J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y F l u c t u a t i o n o f p r o t e i n l e v e l i n H a e m o l y m p h , o v a r y a n d H e p a t o p a n c r e a s d u r i n g n o n - r e p r o d u c t i v e a n d r e p r o d u c t i v e M o l t C y c l e o f A l b u n e a s y m m i s t a K e y w o r d s : A l b u n e a s y m m i s t a , m o l t i n g , r e p r o d u c t i o n , h a e m o l y m p h , o v a r y , h e p a t o p a n - c r e a s a n d p r o t e i n . A B S T R A C T : I n A l b u n e a s y m m i s t a , a n a n t a g o n i s t i c r e l a t i o n s h i p c o u l d b e v i s u a l i z e d b e t w e e n m o l t i n g a n d r e p r o d u c t i o n . P r o t e i n s n e c e s s a r y f o r t h e f o r m a t i o n a n d h a r d e n i n g o f t h e e x o s k e l e t o n a n d m a t u r a t i o n o f o v a r y . T h e b i o c h e m i c a l l i n k b e t w e e n m o l t i n g a n d r e p r o d u c t i v e c y c l e o f A l b u n e a s y m m i s t a w a s e s t a b l i s h e d t h r o u g h t h e e s t i m a t i o n o f p r o t e i n i n h a e m o l y m p h , o v a r y a n d h e p a t o p a n c r e a s . T h e h a e m o l y m p h p r o t e i n l e v e l d u r i n g n o n - r e p r o d u c t i v e m o l t c y c l e g r a d u a l l y r a i s e d f r o m p o s t m o l t t o e a r l y p r e m o l t ( 2 . 7 ± 0 . 2 t o 6 . 3 ± 0 . 2 m g / m l ) a n d i t g e t d e c r e a s e d i n t h e l a t e p r e m o l t d u e t o w a t e r i n f l u x t h r o u g h n e w c u t i c l e ( 6 . 3 ± 0 . 2 t o 4 . 3 ± 0 . 1 m g / m l ) . H o w e v e r d u r i n g r e p r o d u c t i v e m o l t c y c l e , t h e p r o t e i n c o n t e n t o f h a e m o l y m p h a l s o g e t s d e c r e a s e d d u e t o r e p r o d u c t i v e a c t i v i t i e s ( 3 . 9 ± 0 . 2 t o 2 . 1 ± 0 . 1 m g / m l ) . T h e o v a r i a n p r o t e i n l e v e l d u r i n g n o n - r e p r o d u c t i v e m o l t c y c l e g e t g r a d u a l l y i n c r e a s e d d u e t o a c c u m u l a t i o n o f p r o t e i n ( 7 4 . 8 ± 1 . 5 t o 1 4 5 . 8 ± 1 . 7 µ g / m g ) D u r i n g r e p r o d u c t i v e m o l t c y c l e f l u c t u a t i o n o f p r o t e i n l e v e l o c c u r s s o o n a f t e r s p a w n i n g , w h e r e t h e o v a r y r e m a i n s i n t h e s p e n t c o n d i t i o n ( 4 7 µ g / m g ) t h e n a f t e r h a t c h i n g , t h e o v a r y c o n t i n u e s i t s m a t u r a t i o n ( 4 7 t o 7 4 . 9 ± 3 . 7 µ g / m g ) . T h e p r o t e i n c o n t e n t i n t h e h e p a t o p a n c r e a s s h o w s f l u c t u a t i o n b o t h d u r i n g r e p r o d u c t i v e m o l t c y c l e ( 2 9 . 5 ± 1 . 9 t o 1 4 8 . 2 ± 1 . 8 µ g / m g ) a n d n o n - r e p r o d u c t i v e m o l t c y c l e ( 1 4 4 . 8 ± 1 . 0 t o 1 2 5 . 1 ± 5 . 2 µ g / m g ) . 6 8 - 7 2 | J R B | 2 0 1 1 | V o l 1 | N o 2 © F i c u s P r e s s . T h i s O p e n A c c e s s a r t i c l e i s g o v e r n e d b y t h e C r e a t i v e C o m m o n s A t t r i b u t i o n L i c e n s e ( h t t p : / / c r e a t i v e c o m m o n s . o r g / l i c e n s e s / b y / 2 . 