t e , C h u l a l o n g k o r n U n i v e r s i t y , P h y a T h a i R o a d , B a n g k o k , T h a i l a n d 1 0 3 3 0 . 2 . F a c u l t y o f S c i e n c e a n d I n d u s t r i a l T e c h n o l o g y , P r i n c e o f S o n g k l a U n i v e r s i t y , S u r a t t a n i p r o v i n c e , T h a i l a n d 8 4 1 0 0 . C o r r e s p o n d i n g a u t h o r : N i l n a j C h a i t a n a w i s u t i E m a i l : n i l n a j c 1 @ h o t m a i l . c o m ; s a e n i s a 4 7 9 @ h o t m a i l . c o m ; w a n n a n e e 2 9 5 @ h o t m a i l . c o m W e b A d d r e s s : h t t p : / / j r e s e a r c h b i o l o g y . c o m / D o c u m e n t s / R A 0 0 7 8 . p d f . D a t e s : R e c e i v e d : 1 1 A u g 2 0 1 1 / A c c e p t e d : 2 7 A u g 2 0 1 1 / P u b l i s h e d : 2 3 S e p 2 0 1 1 A r t i c l e C i t a t i o n : N i l n a j C h a i t a n a w i s u t i , W a n n a n e e S a n t h a w e e s u k , S i r u s a K r i t s a n a p u n t u . F e a s i b l e u s e o f r o c k o y s t e r ( C r a s s o s t r e a c o m m e r c i a l i s ) a n d s e a w e e d s ( G r a c i l a r i a s a l i c o r n i a a n d C a u l e r p a l e n t i l l i f e ) a s b i o f i l t e r i n a l a b o r a t o r y - s c a l e c l o s e d r e c i r c u l a t i n g s y s t e m f o r j u v e n i l e s s p o t t e d b a b y l o n ( B a b y l o n i a a r e o l a t a ) . J o u r n a l o f r e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 1 ) 5 : 3 7 0 - 3 7 5 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y A n I n t e r n a t i o n a l O n l i n e O p e n A c c e s s P u b l i c a t i o n g r o u p O r i g i n a l R e s e a r c h P a p e r

I N T R O D U C T I O N : C o m m e r c i a l g r o w i n g o f j u v e n i l e s s p o t t e d b a b y l o n , B a b y l o n i a a r e o l a t a , i n T h a i l a n d a r e c u l t i v a t e d u n d e r t h e f l o w - t h r o u g h s e a w a t e r s y s t e m . T h i s t y p e o f c u l t u r e n e e d s a b o u t 1 0 0 % w a t e r e x c h a n g e p e r d a y t o m a i n t a i n w a t e r q u a l i t y a n d a l s o h a d s o m e c r i t i c i s m r e g a r d i n g i t s e n v i r o n m e n t a l i m p a c t d u e t o i t s t e n d e n c y t o r e l e a s e w a s t e e f f l u e n t s c o n t a i n i n g e l e v a t e d l e v e l s o f n i t r o g e n o r p h o s p h o r u s r i c h c o m p o u n d s w h i c h m a y b e c o n s i d e r e d a s w a t e r p o l l u t a n t s . O n e o f t h e m a i n d r a w b a c k s o f s p o t t e d b a b y l o n c u l t u r e l i e s i n t h e w a s t e s d e r i v e d f r o m f e e d a n d t h e i r m e t a b o l i c p r o d u c t s . T h e m a i n p r o d u c t s a r e u n e a t e n f o o d , f a e c e s a n d e x c r e t e d d i s s o l v e d i n o r g a n i c n u t r i e n t s w h i c h a r e t r a n s p o r t e d i n t h e w a t e r a t v a r i o u s c o n c e n t r a t i o n s ( C h a i t a n a w i s u t i , K r i s a n a p u n t u a n d N a t s u k a r i 2 0 0 5 ) . M a n y v a l u a b l e m a r i n e s p e c i e s c a n b e s u c c e s s f u l l y g r o w n a n d h a v e h i g h g r o w t h a n d s u r v i v a l r a t e s i n r e c i r c u l a t i n g a q u a c u l t u r e s y s t e m ( R A S ) d u e t o t h e h i g h - q u a l i t y c u l t u r e w a t e r . W a t e r r e u s e m e t h o d s r e q u i r e m a i n t a i n i n g g o o d w a t e r q u a l i t y w i t h a s y s t e m t h a t e a s i l y o p e r a t e d a t a l o w c o s t . R A S h a v e a t t r a c t i v e m u c h a t t e n t i o n b e c a u s e t h e y c o n s u m e l e s s w a t e r t h a n f l o w - t h r o u g h s y s t e m s a n d a l s o r e d u c e w a t e r e x c h a n g e r a t e s . T h e r e f o r e , R A S i s b i o l o g i c a l l y a n d t e c h n i c a l l y f e a s i b l e a n d s e c o n d l y t h a t i t w i l l p r o d u c e w o r t h w h i l e i n c o m e t o t h e p r o d u c e r s . I t h a s b e e n u s e d e x t e n s i v e l y f o r r e a r i n g a n d m a i n t a i n i n g a d u l t a n d j u v e n i l e m a r i n e s p e c i e s . P a g a n d e t a l . ( 2 0 0 0 ) r e p o r t e d t h a t t h e u s e o f r e c i r c u l a t i n g w a t e r s y s t e m s i s o n e a p p r o a c h u s e d t o l i m i t t h e i m p a c t o f a q u a c u l t u r e o n t h e a q u a t i c e n v i r o n m e n t . A l t h o u g h t h e t o t a l q u a n t i t y o f n u t r i e n t s r e l e a s e d i s s i m i l a r i n o p e n a n d r e c i r c u l a t i n g s y s t e m s , t h e s m a l l v o l u m e s o f c o n c e n t r a t e d e f f l u e n t s t h a t a r e p r o d u c e d s h o u l d b e e a s i e r t o d e a l w i t h , a l t h o u g h p r o p e r t e c h n i c a l a n d