0 ) , w h i c h g i v e s p e r m i s s i o n f o r u n r e s t r i c t e d u s e , n o n - c o m m e r c i a l , d i s t r i b u t i o n , a n d r e p r o d u c t i o n i n a l l m e d i u m , p r o v i d e d t h e o r i g i n a l w o r k i s p r o p e r l y c i t e d . S u b m i t Y o u r M a n u s c r i p t w w w . f i c u s p r e s s . c o m w w w . j r e s e a r c h b i o l o g y . c o m J o u r n a l o f R e s e a r c h i n b i o l o g y A n I n t e r n a t i o n a l O p e n A c c e s s O n l i n e R e s e a r c h J o u r n a l A u t h o r s : K a n a g a l a k s h m i K . I n s t i t u t i o n : D e p a r t m e n t o f z o o l o g y , P r e s i d e n c y c o l l e g e , C h e n n a i , I n d i a . C o r r e s p o n d i n g a u t h o r : K a n a g a l a k s h m i K . E m a i l : n a n d i k a 3 0 @ g m a i l . c o m . P h o n e N u m b e r : 9 8 8 4 0 9 6 9 9 6 W e b A d d r e s s : h t t p : / / j r e s e a r c h b i o l o g y . c o m / D o c u m e n t s / R A 0 0 1 9 . p d f . D a t e s : R e c e i v e d : 0 7 M a y 2 0 1 1 / A c c e p t e d : 1 2 M a y 2 0 1 1 / P u b l i s h e d : 2 8 M a y 2 0 1 1 A r t i c l e C i t a t i o n : K a n a g a l a k s h m i K . F l u c t u a t i o n o f p r o t e i n l e v e l i n H a e m o l y m p h , o v a r y a n d H e p a t o p a n c r e a s d u r i n g n o n - r e p r o d u c t i v e a n d r e p r o d u c t i v e M o l t C y c l e o f A l b u n e a s y m m i s t a . J o u r n a l o f r e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 1 ) 2 : 6 8 - 7 2 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y A n I n t e r n a t i o n a l O n l i n e O p e n A c c e s s P u b l i c a t i o n g r o u p O r i g i n a l R e s e a r c h p a p e r

J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y I N T O R D U C T I O N P r o t e i n s p l a y v i t a l r o l e i n b o t h m o l t i n g a n d r e p r o d u c t i o n a s i t i n v o l v e s i n t h e f o r m a t i o n o f c u t i c l e a n d s y n t h e s i s o f y o l k . V a r i a t i o n i n t h e a m o u n t o f h a e m o l y m p h p r o t e i n i n v o l v e d i n t h e f o r m a t i o n o f n e w c u t i c l e d u r i n g m o l t i n g s t a g e s h a s b e e n r e p o r t e d i n t h e c r a y f i s h , A s t a c u s a s t a c u s ( D o m b o r i c e a n u , 1 9 3 2 ; C r o w l e y , 1 9 6 3 ) , i n t h e c r a b s , M a i a s q u a i n a d o ( D r i l h o n , 1 9 3 5 ; D r a c h a n d T e i s s i e r , 1 9 3 9 ) C a n c e r m a g s t e r , C a l i n e c t u s s a p i d u s ( L e o n e , 1 9 5 3 ) C a r c i n u s m a e n u s ( R o b e r t s o n , 1 9 6 0 ) , l o b s t e r s H o m a r u s v u l g a r i s ( G l y n n , 1 9 6 8 ) a n d H o m a r u s a m e r i c a n u s ( B a r l o w a n d R i d g w a y 1 9 6 9 ) . I t i s a l s o n o w w e l l k n o w n t h a t b o t h e p i d e r m a l c e l l s a n d o v a r y d e p e n d s o n p r e c u r s o r m o l e c u l e s y n t h e s i z e d e l s e w h e r e i n t h e s o m a t i c o r g a n s f o r t h e i r f i n a l s e q u e s t r a t i o n t o f o r m t h e n e w c u t i c l e a n d s t o r a g e y o l k i n s i d e t h e r i p e o o c y t e r e s p e c t i v e l y . T h e p r o t e i n c o m p o n e n t s t r a n s p o r t e d t h r o u g h t h e h a e m o l y m p h d i r e c t l y s e q u e s t r a t e d i n t o t h e g r o w i n g o o c y t e f o r d e p o s i t i o n a s y o l k . T h e l i p i d c o n s t i t u e n t s f r o m t h e l i p o g e n i c t i s s u e a r e t r a n s p o r t e d t o t h e o v a r y a s w e l l a s o t h e r o r g a n i n c l u d i n g e p i d e r m i s i s m a i n l y a c h i e v e d b y t h e t w o h a e m o l y m p h l i p o p r o t e i n s u c h a s l i p o p r o t e i n I ( L P I ) a n d L i p o p r o t e i n I I ( L P I I ) ( C h i n o a n d K i t a z a v a , 1 9 8 1 ; C h a m p m a n , 1 9 8 0 ; L e e a n d p u p p i o n e , 1 9 8 8 ) T h e h e p a t o p a n c r e a s w h i c h i s c o n s i d e r e d t o b e t h e c h i e f o r g a n f o r p r o t e i n s y n t h e s i s c o n s i s t o f p r o x i m a l