e c o n o m i c a l s o l u t i o n s h a v e t o b e i m p l e m e n t e d . T h e u s e o f s e a w e e d s f o r t h e t r e a t m e n t o f m a r i n e a q u a c u l t u r e w a s t e s h a s b e e n p r o p o s e d b y a n u m b e r o f a u t h o r s s i n c e m a r i n e s e a w e e d s h a v e h i g h c a p a c i t i e s f o r a b s o r p t i o n a n d m e t a b o l i s m o f N a n d P r i c h c o m p o u n d e x c r e t e d b y m a r i n e a n i m a l s . I n a d d i t i o n t o i m p r o v i n g t h e w a t e r q u a l i t y , s e a w e e d s c a n p r o v i d e a n a d d i t i o n a l s o u r c e o f i n c o m e f r o m a v a l u a b l e b y - p r o d u c t i n t h e p r o c e s s . J o n e s , D e n n i s o n & P r e s t o n ( 2 0 0 1 ) s u g g e s t e d t h a t n u t r i e n t r e m o v a l e f f i c i e n c y o f m a c r o a l g a e m a y b e i m p r o v e d w i t h i n c r e a s e d l i g h t , p a r t i c u l a r l y f o r n i t r a t e u p t a k e , i n c r e a s e d w a t e r f l o w t o r e d u c e t h e b o u n d a r y l a y e r , a n d h i g h e r s t o c k i n g d e n s i t i e s . T h e s p e c i a l i n t e r e s t i s t h e u s e o f s e a w e e d s f o r r e c y c l i n g s o m e d i s s o l v e d n u t r i e n t s , i n p a r t i c u l a r l y n i t r o g e n i n t h e t e r m o f a m m o n i a ( B u s c h m a n n 1 9 9 6 , N e o r i e t a l . 1 9 9 6 , C h o w e t a l . 2 0 0 1 , H e r n a n d e z e t a l . 2 0 0 2 , M a t i n e z - A r a g o n e t a l . 2 0 0 2 , M s u y a e t a l . 2 0 0 6 ) . T h u s , w e h a v e d e v e l o p e d a s i m p l e r r e c i r c u l a t i n g s y s t e m f o r t h e p r o d u c t i o n o f j u v e n i l e s p o t t e d b a b y l o n a v a i l a b l e u s e f o r c o m m e r c i a l a p p l i c a t i o n s . T h i s s t u d y w a s c o n d u c t e d t o a s s e s s t h e c a p a b l e u s e o f r o c k o y s t e r ( C r a s s o s t r e a c o m m e r c i a l i s ) a s b i o f i l t r a t i o n a n d t w o s e a w e e d s ( G r a c i l a r i a s a l i c o r n i a a n d C a u l e r p a l e n t i l l i f e ) a s n u t r i e n t a b s o r p t i o n i n a l a b o r a t o r y - s c a l e c l o s e d r e c i r c u l a t i n g s y s t e m f o r g r o w i n g o f j u v e n i l e s s p o t t e d b a b y l o n ( B a b y l o n i a a r e o l a t a ) M A T E R I A L S A N D M E T H O D S T h i s s t u d y w a s c o n d u c t e d a t t h e S p o t t e d B a b y l o n A q u a c u l t u r e R e s e a r c h U n i t , A q u a t i c R e s o u r c e s R e s e a r c h I n s t i t u t e , C h u l a l o n g k o r n U n i v e r s i t y , P e t c h a b u r i p r o v i n c e , T h a i l a n d . T h e l a b o r a t o r y e x p e r i m e n t w a s d e s i g n e d t o t e s t t h e u s e o f r o c k o y s t e r ( C . c o m m e r c i a l i s ) a n d s e a w e e d s ( G . s a l i c o r n i a a n d C . l e n t i l l i f e ) a s b i o f i l t e r i n a l a b o r a t o r y - s c a l e c l o s e d r e c i r c u l a t i n g s y s t e m f o r g r o w i n g j u v e n i l e s s p o t t e d b a b y l o n ( B . a r e o l a t a ) . T h e e x p e r i m e n t w a s a c o m p l e t e r a n d o m i z e d d e s i g n w i t h t h r e e r e p l i c a t i o n s a s f o l l o w i n g : T r e a t m e n t 1 : W i t h o u t o y s t e r a n d s e a w e e d b i o f i l t e r u s e d a s a c o n t r o l ; T r e a t m e n t 2 : O y s t e r b i o f i l t r a t i o n ( 1 , 5 0 0 g p e r t a n k ) a n d s e a w e e d ( G . s a l i c o r n i a ) a b s o r p t i o n ( 2 5 0 g p e r t a n k ) ; a n d T r e a t m e n t 3 : O y s t e r b i o f i l t r a t i o n ( 1 , 5 0 0 g p e r t a n k ) a n d s e a w e e d ( C . l e n t i l l i f e ) a b s o r p t i o n ( 2 5 0 g p e r t a n k ) . E a c h e x p e r i m e n t a l u n i t w a s d e s i g n e d a s a n i n d e p e n d e n t c l o s e d - r e c i r c u l a t i n g s y s t e m c o n s i s t i n g o f a r e a r i n g t a n k , a n o y s t e r f i l t r a t i o n t a n k a n d a s e a w e e d a b s o r p t i o n t a n k . C y l i n d r i c a l p l a s t i c t a n k s o f 3 0 0 l c a p a c i t y w e r e u s e d f o r e a c h t a n k o f t h e r e c i r c u l a t i n g u n i t . T h e b o t t o m a r e a o f t h e r e a r i n g t a n k w a s 0 . 7 8 m 2 a n d w a s c o v e r e d w i t h a 5 c m l a y e r o f c o a r s e s a n d ( 0 . 5 1 . 