a n d d i s t a l s e g m e n t . T h e h e p a t o p a n c r e a s s e r v e s a s a n e x t r a o v a r i a n s o u r c e o f y o l k p r o t e i n f o r C r u s t a c e a ( B y a r d , 1 9 7 6 ) . D e v e l o p i n g o o c y t e a l s o a c q u i r e s t h e y o l k p r o t e i n b y p i n o c y t i c m e c h a n i s m f r o m h a e m o l y m p h ( Z e r b i b , 1 9 7 3 ) . T h e p r o t e i n i s a l s o s y n t h e s i z e d b y t h e o o c y t e i t s e l f ( K e s s e l , 1 9 6 8 ) . A p p a r e n t l y , a n a n a l y s i s o f t h e b i o c h e m i c a l c o m p o s i t i o n o f t h e h a e m o l y m p h a s w e l l a s t h e s y n t h e t i c o r g a n s d u r i n g m o l t i n g a n d r e p r o d u c t i v e s t a g e s w o u l d r e v e a l t h e i r p r e c i s e i n v o l v e m e n t i n t h e c u t i c l e f o r m a t i o n a s w e l l a s v i t e l l o g e n e s i s . M A T E R I A L S A N D M E T H O D S T h e t o t a l p r o t e i n w a s e s t i m a t e d b y t h e m e t h o d o f L o w e r y e t a l . , ( 1 9 5 1 ) i n h a e m o l y m p h a n d i n t i s s u e s s u c h a s o v a r y a n d h e p a t o p a n c r e a s . A s t a n d a r d g r a p h w a s p l o t t e d u s i n g t h e a b s o r b a n c e v a l u e s a g a i n s t e a c h c o n c e n t r a t i o n . R E S U L T F l u c t u a t i o n o f p r o t e i n d u r i n g M o u l t i n g a n d R e p r o d u c t i o n M o l t i n g a n d r e p r o d u c t i o n b o t h a r e t h e e n e r g y d e m a n d i n g p h y s i o l o g i c a l p r o c e s s e s . H e n c e , t h e t o t a l p r o t e i n w a s e s t i m a t e d i n h a e m o l y m p h , o v a r y a n d h e p a t o p a n c r e a s o f A l b u n e a s y m m i s t a d u r i n g d i f f e r e n t m o l t s t a g e s a n d o v a r i a n s t a g e s . F l u c t u a t i o n o f h a e m o l y m p h p r o t e i n d u r i n g m o l t i n g a n d r e p r o d u c t i v e s t a g e s D u r i n g n o n - r e p r o d u c t i v e m o l t i n g s t a g e s , o o c y t e m a t u r a t i o n o c c u r s . T h e l e v e l o f p r o t e i n s h o w s a g r a d u a l i n c r e a s e o f 2 . 7 ± 0 . 2 m g / m l i n p o s t m o l t s t a g e s ( A a n d B ) t o 6 . 3 ± 0 . 2 m g / m l i n p r e m o l t ( D 2 ) ( P > 0 . 0 5 ) . H o w e v e r , t h e D 3 a n d D 4 s t a g e s r e g i s t e r a p r o t e i n l e v e l o f 4 . 3 ± 0 . 1 m g / m l w h i c h i s s l i g h t l y l o w e r t h a n t h a t o f D 2 s t a g e ( P > 0 . 0 5 ) . T h i s m i g h t b e d u e t o w a t e r i n f l u x t h r o u g h t h e s o f t n e w c u t i c l e d u r i n g e c d y s i s . H o w e v e r , t h e p r o t e i n l e v e l w a s f u r t h e r r e d u c e t o 3 . 9 ± 0 . 1 m g / m l i n p o s t m o l t s t a g e ( P > 0 . 0 5 ) . T h e h a e m o l y m p h s h o w s f u r t h e r d e c l i n e i n i t s p r o t e i n l e v e l d u r i n g r e p r o d u c t i v e m o l t s t a g e ( F i g . 1 ) . D u r i n g r e p r o d u c t i v e m o l t s t a g e s , t h e h a e m o l y m p h p r o t e i n l e v e l w a s h i g h e r i n p o s t m o l t s t a g e s ( A a n d B ) ( 3 . 9 ± 0 . 1 m g / m l ) w h e n c o m p a r e d t o t h a t o f i n t e r m o l t s t a g e s . W h e r e a s , t h e p r o t e i n l e v e l s h o w s a s i g n i f i c a n t d e c l i n e d u r i n g i n t e r m o l t s t a g e - C 1 ( 2 . 1 ± 0 . 1 m g / m l ) ( P > 0 . 0 5 ) . H o w e v e r , t h e p r o t e i n l e v e l i s f u r t h e r i n c r e a s e d i n i n t e r m o l t s t a g e - D 2 ( 2 . 4 ± 0 . 