0 m e a n g r a i n s i z e ) t o s e r v e a s a s u b s t r a t e . T h e s e a w e e d a b s o r p t i o n t a n k c o n t a i n e d o n e o f t h e m a r i n e s e a w e e d s a s a b i o f i l t e r . A l l e x p e r i m e n t a l u n i t s w e r e l o c a t e d i n a n i n d o o r h a t c h e r y , b u t t h e r o o f o v e r a l l s e a w e e d a b s o r p t i o n t a n k s w a s t r a n s p a r e n t a n d p e r m i t t e d a b o u t 8 0 % o f s u n l i g h t t o p a s s t h u s e n a b l i n g s e a w e e d p h o t o s y n t h e s i s . S e a w a t e r w a s p u m p e d f r o m a n e a r t h e n p o n d , f i l t e r e d m e c h a n i c a l l y , a n d c i r c u l a t e d t h r o u g h t h e e x p e r i m e n t a l u n i t . T h e w a t e r d e p t h i n a l l t a n k s w a s 3 0 c m . W a t e r f l o w e d f r o m t h e b i o f i l t e r t a n k t h r o u g h t h e r e a r i n g t a n k a n d w a s m a i n t a i n e d i n a s m a l l s u b m e r s i b l e p u m p a t a 3 7 1 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 1 ) 5 : 3 7 0 - 3 7 5 C h a i t a n a w i s u t i e t a l . , 2 0 1 1

c o n s t a n t f l o w r a t e o f 5 3 0 l h - 1 b e f o r e i t w a s r e t u r n e d t o t h e r e a r i n g t a n k . N o s e a w a t e r w a s e x c h a n g e d t h r o u g h o u t t h e e x p e r i m e n t a l p e r i o d o f 9 0 d a y s . T h e t a n k s w e r e m o d e r a t e l y a e r a t e d b y a i r d i f f u s e r s p l a c e d a t t h e b o t t o m o f e a c h t a n k . W a t e r t e m p e r a t u r e w a s m a i n t a i n e d a t r o o m t e m p e r a t u r e ± 1 . 5 o C . S a l i n i t y w a s m o n i t o r e d d a i l y , a s n e c e s s a r y , t o k e e p t h e v a r i a t i o n w i t h i n ± 1 . 0 p p t b y a d d i t i o n o f f r e s h w a t e r t o c o r r e c t f o r a n y i n c r e a s e d s a l i n i t y d u e t o w a t e r e v a p o r a t i o n . P h o t o p e r i o d w a s a n a t u r a l 1 2 l : 1 2 d a y : n i g h t . J u v e n i l e s p o t t e d b a b y l o n s , B . a r e o l a t a , u s e d i n g r o w t h a n d s u r v i v a l e x p e r i m e n t s w e r e p r o d u c e d a t a p r i v a t e h a t c h e r y i n R a y o n g p r o v i n c e , l o c a t e d o n t h e e a s t e r n c o a s t o f t h e G u l f o f T h a i l a n d . I n d i v i d u a l s f r o m t h e s a m e c o h o r t w e r e s o r t e d b y s i z e t o p r e v e n t p o s s i b l e g r o w t h r e t a r d a t i o n o f s m a l l s p o t t e d b a b y l o n s w h e n c u l t u r e d w i t h l a r g e r o n e s . T h e i r i n i t i a l s h e l l l e n g t h a n d w h o l e b o d y w e i g h t a v e r a g e d 1 . 2 3 ± 0 . 0 0 5 c m a n d 0 . 3 7 ± 0 . 0 1 g , n = 3 0 , r e s p e c t i v e l y . M e a n s h e l l l e n g t h s a n d b o d y w e i g h t s u s e d i n e a c h t r e a t m e n t w e r e n o t s t a t i s t i c a l l y d i f f e r e n t , a n d h e n c e , t r e a t m e n t s c o u l d b e c o m p a r e d s t a t i s t i c a l l y . J u v e n i l e s w e r e h e l d i n t h e e x p e r i m e n t a l r e a r i n g t a n k s a t a s t o c k i n g d e n s i t y o f 3 0 0 i n d i v i d u a l m - 2 o r 1 9 2 s n a i l s p e r t a n k . T h e r o c k o y s t e r C r a s s o s t r e a c o m m e r c i a l i s w i t h a v e r a g e b o d y w e i g h t o f 4 . 0 - 1 0 . 0 g w e r e c o l l e c t e d f r o m t h e o y s t e r f a r m a t A n g - s i l a , C h o l b u r i p r o v i n c e . T w o s e a w e e d s G r a c i l a r i a s a l i c o r n i a a n d C a u l e r p a l e n t i l l i f e r a w e r e u s e d a s b i o f i l t e r s . T h e f i r s t w a s c o l l e c t e d f r o m i n t e r t i d a l p o o l s a l o n g t h e c o a s t a l w a t e r o f S a m u i I s l a n d , S u r a t t a n i p r o v i n c e , a n d t h e l a t t e r w a s c o l l e c t e d f r o m b r o o d s t o c k - r e a r i n g p o n d s o f a n i n t e n s i v e s h r i m p f a r m . O y s t e r s a n d s e a w e e d s w e r e p l a c e d i n a p l a s t i c b a s k e t o f 2 5 . 0 x 3 5 . 0 x 2 5 . 0 c m w h i c h c o n t a i n e d n u m e r o u s p o r e s o f 1 . 5 c m 2 ( 4 h o l e s c m - 2 ) a t e a c h s i d e a n d w e r e s u s p e n d e d 3 0 c m a b o v e t h e b o t t o m o f b i o f i l t e r t a n k s . O y s t e r a n d s e a w e e d s i n a l l t a n k s w e r e n o t h a r v e s t e d t h r o u g h o u t t h e e x p e r i m e n t s . T h e s n a i l s w e r e f e d a d l i b i t u m w i t h f r e s h t r a s h f i s h o n c e d a i l y a t 1 0 : 0 0 h . T h e a m o u n t o f f o o d c o n s u m e d w a s r e c o r d e d d a i l y , a n d u n e a t e n f o o d w a s r e m o v e d i m m e d i a t e l y a f t e r t h e a n i m a l s s t o p p e d f e e d i n g a n d a i r d r i e d f o r a p e r i o d o f 1 0 m i n b e f o r e w e i g h i n g . S i z e g r a d i n g o f s n a i l s i n a l l t r e a t m e n t s w a s n o t d o n e t h r o u g h o u t t h e g r o w - o u t p e r i o d . N o c h e m i c a l a n d a n t i b i o t i c a g e n t s w e r e u s e d t h r o u g h o u t t h e e n t i r e e x p e r i m e n t a l p e r i o d . T o d e t e r m i n e g r o w t h p e r f o r m a n c e , 5 0 % o f s n a i l s w e r e s a m p l e d r a n d o m l y f r o m e a c h t r e a t m e n t a t 1 5 d a y s i n t e r v a l s , a n d s h e l l l e n g t h a n d w h o l e b o d y w e i g h t w e r e d e t e r m i n e d . S h e l l l e n g t h w a s m e a s u r e d w i t h c a l i p e r s t o t h e n e a r e s t m i l l i m e t r e f r o m t h e m a x i m u m a n t e r i o r t o p o s t e r i o r d i s t a n c e o f a s h e l l , a n d t h e w h o l e w e i g h t w a s m e a s u r e d a f t e r a i r d r y i n g f o r a p e r i o d o f 1 0 m i n b e f o r e w e i g h i n g a n d t h e n r e t u r n e d t o t h e t a n k . T h e n u m b e r o f d e a d i n d i v i d u a l s w a s r e c o r d e d a t 1 5 - d a y i n t e r v a l s . S e a w e e d s f r o m e a c h t a n k w e r e a l s o w e i g h e d t o d e t e r m i n e t h e i n c r e a s e i n b i o m a s s , a n d s p e c i f i c g r o w t h r a t e s w e r e c a l c u l a t e d a t 1 5 - d a y i n t e r v a l s . S e a w e e d s w e r e p l a c e d i n a p l a s t i c b a s k e t t o d r a i n o f f e x c e s s w a t e r . V i s i b l e e p i p h y t e s w e r e c a r e f u l l y r e m o v e d . T h e e x p e r i m e n t w a s t e r m i n a t e d a f t e r a 9 0 d a y s d u r i n g M a y t o J u n e , 2 0 0 9 . A v e r a g e s h e l l l e n g t h i n c r e m e n t s , b o d y w e i g h t g a i n s a n d g r o w t h r a t e s w e r e c a l c u l a t e d a f t e r t h e m e t h o d o f C h a i t a n a w i s u t i a n d K r i t s a n a p u n t u 1 9 9 9 ) . B o d y w e i g h t g a i n s ( B W f - B W i ) , a n d m o n t h l y g r o w t h r a t e s f o r b o d y w e i g h t ( B W f - B W i ) / T ) w e r e c a l c u l a t e d , i n w h i c h B W f = m e a n f i n a l b o d y w e i g h t , B W i = i n i t i a l b o d y w e i g h t , a n d T = t i m e i n m o n t h s . T h e s p e c i f i c g r o w t h r a t e ( S G R , % d a y - 1 ) = 1 0 0 9 [ l n ( f i n a l w e i g h t , g ) - l n ( i n i t i a l w e i g h t , g ) / ( c u l t u r e p e r i o d , d a y s ) . M o r t a l i t y , e x p r e s s e d a s t h e p e r c e n t a g e o f t h e i n i t i a l s t o c k i n g d e n s i t y , w a s c a l c u l a t e d f r o m t h e d i f f e r e n c e b e t w e e n t h e n u m b e r o f s n a i l s s t o c k e d a n d h a r v e s t e d . T h e f o l l o w i n g s e a w a t e r q u a l i t y p a r a m e t e r s i n e a c h r e a r i n g t a n k w e r e a n a l y s e d w e e k l y : w a t e r t e m p e r a t u r e ( H g t h e r m o m e t e r ) , s a l i n i t y ( p o r t a b l e m u l t i p a r a m e t e r m e t r e m o d e l Y S I # 6 3 ) , c o n d u c t i v i t y ( p o r t a b l e m u l t i p a r a m e t e r m e t r e m o d e l Y S I # 6 3 ) , p H ( p H m e t r e ) , t o t a l a l k a l i n i t y ( p h e n o l p h t h a l e i n m e t h y l o r a n g e i n d i c a t o r ) , d i s s o l v e d o x y g e n ( D O m e t r e m o d e l Y S I # 5 2 ) , t o t a l a m m o n i a n i t r o g e n ( p h e n a t e m e t h o d ) , n i t r i t e n i t r o g e n ( c o l o r i m e t r y m e t h o d ) , n i t r a t e n i t r o g e n ( c a d m i u m r e d u c t i o n ) a n d o r t h o p h o s p h a t e ( a s c o r b i c a c i d m e t h o d ) ( A P H A e t a l . 1 9 9 8 ) . D a t a o n g r o w t h p e r f o r m a n c e a n d w a t e r q u a l i t y w e r e a n a l y z e d u s i n g t h e S P S S s t a t i s t i c a l s o f t w a r e p a c k a g e ( v e r s i o n 1 0 ) . A n a l y s i s o f v a r i a n c e ( A N O V A ) w a s u s e d t o t e s t t h e i n t e r a c t i o n o f s e a w e e d s a n d s t o c k i n g d e n s i t y a t α = 0 . 0 5 , a n d d i f f e r e n c e s b e t w e e n m e a n s w e r e c o m p a r e d u s i n g T u k e y s t e s t a t α = 0 . 0 5 . R E S U L T S G r o w t h i n s h e l l l e n g t h a n d b o d y w e i g h t o f j u v e n i l e s p o t t e d b a b y l o n ( B a b y l o n i a a r e o l a t a ) i n a l a b o r a t o r y - s c a l e c l o s e d r e c i r c u l a t i n g s y s t e m u s i n g J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 1 ) 5 : 3 7 0 - 3 7 5 3 7 2 C h a i t a n a w i s u t i e t a l . , 2 0 1 1