1 m g / m l ) . B u t , i t s h o w s a s t e a d y d e c l i n e i n t h e p r e m o l t ( 2 . 0 ± 0 . 1 m g / m l ) . T h i s h a e m o l y m p h p r o t e i n s h o w s a n i n c r e a s e i n p r o t e i n l e v e l f u r t h e r d e c r e a s e d u r i n g l a t e p r e m o l t s t a g e s D 3 a n d D 4 ( 2 . 8 ± 0 . 2 m g / m l ) ( P > 0 . 0 5 ) ( F i g . 2 ) . T h e h a e m o l y m p h p r o t e i n s t e a d i l y i n c r e a s e d d u r i n g d i f f e r e n t o v a r i a n s t a g e s f r o m m a t u r i n g t o r i p e s t a g e s ( 2 . 5 ± 0 . 5 t o 4 . 8 ± 1 . 0 m g / m l ) F l u c t u a t i o n o f o v a r i a n p r o t e i n d u r i n g m o l t i n g a n d r e p r o d u c t i v e s t a g e s T h e q u a n t i t y o f o v a r i a n p r o t e i n s h o w s a g r a d u a l i n c r e a s e d f r o m ( 7 4 . 8 ± 1 . 5 t o 1 4 5 . 8 ± 1 . 7 u g / m g ) d u r i n g n o n - r e p r o d u c t i v e m o l t . F u r t h e r , a s t e a d y i n c r e a s e i n t h e l e v e l o f o v a r i a n p r o t e i n w a s a l s o o b s e r v e d a t t h e e a r l y i n t e r m o u l t - C 1 ( 1 2 7 . 2 ± 1 5 . 7 u g / m g ) a s w e l l a s d u r i n g p r e m o l t s t a g e s _ D 2 , D 3 a n d D 4 ( 1 4 5 . 8 ± 1 . 7 u g / m g ) ( P > 0 . 0 5 ) ( T a b l e 1 1 ) . A f t e r t h i s , t h e p r o t e i n v a l u e r e m a i n s m o r e o r l e s s c o n s t a n t i n p r e m o l t a n d p o s t m o l t s t a g e s ( F i g . 5 1 , T a b l e 6 ) . A f t e r s u c c e s s f u l s p a w n i n g , t h e p r o t e i n l e v e l i n t h e o v a r y r e m a i n s m o r e o r l e s s c o n s t a n t ( 4 7 u g / m g ) ( P < 0 . 0 5 ) i n t h e i n t e r m o l t ( C 1 a n d C 2 ) a n d e a r l y p r e m o l t ( D 0 ) u n t i l h a t c h i n g . H o w e v e r , a s t e a d y i n c r e a s e f r o m 4 7 t o 7 4 . 9 ± 3 . 7 u g / m g ( P > 0 . 0 5 ) i n t h e p r o t e i n l e v e l w a s o b s e r v e d a f t e r h a t c h i n g ( F i g . 1 ) . T h e o v a r y s h o w s a n u p w a r d t r e n d i n t h e 6 9 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 1 ) 2 : 6 8 - 7 2 K a n a g a l a k s h m i . , 2 0 1 1

J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y p r o t e i n l e v e l f r o m m a t u r i n g t o r i p e s t a g e ( 4 7 . 3 ± 3 . 5 t o 1 4 5 . 3 ± 1 . 3 u g / m g ) ( F i g . 2 ) . F l u c t u a t i o n o f h e p a t o p a n c r e a s p r o t e i n d u r i n g m o l t i n g a n d r e p r o d u c t i v e s t a g e s T h e h e p a t o p a n c r e a t i c p r o t e i n s h o w s a n u p w a r d t r e n d f r o m 2 9 . 5 ± 1 . 9 i n p o s t m o l t t o 1 4 8 . 2 ± 1 . 8 u g / m g ( P > 0 . 0 5 ) i n p r e m o l t d u r i n g n o n - r e p r o d u c t i v e m o l t s t a g e ( F i g . 1 ) . N o n - r e p r o d u c t i v e m o l t s t a g e s a l s o s h o w s a s i m i l a r f l u c t u a t i o n i n p r o t e i n l e v e l ( 1 4 4 . 8 ± 1 . 0 t o 1 2 5 . 1 ± 5 . 2 u g / m g ) ( P > 0 . 0 5 ) ( F i g . 2 ) . D I S C U S S I O N I n A l b u n e a s y m m i s t a , a n a n t a g o n i s t i c r e l a t i o n s h i p c o u l d b e v i s u a l i z e d b e t w e e n m o l t i n g a n d r e p r o d u c t i o n . T o i n v e s t i g a t e t h e r o l e o f b i o m o l e c u l e s i n t h e p r o c e s s o f m o l t i n g a n d r e p r o d u c t i o n , t o t a l p r o t e i n l e v e l o f h a e m o l y m p h , o v a r y a n d h e p a t o p a n c r e a s w a s q u a n t i f i e d . T h e h a e m o l y m p h p r o t e i n o f A l b u n e a s y m m i s t a s h o w s a s t e a d y i n c r e a s e f r o m p o s t m o l t ( 2 . 7 + _ 0 . 2 m g / m l ) t o p r e m o l t ( 6 . 3 + _ 0 . 2 m g / m l ) d u r i n g t h e n o n - r e p r o d u c t i v e m o l t . T h i s i s d u e t o t h e c o n t i n u o u s s u p p l y o f p r o t e i n n e c e s s a r y f o r t h e s y n t h e s i s o f c u t i c l e . T h e r e a f t e r , t h e p r o t e i n c o n t e n t s l o w l y d e c r e a s e s i n D 2 a n d D 4 ( 6 . 3 + _ 0 . 2 t o 4 . 3 + _ 0 . 1 m g / m l ) . T h i s m i g h t b e d u e t o t h e u t i l i z a t i o n o f t h e p r o t e i n f o r n e w c u t i c l e f o r m a t i o n . A s h a r p d e c l i n e i n p r o t e i n c o n t e n t o f h a e m o l y m p h i s m a i n l y d u e t o w a t e r i n f l u x t h r o u g h t h e s o f t n e w c u t i c l e w h i c h d i l u t e s t h e h a e m o l y m p h ( S k i n n e r , 1 9 8 5 ; C h a n g , 1 9 9 2 ) . T h e h a e m o l y m p h p r o t e i n l e v e l a l s o s h o w s f l u c t u a t i o n d u r i n g r e p r o d u c t i v e m o l t c y c l e . T h e h a e m o l y m p h p r o t e i n l e v e l r e c o r d e d a s i g n i f i c a n t d e c l i n e f r o m p o s t m o l t t o i n t e r m o l t ( 3 . 9 + _ 0 . 1 t o 2 . 1 + _ 0 . 1 m g / m l ) . T h e p r o t e i n s h o w s a n i n c r e a s i n g t r e n d i n D 1 s t a g e ( 3 . 2 + _ 0 . 2 m g / m l ) . T h e g r a d u a l i n c r e a s e i n t h e p r o t e i n l e v e l f r o m m a t u r i n g t o r i p e s t a g e ( 2 . 5 + _ 0 . 5 t o 4 . 8 + _ 1 . 0 m g / m l ) h a s s u g g e s t e d t h a t t h e p r o t e i n s i n t h e h a e m o l y m p h i s n e c e s s a r i l y s e q u e s t e r e d i n t o t h e o v a r y f o r i t s m a t u r a t i o n . T h e o v a r i a n p r o t e i n c o n t e n t s h o w s g r a d u a l i n c r e a s e d u r i n g t h e n o n - r e p r o d u c t i v e m o l t c y c l e ( 7 4 . 8 + _ 1 . 5 t o 1 4 5 . 8 + _ 1 . 7 u g / m g ) . T h e i n c r e a s e i n p r o t e i n c o n t e n t s h o w s a n a c c u m u l a t i o n o f y o l k p r o t e i n i n t o t h e o o c y t e f o r i t s m a t u r a t i o n . I n t h e r e p r o d u c t i v e m o l t , t h e p r o t e i n l e v e l f a l l s s h a r p l y j u s t a f t e r s p a w n i n g , ( 1 4 5 . 8 + _ 1 . 7 t o 4 7 u g / m l ) . F r o m C 1 t o D 0 t h e o v a r y d e v e l o p m e n t d o e s n o t p r o c e e d s a n d t h e o v a r y r e m a i n s i n s p e n t s t a g e u n t i l h a t c h i n g w h e r e t h e p r o t e i n v a l u e r e m a i n s s t a t i c a n d t h e m a t u r a t i o n o f o v a r y d o e s n o t c o i n c i d e s w i t h t h e d e v e l o p m e n t o f o o c y t e i n A l b u n e a s y m m i s t a u n l i k e t h a t o f E m e r i t a a s i a t i c a . A f t e r h a t c h i n g t h e p r o t e i n l e v e l i n c r e a s e s f r o m 4 7 t o 7 4 . 9 + _ 3 . 7 u g / m l i n t h e o v a r y . T h e o v a r y d o e s n t m o l t a n d t h e m a t u r a t i o n i n t h i s c y c l e . T h e r e f o r e , t h e a n i m a l u n d e r g o e s m o l t a n d t h e m a t u r a t i o n o f o v a r y c o n t i n u e s i n t h e f o l l o w i n g m o l t c y c l e . T h e r e p r o d u c t i v e p r o c e s s s u c h a s s p a w n i n g a n d h a t c h i n g d o n o t o c c u r d u r i n g t h i s c y c l e a n d t h e o v a r y c o m p l e t e s i t s m a t u r a t i o n a n d r e m a i n s r e a d y f o r s u b s e q u e n t s p a w n i n g . T h e i n c r e a s e i n t h e p r o t e i n l e v e l f r o m m a t u r i n g t o r i p e K a n a g a l a k s h m i . , 2 0 1 1 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 1 ) 2 : 6 8 - 7 2 7 0 F i g . 1 . F i g . 2 .