o y s t e r a n d t w o s e a w e e d s a s b i o f i l t e r s o v e r 9 0 d a y s i s s h o w n i n F i g u r e 1 . O n e - w a y A N O V A s h o w e d n o s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s ( P > 0 . 0 5 ) . i n f i n a l s h e l l l e n g t h , f i n a l b o d y w e i g h t , b o d y w e i g h t g a i n s , s h e l l l e n g t h i n c r e m e n t a n d g r o w t h r a t e a m o n g a l l t r e a t m e n t s ( T a b l e 1 ) . S h e l l l e n g t h i n c r e m e n t s o f s p o t t e d B a b y l o n r a n g e d f r o m 0 . 9 8 t o 1 . 0 0 c m a n d 1 . 8 8 t o 2 . 0 3 g f o r t h o s e o f b o d y w e i g h t g a i n s . G r o w t h r a t e i n s h e l l l e n g t h a n d b o d y w e i g h t o f s p o t t e d b a b y l o n r a n g e d f r o m 0 . 3 3 0 . 3 4 c m m o - 1 a n d 0 . 6 2 0 . 6 7 g m o - 1 , r e s p e c t i v e l y . S i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s ( P < 0 . 0 5 ) . i n f i n a l s u r v i v a l r a t e o f s p o t t e d b a b y l o n w e r e f o u n d a m o n g r e a r i n g t r e a t m e n t s ( P < 0 . 0 5 ) , r a n g i n g f r o m 8 6 . 7 2 t o 8 6 . 9 8 % c o m p a r e d w i t h t h o s e o f t h e c o n t r o l ( 8 4 . 2 7 % ) . G r o w t h o f s e a w e e d s ( G . s a l i c o r n i a a n d C . l e n t i l l i f e r a ) w e r e u s e d a s b i o f i l t e r s i n a l a b o r a t o r y s c a l e , c l o s e d r e c i r c u l a t i n g s y s t e m f o r j u v e n i l e s s p o t t e d b a b y l o n ( B . a r e o l a t a ) f o r 9 0 d a y s i s s h o w n i n F i g u r e 2 . T h e r e w e r e s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s ( P < 0 . 0 5 ) i n a b s o l u t e g r o w t h r a t e s b e t w e e n t h e t w o s e a w e e d b i o f i l t e r t r e a t m e n t s . W e i g h t g a i n o f C . l e n t i l l i f e r a ( 7 1 6 . 0 g ) w a s s i g n i f i c a n t l y h i g h e r t h a n t h o s e o f G . s a l i c o r n i a ( 3 5 3 . 0 g m o - 1 ) . G r o w t h r a t e o f C . l e n t i l l i f e r a ( 2 3 8 . 6 g m o - 1 ) w a s s i g n i f i c a n t l y h i g h e r t h a n t h o s e o f G . s a l i c o r n i a ( 1 1 7 . 6 g m o - 1 ) . H o w e v e r , g r o w t h o f r o c k o y s t e r ( C . c o m m e r c i a l i s ) i s v e r y l o w w i t h l e s s t h a n 0 . 0 5 g m o - 1 f o r a l l t r e a t m e n t s b u t f i n a l s u r v i v a l w a s h i g h ( 1 0 0 % ) f o r T r e a t m e n t 1 a n d 2 . W a t e r q u a l i t y p a r a m e t e r s i n a c l o s e d r e c i r c u l a t i n g s y s t e m u s i n g r o c k o y s t e r ( C . c o m m e r c i a l i s ) a n d s e a w e e d s ( G . s a l i c o r n i a a n d C . l e n t i l l i f e r a ) a s b i o f i l t e r s o v e r 9 0 d a y s i s s h o w n i n T a b l e 2 . T h e r e w e r e n o s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s ( P > 0 . 0 5 ) i n w a t e r t e m p e r a t u r e ( 2 4 . 2 2 4 . 6 0 C ) , s a l i n i t y ( 3 0 . 5 3 0 . 7 p s u ) , p H ( 8 . 3 5 8 . 4 2 ) , d i s s o l v e d o x y g e n ( 6 . 5 6 . 7 m g / l ) , a m m o n i a - n i t r o g e n ( 0 . 0 7 6 6 0 . 0 9 2 2 m g / l ) , n i t r i t e - n i t r o g e n ( 0 . 1 5 5 5 0 . 1 7 2 8 m g / l ) , n i t r a t e - n i t r o g e n ( 0 . 8 5 8 4 0 . 9 0 7 3 m g / l ) a n d p h o s p h a t e - p h o s p h o r u s ( 0 . 4 8 6 3 0 . 5 1 8 5 m g / l ) a m o n g t h e g r o w t h t r i a l s b u t n o t f o r t o t a l a l k a l i n i t y ( 7 7 . 0 8 1 . 0 m g / l ) ( P < 0 . 0 5 ) . D I S C U S S I O N T h i s s t u d y s h o w e d t h a t n o s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s i n f i n a l s h e l l l e n g t h , f i n a l b o d y w e i g h t , b o d y w e i g h t g a i n s , s h e l l l e n g t h i n c r e m e n t a n d g r o w t h r a t e a m o n g a l l t r e a t m e n t s . G r o w t h r a t e i n s h e l l l e n g t h a n d b o d y w e i g h t o f s p o t t e d b a b y l o n . S i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s i n f i n a l s u r v i v a l r a t e o f s p o t t e d b a b y l o n w e r e f o u n d a m o n g t r e a t m e n t s , r a n g i n g f r o m 8 6 . 7 2 t o 8 6 . 9 8 % c o m p a r e d w i t h t h o s e o f t h e c o n t r o l ( 8 4 . 2 7 % ) . T h e r e w e r e n o s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s i n w a t e r t e m p e r a t u r e , s a l i n i t y , p H , d i s s o l v e d o x y g e n , a m m o n i a - n i t r o g e n , n i t r i t e - n i t r o g e n , n i t r a t e - n i t r o g e n a n d p h o s p h a t e - p h o s p h o r u s a m o n g t h e g r o w t h t r i a l s b u t n o t f o r a l k a l i n i t y . T h i s s t u d y c a n c o n c l u d e t h a t G . s a l i c o r n i a n d C . l e n t i l l i f e r a c a n b e u s e d a s n u t r i e n t b i o f i l t e r f o r r e g u l a t i n g o f w a t e r q u a l i t y i n a c l o s e d r e c i r c u l a t i n g s y s t e m f o r g r o w i n g j u v e n i l e s s p o t t e d b a b y l o n b u t n o t s u i t a b l e u s e o f o y s t e r . A s c o m p a r e d t o t h e s t u d y o f C h a i t a n a w i s u t i , K r i t s a n a p u n t u a n d N a t s u k a r i 3 7 3 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 1 ) 5 : 3 7 0 - 3 7 5 C h a i t a n a w i s u t i e t a l . , 2 0 1 1 - -