J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y s t a g e ( 4 7 . 3 + _ 3 . 5 t o 1 4 5 . 3 + _ 1 . 3 u g / m g ) i n d i c a t e s t h a t t h e a c c u m u l a t i o n o f p r o t e i n i n t h e o o c y t e o c c u r s d u r i n g t h e o v a r i a n d e v e l o p m e n t a l s t a g e s . T h e p r o t e i n c o n t e n t o f t h e s y n t h e t i c o r g a n h e p a t o p a n c r e a s s h o w s a h i g h e r f l u c t u a t i o n b o t h d u r i n g r e p r o d u c t i v e m o l t c y c l e ( 2 9 . 5 + _ 1 . 9 t o 1 4 8 . 2 + _ 1 . 8 u g / m g ) a n d i n n o n - r e p r o d u c t i v e m o l t c y c l e ( 1 4 4 . 8 + _ 1 . 0 t o 1 2 5 . 1 + _ 5 . 2 u g / m g ) . H o w e v e r i t d o e s n t s h o w a n y c o r r e l a t i o n w i t h o v a r y a n d h a e m o l y m p h p r o t e i n . T h i s i s m a i n l y d u e t o t h a t h e p a t o p a n c r e a s i s n o t o n l y i n v o l v e d i n c u t i c l e a n d v i t e l l o g e n i n s y n t h e s i s b u t a l s o i n v o l v e d i n s y n t h e s i s o f o t h e r p r o t e i n s w h i c h p l a y a r o l e i n p h y s i o l o g y o f t h i s s a n d c r a b A l b u n e a s y m m i s t a . E m e r i t a a s i a t i c a w h i c h b r e e d s c o n t i n u o u s l y a n d r e p e a t e d l y a l s o s h o w s s i m i l a r r e s u l t s ( S u b r a m o n i a m , 1 9 7 7 , 1 9 7 9 , G u n a m a l a i , 2 0 0 2 ) . A s t e a d y i n c r e a s e o f h a e m o l y m p h p r o t e i n f r o m p o s t m o l t ( A ) ( 5 . 2 3 + _ 1 . 5 8 m g / m l ) t o p r e m o l t ( D 0 ) ( 2 2 . 4 7 + _ 5 . 3 1 m g / m l ) a s w e l l a s a s h a r p d i p i n t h e p r e m o l t s t a g e D 1 ( 2 2 . 4 7 + _ 5 . 3 1 t o 1 6 . 8 8 + _ 4 . 8 3 m g / m l ) w e r e d u e t o e m b r y o n i c d e v e l o p m e n t a n d h a t c h i n g o f t h e l a r v a e . T h e p r o t e i n l e v e l r i s e s s h a r p l y t o r e a c h a p e a k v a l u e i n D 2 s t a g e ( 2 5 . 4 2 + _ 3 . 2 6 m g / m l ) . T h e p r o t e i n l e v e l f u r t h e r g e t d e c r e a s e d d u e t o e c d y s i s i n D 3 & D 4 s t a g e ( 9 . 1 8 + _ 0 . 3 2 m g / m l ) . T h e p r o t e i n c o n t e n t o f b o t h o v a r y a n d o v a r i a n i n d e x r i s e s s p o n t a n e o u s l y f r o m C 1 t o D 0 s t a g e ( 8 . 1 8 + _ 2 . 8 3 % t o 1 5 . 7 5 + _ 1 . 4 4 % ) a t t h e t i m e o f h a t c h i n g , t h e o v a r y a l m o s t c o m p l e t e s i t s m a t u r a t i o n a n d r e a d y f o r n e x t s p a w n i n g ( G u n a m a l a i , 2 0 0 2 ) . A s i m i l a r i n c r e a s e i n p r o t e i n c o n t e n t o f h a e m o l y m p h d u r i n g p o s t m o l t ( A B ) , i n t e r m o l t ( C ) , e a r l y p r e m o l t ( D 0 , D 1 a n d D 2 ) a n d i t s d e c r e a s e d u r i n g l a t e p r e m o l t ( D 3 ) h a s b e e n r e p o r t e d i n P e a n a e u s i n d i c u s . A s i g n i f i c a n t i n c r e a s e o f p r o t e i n l e v e l i n o v a r y h a s a l s o b e e n o b s e r v e d f r o m s t a g e I I t o s t a g e V ( R e a d a n d C a u l t o n , 1 9 7 9 ) . F u r t h e r i n v e s t i g a t i o n o n t h e f l u c t u a t i o n o f c a r b o h y d r a t e a n d l i p i d l e v e l s i n t h e s y n t h e t i c s i t e t o g e t h e r w i t h t h e i r u t i l i z a t i o n d u r i n g d i f f e r e n t p h y s i o l o g i c a l e v e n t s w i l l t h r o w m o r e l