( 2 0 0 5 ) , g r o w t h r a t e o f B . a r e o l a t a i n t h i s s t u d y ( 0 . 6 2 t o 0 . 6 7 g m o - 1 ) i s t h e s a m e a s t h o s e c u l t u r e d i n t h e r e c i r c u l a t i n g s y s t e m u s e d o y s t e r s h e l l s a s b i o f i l t e r ( 0 . 6 2 t o 0 . 6 8 g m o - 1 ) b u t l o w e r t h a n t h o s e c u l t u r e d i n f l o w - t h r o u g h s y s t e m ( 1 . 0 5 t o 1 . 2 5 g m o - 1 ) a n d T h i s s t u d y a g r e e d w i t h t h e s t u d y o f C h o w e t a l . ( 2 0 0 1 ) w h o i n d i c a t e d t h a t G r a c i l a r i a c h i l e n s i s c u l t u r e w a s h i g h l y e f f i c i e n t a t b i o f i l t r a t i o n o f t h e s o l u b l e n u t r i e n t s b u t h a d l i t t l e e f f e c t o n p a r t i c u l a t e e m i s s i o n . T h e b e s t g r o w t h o f G . c h i l e n s i s o c c u r r e d i n t h e a m m o n i u m r i c h e f f l u e n t f r o m t h e f i s h c u l t u r e . J o n e s , D e n n i s o n & P r e s t o n ( 2 0 0 1 ) a l s o r e c o m m e n d e d t h a t n u t r i e n t r e m o v a l e f f i c i e n c y o f m a c r o a l g a e m a y b e i m p r o v e d w i t h i n c r e a s e d l i g h t , p a r t i c u l a r l y f o r n i t r a t e u p t a k e , i n c r e a s e d w a t e r f l o w t o r e d u c e t h e b o u n d a r y l a y e r , a n d h i g h e r s t o c k i n g d e n s i t i e s . P a u l & N y s ( 2 0 0 8 ) r e p o r t e d t h a t s e a w e e d f r o m t h e g e n u s C a u l e r p a c u l t u r e w i l l n o t b e e a s i l y i n t e g r a t e d i n t o s e t t l e m e n t p o n d s i n t r o p i c a l a q u a c u l t u r e . H o w e v e r , b e c a u s e s o m e s p e c i e s o f C a u l e r p a g r e w w e l l i n t a n k - b a s e d s y s t e m ( C . r a c e m o s a g r e w a t > 7 % d a y - 1 ) a n d o t h e r s a r e c a p a b l e o f l u x u r y u p t a k e ( C . s e r r u l a t a a n d C . t a x i f o l i a a l m o s t d o u b l e d i n t e r n a l n i t r o g e n i n n u t r i e n t r i c h w a t e r ) , C a u l e r p a s p e c i e s h a v e a p p l i c a t i o n i n b i o r e m e d i a t i o n o f i n t e n s i v e t a n k - b a s e d a q u a c u l t u r e a n d p e r h a p s t r e a t e d p o n d a q u a c u l t u r e e f f l u e n t . A s c o m p a r e d t o o t h e r s e a w e e d s c o m m o n l y u s e d f o r w a t e r t r e a t m e n t i n m a r i c u l t u r e p u r p o s e s , M s u y a e t a l . ( 2 0 0 6 ) r e p o r t e d t h a t s e a w e e d , U l v a r e t i c u l a t e , g r e w a t a n a v e r a g e o f 4 . 0 % d a y - 1 a t t h e f i s h p o n d o u t f l o w w i t h a b i o m a s s y i e l d a v e r a g i n g 4 6 g m - 2 d a y - 1 , c o m p a r e d w i t h a v e r a g i n g 2 . 5 % a n d 2 . 7 g m - 2 d a y - 1 a t t h e f i s h p o n d i n f l o w . M a r t i n e z - A r a g o n e t a l . ( 2 0 0 2 ) i n d i c a t e d t h a t s e a w e e d s ( U l v a r o t u n d a t a a n d E n t e r o m o r p a i n t e s t i n a l i s a n d G r a c i l a r i a g r a c i l i s r e m o v e d e f f i c i e n t l y t h e p h o s p h a t e d i s s o l v e d i n t h e w a s t e w a t e r f r o m t h e f i s h c u l t u r e t a n k s . R e m o v a l e f f i c i e n c y w a s h i g h e s t i n U . r o t u n d a t a ( 9 9 . 6 % ) a n d l o w e s t i n G . g r a c i l i s ( 6 2 . 2 % ) . I n a d d i t i o n , t h e m a x i m u m u p t a k e r a t e o f p h o s p h a t e o c c u r r e d i n U . r o t u n d a t a , s l i g h t l y g r e a t e r t h a n t h a t f o r E . i n t e s t i n a l i s , w h i l e G . g r a c i l i s s h o w e d t h e l o w e s t u p t a k e r a t e . H e r n a n d e z e t a l . ( 2 0 0 2 ) a l s o i n d i c a t e d t h a t U . r o t u n d a t a a n d E . i n t e s t i n a l i s a n d J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 1 ) 5 : 3 7 0 - 3 7 5 3 7 4 C h a i t a n a w i s u t i e t a l . , 2 0 1 1 P a r a m e t e r s T r e a t m e n t 1 T r e a t m e n t T r e a t m e n t 1 . 2 3 ± 0 . 0 2 1 . 2 3 ± 0 . 0 1 1 . 2 3 ± 0 . 0 0 1 0 . 3 0 ± 0 . 0 2 0 . 2 9 ± 0 . 0 1 0 . 3 0 ± 0 . 0 0 4 2 . 2 3 ± 0 . 0 4 2 . 2 3 ± 0 . 1 6 2 . 2 1 ± 0 . 1 0 2 . 3 2 ± 0 . 1 1 2 . 3 0 ± 0 . 5 7 2 . 1 7 ± 0 . 2 7 1 . 0 0 + 0 . 0 3 1 . 0 0 + 0 . 1 5 0 . 9 8 + 0 . 1 0 2 . 0 3 + 0 . 1 1 2 . 0 1 + 0 . 5 8 1 . 8 8 + 0 . 2 7 0 . 3 3 + 0 . 0 1 0 . 3 4 + 0 . 0 5 0 . 3 3 + 0 . 0 3 0 . 6 7 + 0 . 0 4 0 . 6 7 + 0 . 1 9 0 . 6 2 + 0 . 0 9 8 4 . 2 7 b 8 6 . 7 2 a 8 6 . 