i g h t o n t h e b i o c h e m i c a l b a s i s o f t h e g r o w t h a n d d e v e l o p m e n t i n A l b u n e a s y m m i s t a . A C K N O W L E D G E M E N T I e x p r e s s m y h e a r t f e l t g r a t i t u d e t o m y m o t h e r M r s . K . V a s a n t h a a n d m y h u s b a n d M r . R . V i v e k a n a n d a n f o r t h e i r c o n s t a n t m o t i v a t i o n a n d m o r a l s u p p o r t . I e x t e n d m y g r a t i t u d e t o m y d a u g h t e r V . N a n d i k a R E F E R E N C E S B a r l o w J a n d R i d g w a y G J . 1 9 9 6 . C h a n g e s i n s e r u m p r o t e i n d u r i n g t h e m o l t a n d r e p r o d u c t i v e c y c l e s o f t h e A m e r i c a n L o b s t e r , H o m a r u s a m e r i c a n u s . J F i s h . R e s . B i o l . , C a n a d a . 2 6 : 2 1 0 1 - 2 1 0 9 . B y a r d E H . 1 9 7 6 . T h e f e m a l e s p e c i f i c p r o t e i n a n d r e p r o d u c t i o n i n t h e l o b s t e r , H o m a r u s a m e r i c a n u s . P h D . T h e s i s , U n i v . o f W e s t e r n O n t a r i o , L o n d o n O n t a r i o . 1 0 7 . C h a n g E S . 1 9 9 2 . E n d o c r i n o l o g y . I n : M a r i n e s h r i m p c u l t u r e : P r i n c i p l e s a n d p r a c t i c e s . ( A . W . f a s t a n d L . J . L e s t e r , E d s ) . E l s e v i e r S c i e n c e p u b l i s h e r s B . V A m s t e r d a m . 5 3 - 9 1 . C h a p m a n M J . 1 9 8 0 . A n i m a l l i p o p r o t e i n s : c h e m i s t r y , s t r u c t u r e a n d c o m p a r a t i v e a s p e c t s . J . L i p i d . R e s . , 2 1 : 7 8 9 - 8 5 3 . C h i n o H a n d K i t a z a w a K . 1 9 8 1 . D i a c y l g l y c e r o l c a r r y i n g l i p o p r o t e i n o f h e m o l y m p h o f t h e l o c u s t a n d s o m e i n s e c t s . J L i p i d . R e s . , 2 2 : 1 0 4 2 - 1 0 5 2 . C r o w l e y G J . 1 9 6 3 . S t u d i e s i n a r t h r o p o d s e r o l o g y . I C h a n g e i n h a e m o l y m p h c o m p o s i t i o n a s r e l a t e d t o t h e e c d y s i a l c y c l e . W a s m a n n . J . B i o l . , 2 1 : 1 7 7 - 1 9 1 . D o m b o r i c e a n u A . 1 9 3 2 . C o m p o s i t i o n c h i m i q u e e t p h y s i c c h e m i q u e s d u z i q u i d e c a v i t a t i v e c h e z l e s c r u s t a c e d e c a p o d s ( p h y s i o l o g i c d e l a c a l c i f i c a t i o n ) . A r c h s . R o u m . P a t h . E x p . M i c r o b i o l . , 5 L : 2 3 9 - 3 0 9 . D r a c h P a n d T e i s s i e r G . 1 9 3 9 . M u l e t p r o t i d e m i e c h e z l e s c r a b s . C . R S e a n c . S o c . B i o . , P a r i s . 1 3 1 : 1 1 9 9 - 1 2 0 1 . D r i l h o n A . 1 9 3 5 . E t u d e b i o c h e m i q u e d e l a m u e c h e n z c r u s t a c e c e s b r a c h y o u r e s ( M a i a s q u i n a d a ) . A n n . P h y s i o l . P h y s i c o c h e m . B i o l . , 1 1 : 3 0 1 - 3 2 6 . G l y n n J P . 1 9 6 8 . S t u d i e s o n t h e i o n i c , p r o t e i n a n d p h o s p h a t e c h a n g e s a s s o c i a t e d w i t h t h e m o l t c y c l e o f H o m a r u s v u l g a r i s . C o m p . B i o c h e m . P h y s i o l . , 2 6 : 9 3 7 - 9 4 6 . G u n a m a l a i V . 2 0 0 2 . S y n c h r o n i s a t i o n o f m o l t i n g a n d o o g e n i c c y c l e s i n a c o n t i n u o u s l y b r e e d i n g p o p u l a t i o n o f t h e s a n d c r a b E m e r i t a a s i a t i c a o n t h e m a d r a s c o a s t , s o u t h i n d i a . J . C r u s t . B i o l . , 2 2 : 3 7 7 - 3 8 9 G u n a m a l a i V . 2 0 0 2 . S y n c h r o n i s a t i o n o f m o l t i n g 7 1 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 1 ) 2 : 6 8 - 7 2 K a n a g a l a k s h m i . , 2 0 1 1