9 8 a T a b l e 1 . G r o w t h o f j u v e n i l e s s p o t t e d b a b y l o n ( B . a r e o l a t a ) i n a l a b o r a t o r y - s c a l e c l o s e d r e c i r c u l a t i n g s y s t e m u s i n g o y s t e r a n d t w o s e a w e e d s a s b i o f i l t e r s f o r 9 0 d a y s V a l u e s a r e m e a n s + s t a n d a r d d e v i a t i o n . M e a n s w i t h d i f f e r e n t s u p e r s c r i p t i n t h e s a m e r o w a r e s i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t ( P < 0 . 0 5 ) . P a r a m e t e r s T r e a t m e n t 1 T r e a t m e n t T r e a t m e n t W a t e r t e m p e r a t u r e ( C ) 2 4 . 2 ± 2 . 4 2 4 . 3 ± 2 . 4 2 4 . 6 ± 2 . 3 S a l i n i t y p s u ) 3 0 . 6 ± 1 . 3 3 0 . 7 ± 1 . 7 3 0 . 5 ± 1 . 2 p H 8 . 4 2 ± 0 . 1 1 8 . 3 7 ± 0 . 1 2 8 . 3 5 ± 0 . 1 5 A l k a l i n i t y ( m g / L ) 8 1 ± 9 a 7 4 ± 8 c 7 7 ± 9 b D i s s o l v e d o x y g e n ( m g / L ) 6 . 5 ± 0 . 7 6 . 7 ± 0 . 6 6 . 5 ± 0 . 5 A m m o n i a - n i t r o g e n ( m g - N / L ) 0 . 0 7 6 6 ± 0 . 0 5 9 0 0 . 0 9 0 0 ± 0 . 0 5 3 8 0 . 0 9 2 2 ± 0 . 0 6 0 4 - 0 . 1 7 2 8 ± 0 . 0 4 0 4 0 . 1 6 3 8 ± 0 . 0 8 0 9 0 . 1 5 5 5 ± 0 . 0 8 0 2 - 0 . 9 0 7 3 ± 0 . 3 1 1 2 0 . 8 5 8 4 ± 0 . 3 0 3 6 0 . 8 8 2 7 ± 0 . 3 2 3 0 - 0 . 4 8 6 3 ± 0 . 2 1 0 9 0 . 5 1 8 5 ± 0 . 2 5 1 6 0 . 4 9 2 2 ± 0 . 2 6 4 3 T a b l e 2 . S e a w a t e r q u a l i t y i n a l a b o r a t o r y - s c a l e c l o s e d r e c i r c u l a t i n g s y s t e m f o r j u v e n i l e s s p o t t e d b a b y l o n ( B . a r e o l a t a ) u s i n g o y s t e r a n d t w o s e a w e e d s a s b i o f i l t e r s f o r 9 0 d a y s V a l u e s a r e m e a n s + s t a n d a r d d e v i a t i o n . M e a n s w i t h d i f f e r e n t s u p e r s c r i p t i n t h e s a m e r o w a r e s i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t ( P < 0 . 0 5 ) .

G . g r a c i l i s r e m o v e d e f f i c i e n t l y t h e a m m o n i u m d i s s o l v e d i n t h e w a s t e w a t e r f r o m t h e f i s h c u l t u r e t a n k s . U . r o t u n d a t a a n d E . i n t e s t i n a l i s s h o w e d t h e h i g h e s t a m m o n i u m d i s a p p e a r a n c e ( 9 7 . 7 % ) , w h e r e a s G . g r a c i l i s r e m o v e d 9 3 . 2 % o f t h e n u t r i e n t d u r i n g t h e i n c u b a t i o n . I n a d d i t i o n , t h e m i n i m u m u p t a k e r a t e o f a m m o n i u m o c c u r r e d i n G . g r a c i l i s . W a n g e t a l . ( 2 0 0 7 ) s h o w e d t h a t g r o w t h r a t e o f U l v a p e r t u s a w a s 3 . 3 % d a y - 1 i n a i n d o o r r e c i r c u l a t i n g s y s t e m f o r p r o d u c t i o n o f j u v e n i l e s e a c u c u m b e r ( A p o s t i c h o p u s j a p o n i c a s ) . U . p e r t u s a w a s e f f i c i e n t i n r e m o v i n g t o x i c a m m o n i a a n d i n m a i n t a i n i n g t h e w a t e r q u a l i t y w i t h i n a c c e p t a b l e l e v e l s f o r s e a c u c u m b e r c u l t u r e . U . p e r t u s a r e m o v e d 6 8 % o f t h e t o t a l a m m o n i a n i t r o g e n a n d 2 6 % o f t h e o r t h o p h o s p h a t e f r o m t h e s e a c u c u m b e r c u l t u r e e f f l u e n t ; t h e m a c r o a l g a e b i o f i l t e r r e m o v e d a m m o n i a a t a n a v e r a g e r a t e o f 0 . 4 5 9 g N m - 2 d a y - 1 . T h i s s t u d y c a n c o n c l u d e t h a t G . s a l i c o r n i a n d C . l e n t i l l i f e r a c a n b e u s e d a s n u t r i e n t b i o f i l t e r f o r r e g u l a t i n g o f w a t e r q u a l i t y i n a c l o s e d r e c i r c u l a t i n g s y s t e m f o r g r o w i n g j u v e n i l e s s p o t t e d b a b y l o n b u t n o t s u i t a b l e u s e o f o y s t e r . H o w e v e r , t h e s t o c k i n g d e n s i t y a n d p r o d u c t i o n o f G . s a l i c o r n i a n d C . l e n t i l l i f s h o u l d b e c o n s i d e r e d f o r o p t i m a l u s e i n t h e r e c i r c u l a t i n g s y s t e m f o r t h e s p o t t e d B a b y l o n . A C K N O W L E D G E S T h i s r e s e a r c h w a s f u n d e d b y C h u l a l o n g k o r n U n i v e r s i t y i n t h e f i s c a l y e a r o f 2 0 0 9 . T h e a u t h o r s t h a n k t o A q u a t i c R e s o u r c e s R e s e a r c h I n s t i t u t e , C h u l a l o n g k o r n U n i v e r s i t y , i n p a r t i c u l a r M r . Y o n g y u d t h C h a n k a e w f o r h i s a s s i s t a n c e s i n t h e h a t c h e r y a n d c o l l e c t i n g o f o y s t e r s a n d s e a w e e d s . T h e a u t h o r s a l s o t h a n k t o A s s o c i a t e d P r o f e s s o r D r . S o m k i a t P i y a t i r a t i t i w o r a k u l f o r v a l u a b l e c o m m e n t s d u r i n g t h e e x p e r i m e n t s a n d p r e p a r a t i o n o f t h i s m a n u s c r i p t . R E F E R E N C E S A P H A , A W W A , W P C F . 1 9 9 8 . S t a n d a r d m e t h o d s f o r t h e e x a m i n a t i o n o f w a t e r a n d w a s t e w a t e r , A m e r i c a n P u b l i c H e a l t h A s s o c i a t i o n , A m e r i c a n W a t e r W o r k s A s s o c i a t i o n , 2 0 t h e d . W a t e r P o l l u t i o n C o n t r o l F e d e r a t i o n : W a s h i n g t o n , D C . 2 - 2 4 - 4 - 1 5 9 . B u s c h m a n n A H . 1 9 9 6 . A n i n t r o d u c t i o n t o i n t e g r a t e d f a r m i n g a n d t h e u s e o f s e a w e e d s a s b i o f i l t e r s . H y d r o b i o l o g i a 3 2 6 ( 3 2 7 ) : 5 9 - 6 0 . C h a i t a n a w i s u t i N , K r i s a n a p u n t u S , N a t s u k a r i Y . 2 0 0 5 . G r o w t h o f h a t c h e r y - r e a r e d j u v e n i l e s p o t t e d b a b y l o n ( B a b y l o n i a a r e o l a t a L i n k 1 8 0 7 ) t o m a r k e t a b l e s i z e a t f o u r s t o c k i n g d e n s i t i e s i n f l o w - t h r o u g h a n d r e c i r c u l a t i n g s e a w a t e r s y s t e m . A q u a c u l t u r e I n t e r n a t i o n a l 1 3 : 2 3 3 - 2 3 9 . C h o w F Y , M a c c h i v e l l o J , S a n t a C r u z S , F o n c k E . 2 0 0 1 . U t i l i z a t i o n o f G r a c i l a r i a c h i l e n s i s ( R h o d o p h y t a : G r a c i l a r i a c e a e ) a s a b i o f i l t e r i n t h e d e p u r a t i o n o f e f f l u e n t s f r o m t a n k c u l t u r e s o f f i s h , o y s t e r s a n d s e a u r c h i n . J o u r n a l o f W o r l d A q u a c u l t u r e S o c i e t y 3 2 : 2 1 5 - 2 1 9 . H e r n a n d e z I , M a r t i n e z - A r a g o n J F , T o v a r A , P e r e z - l l o r e n s J L a n d V e r g a r a J J . 2 0 0 2 . B i o f i l t e r i n g e f f i c i e n c y i n r e m o v a l d i s s o l v e d n u t r i e n t s b y t h r e e s p e c i e s o f e s t u a r i n e m a c r o a l g a e c u l t i v a t e d w i t h s e a b a s s ( D i c e n t r a r c h u s l a b r a x ) w a s t e w a t e r s 2 A m m o n i a . J o u r n a l A p p l i e d P h y c o l o g y 1 4 : 3 7 5 - 3 8 4 . J o n e s A B , D e n n i s o n W C , a n d P r e s t o n N P . 2 0 0 1 . I n t e g r a t e d t r e a t m e n t o f s h r i m p e f f l u e n t b y s e d i m e n t a t i o n , o y s t e r f i l t r a t i o n a n d m a c r o a l g a l a b s o r p t i o n : a l a b o r a t o r y s c a l e s t u d y . A q u a c u l t u r e 1 9 3 : 1 5 5 - 1 7 8 . M a r t i n e z - A r a g o n J F , H e r n a n d e z I , P e r e z - l l o r e n s J L , V a z q u e z R , V e r g a r a J J . 2 0 0 2 . B i o f i l t e r i n g e f f i c i e n c y i n r e m o v a l d i s s o l v e d n u t r i e n t s b y t h r e e s p e c i e s o f e s t u a r i n e m a c r o a l g a e c u l t i v a t e d w i t h s e a b a s s ( D i c e n t r a r c h u s l a b r a x ) w a s t e w a t e r s 1 P h o s p h a t e . J o u r n a l A p p l i e d P h y c o l o g y 1 4 : 3 6 5 - 3 7 4 . M s u y a F E , K y e w a l y a n g a M S , a n d S a l u m D . 2 0 0 6 . T h e p e r f o r m a n c e o f t h e s e a w e e d U l v a r e t i c u l a t e a s a b i o f i l t e r i n a l o w - t e c h , l o w c o s t , g r a v i t y g e n e r a t e d w a t e r f l o w r e g i m e i n Z a n z i b a r , T a n z a n i a . A q u a c u l t u r e 2 5 4 : 2 8 4 - 2 9 2 . N e o r i A , K r o m M D , E l l n e r S P , B o y d C E , P o p p e r D , R a b i n o v i t c h R , D a v i s o n P J , D v i r O , Z u b e r D , U c k o M , A n g e l D , a n d G o r d i n H 1 9 9 6 . S e a w e e d b i o f i l t e r s a s r e g u l a t o r s o f w a t e r q u a l i t y i n i n t e g r a t e d f i s h - s e a w e e d c u l t u r e u n i t . A q u a c u l t u r e 1 4 1 : 1 8 3 - 1 9 9 . P a g a n d P , B l a n c h e t o n J P , L e m o a l l e J , a n d C a s e l l a s C . 2 0 0 0 . T h e u s e o f h i g h r a t e a l g a l p o n d s f o r t h e t r e a t m e n t o f m a r i n e e f f l u e n t f r o m a r e c i r c u l a t i n g f i s h r e a r i n g s y s t e m . A q u a c u l t u r e R e s e a r c h 3 1 : 7 2 9 - 7 3 6 . P a u l N A , a n d d e N y s R . 2 0 0 8 . P r o m i s e a n d p i t f a l l s o f l o c a l l y a b u n d a n c e s e a w e e d s a s b i o f i l t e r s f o r i n t e g r a t e d a q u a c u l t u r e . A q u a c u l t u r e 2 8 1 : 4 9 - 5 5 . W a n g H , L i u C F , Q i n C X , C a o S Q , a n d D i n g J . 2 0 0 7 . U s i n g a m a c r o a l g a e U l v a p e r t u r a b i o f i l t e r i n a r e c i r c u l a t i n g s y s t e m f o r p r o d u c t i o n o f j u v e n i l e s e a c u c u m b e r A p o s t i c h o p u s j a p o n i c a . A q u a c u l t u r e E n g i n e e r i n g 3 6 : 2 1 7 - 2 2 4 . 3 7 5 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 1 ) 5 : 3 7 0 - 3 7 5 C h a i t a n a w i s u t i e t a l . , 2 0 1 1