J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y a n d o o g e n i c c y c l e s i n a c o n t i n u o u s l y b r e e d i n g p o p u l a t i o n o f t h e s a n d c r a b , E m e r i t a a s i a t i c a o n t h e M a d r a s c o a s t , S o u t h I n d i a . J . C r u s t . B i o l . , 2 2 : 3 7 7 - 3 8 9 . K e s s e l M S . 1 9 6 8 . M e c h a n i s m o f p r o t e i n y o l k s y n t h e s i s a n d d e p o s i t i o n i n c r u s t a c e a n o o c y t e s . Z . Z e l f o r s c h . , 8 9 : 1 5 1 - 1 7 6 . L e e R F a n d P u p p i o n e D L . 1 9 8 8 . L i p o p r o t e i n s I a n d I I f r o m t h e h e m o l y m p h o f t h e b l u e c r a b , C a l l i n e c t u s s a p i d u s , L i p o p r o t e i n I I a s s o c i a t e d w i t h v i t e l l o g e n i n s . J . E x p . Z o o l . , 2 4 8 : 2 7 8 - 2 8 9 . L e o n e C A . 1 9 5 3 . P r e l i m i n a r y o b s e r v a t i o n s o n i n t r a - s p e c i f i c v a r i a t i o n s o f t h e l e v e l s o f t o t a l p r o t e i n i n t h e s e r a o f s o m e d e c a p o d s c r u s t a c e a n . S c i e n c e , N e w Y o r k . 1 1 8 : 2 9 5 - 2 9 6 . L o w r y D H , R o s e n b r o u g h N J , F a r r F L a n d R a n d e l l R J . 1 9 5 1 . P r o t e i n m e a s u r e m e n t w i t h t h e f o l i n p h e n o l r e a g e n t . J . B i o l . C h e m . , 1 9 3 : 2 6 5 - 2 7 5 . R e a d G H L a n d C a u l t o n M S . 1 9 7 9 . C h a n g e s i n m a s s a n d c h e m i c a l c o m p o s i t i o n d u r i n g t h e m o u l t c y c l e a n d o v a r i a n d e v e l o p m e n t i n i m m a t u r e a n d m a t u r e P e n a e u s i n d i c u s M i l n e e d w a r d s . C o m p . B i o c h e m . P h y s i o l . , 6 6 : 4 3 1 - 4 3 7 . R o b e r t s o n J D . 1 9 6 0 . I o n i c r e g u l a t i o n i n t h e c r a b , C a r c i n u s m a e n u s ( L ) i n r e l a t i o n t o t h e m o u l t i n g c y c l e . C o m p . B i o c h e m . P h y s i o l . , I : 1 8 3 : 2 1 2 . S k i n n e r D M . 1 9 8 5 . M o l t i n g a n d r e g e n e r a t i o n . I n : T h e B i o l o g y o f C r u s t a c e a , ( D . E . B l i s s a n d L . H . M a n t e l , E d s ) , A c a d e m i c p r e s s , N e w Y o r k . V o l . 9 : 4 3 - 1 4 6 . S u b r a m o n i a m T . 1 9 7 7 . C o n t i n u o u s b r e e d i n g i n t h e t r o p i c a l a n o m u r a n c r a b , E m e r i t a a s i a t i c a ( M i l n e E d w a r d s ) . J . E x p . M a r . B i o l . E c o l . , 6 5 : 2 5 9 - 2 6 8 . S u b r a m o n i a m , T . 1 9 7 9 . S o m e a s p e c t s o f r e p r o d u c t i v e e c o l o g y o f a m o l e c r a b , E m e r i t a a s i a t i c a ( M i l n e E d w a r d s ) . J . E x p . M a r B i o l . E c o l . , 6 5 : 2 5 9 - 2 6 8 . Z e r b i b C . 1 9 7 3 . C o n t r i b u t i o n a L e f u d e u l t r a s t r u c t u a l e d e L o v o c y t e c h e z l a c r u s t a c e a m p h i p o d e O r c h e s t r i a g a m m e r e l l a P a l l a s C . R . A c a d S c i . ( P a r i s ) S e r . D . N a t . S c i . , 2 7 7 : 1 2 0 9 - 1 2 1 2 . K a n a g a l a k s h m i . , 2 0 1 1 J o u r n a l o f R e s e a r c h i n B i o l o g y ( 2 0 1 1 ) 2 : 6 8 - 7 2 7 2